一种新的多肽--人类促肾上腺皮质激素释放因子26和编码这种多肽的多核苷酸制造技术

本发明专利技术公开了一种新的多肽－人类促肾上腺皮质激素释放因子２６，编码此多肽的多核苷酸和经ＤＮＡ重组技术产生这种多肽的方法。本发明专利技术还公开了此多肽用于治疗多种疾病的方法，如恶性肿瘤，血液病，ＨＩＶ感染和免疫性疾病和各类炎症等。本发明专利技术还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明专利技术还公开了编码这种新的人类促肾上腺皮质激素释放因子２６的多核苷酸的用途。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，具体地说，本专利技术描述了一种新的多肽--人类促肾上腺皮质激素释放因子26，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本专利技术还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。人类促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)是一条由41个氨基酸残基组成的单链多肽，它的C端由异亮氨酸残基组成并缺少二硫键(Shibahara,S.,Morimoto,Y.,Furutani,Y.,Notake,M.,Takahashi,H.,Shimizu,S.,Hori kawa,S.and Numa,S.(1983)EMBO J.,2,775-779)。促肾上腺皮质激素释放因子是促肾上腺皮质激素(ACTH),β-内啡肽和其它来源于前垂体腺的肽段分泌端的主要生理调节元素(Vale,W.,Spicess,J.,Rivier,C.andRivier,J.(1981)Science,21,3,1394-1397)。人类促肾上腺皮质激素释放因子可能是前导肽化学信使，通过它中央神经系统可以控制垂体-肾上腺素轴的活动从而最终启动生物体对压力的反应(Dunn,A,J.and Berridge,C.W.(1990)Brain.Res.Rev.,15.71-100)。而且异常CRF神经活动可能导致一系列的精神疾病，这些疾病包括病变性精神失常，焦虑型精神失常，神经性食欲缺乏以及老年痴呆症(Owens,M.J.and Nemeroff,C,B.(1991)Pharmacol.Rev.,43,425-473)。CRF在小分子水平与属于受体G蛋白-连接家族的膜受体蛋白反应。CRF结合于前垂体的膜组织匀浆，包含一个高亲和力0.1nM组元和一个低亲和力20nM的结合位点(DeSouza.E.B.,Insel,T.R.,Perrin,M.H.,Rivier,J.,Vale,W.W.andKuhar,M.J.(1985)Neurosci.Lett.,56.121-128)。人类促肾上腺皮质激素释放因子包含一个延伸的N末端四肽，该四肽与一个介于氨基酸残基6和36之间的N末端α转角和C末端连接(Chri stophe R.JB,ChristianCambillau and Herve Darbon(1993)Protein Eng Feb,6(2)149-156)。N末端的α转角开始于一个脯氨酸残基，N末端的前四个氨基酸残基与该脯氨酸残基连接。在氨基酸残基6和20之间是两亲性氨基酸残基。氨基酸残基21和32之间的氨基酸残基缺乏明显的亲水性或疏水性，其中唯一一个丙氨酸残基可能是中性的(Kyte,J.and Doolitt le,R.(1982)J.Mol.Biol.,157,105-132)。值得注意的是这样的两亲性转角存在于大量的前叶激素中。本专利技术人的多肽亦含有CRF结构，具有上述CRF的结构特征，同时推测其具有与CRF相似的生物学功能。由于如上所述人类促肾上腺皮质激素释放因子26蛋白在机体内重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人类促肾上腺皮质激素释放因子26蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人类促肾上腺皮质激素释放因子26蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。本专利技术的一个目的是提供分离的新的多肽--人类促肾上腺皮质激素释放因子26以及其片段、类似物和衍生物。本专利技术的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人类促肾上腺皮质激素释放因子26的多核苷酸的重组载体。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人类促肾上腺皮质激素释放因子26的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。本专利技术的另一个目的是提供生产人类促肾上腺皮质激素释放因子26的方法。本专利技术的另一个目的是提供针对本专利技术的多肽--人类促肾上腺皮质激素释放因子26的抗体。本专利技术的另一个目的是提供了针对本专利技术多肽--人类促肾上腺皮质激素释放因子26的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。本专利技术的另一个目的是提供诊断治疗与人类促肾上腺皮质激素释放因子26异常相关的疾病的方法。本专利技术涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。本专利技术还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种(a)具有SEQ ID NO:1中37-756位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-3014位的序列。本专利技术另外涉及一种含有本专利技术多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本专利技术多肽的方法。本专利技术还涉及一种能与本专利技术多肽特异性结合的抗体。本专利技术还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制人类促肾上腺皮质激素释放因子26蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本专利技术的多肽。本专利技术还涉及用该方法获得的化合物。本专利技术还涉及一种体外检测与人类促肾上腺皮质激素释放因子26蛋白异常表达相关的疾病或疾病易感性的方法，包括检测生物样品中所述多肽或其编码多核苷酸序列中的突变，或者检测生物样品中本专利技术多肽的量或生物活性。本专利技术也涉及一种药物组合物，它含有本专利技术多肽或其模拟物、激活剂、拮抗剂或抑制剂以及药学上可接受的载体。本专利技术还涉及本专利技术的多肽和/或多核苷酸在制备用于治疗癌症、发育性疾病或免疫性疾病或其它由于人类促肾上腺皮质激素释放因子26表达异常所引起疾病的药物的用途。本专利技术的其它方面由于本文的技术的公开，对本领域的技术人员而言是显而易见的。本说明书和权利要求书中使用的下列术语除非特别说明具有如下的含义“核酸序列”是指寡核苷酸、核苷酸或多核苷酸及其片段或部分，也可以指基因组或合成的DNA或RNA，它们可以是单链或双链的，代表有义链或反义链。类似地，术语“氨基酸序列”是指寡肽、肽、多肽或蛋白质序列及其片段或部分。当本专利技术中的“氨基酸序列”涉及一种天然存在的蛋白质分子的氨基酸序列时，这种“多肽”或“蛋白质”不意味着将氨基酸序列限制为与所述蛋白质分子相关的完整的天然氨基酸。蛋白质或多核苷酸“变体”是指一种具有一个或多个氨基酸或核苷酸改变的氨基酸序列或编码它的多核苷酸序列。所述改变可包括氨基酸序列或核苷酸序列中氨基酸或核苷酸的缺失、插入或替换。变体可具有“保守性”改变，其中替换的氨基酸具有与原氨基酸相类似的结构或化学性质，如用亮氨酸替换异亮氨酸。变体也可具有非保守性改变，如用色氨酸替换甘氨酸。“缺失”是指在氨基酸序列或核苷酸序列中一个或多个氨基酸或核苷酸的缺失。“插入”或“添加”是指在氨基酸序列或核苷酸序列中的改变导致与天然存在的分子相比，一个或多个氨基酸或核苷酸的增加。“替换”是指由不同的氨基酸或核苷酸本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的多肽－人类促肾上腺皮质激素释放因子２６，其特征在于它包含有：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２所示的氨基酸序列的多肽、或其多肽的活性片段、类似物或衍生物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：毛裕民，谢毅，
申请(专利权)人：上海博道基因技术有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]