一步法多指标检测心肌梗塞的快速金标检测试剂盒制造技术

本发明专利技术涉及一种一步法多指标检测心肌梗塞的快速金标检测试剂盒，它包括底板，样品垫，吸水纸，以及固定有金标抗体的玻璃纤维膜。底板的位于玻璃纤维膜与上端吸水纸之间的区域内分别喷有抗Ａ抗体Ⅱ条带、链霉亲和素条带和抗抗体条带。玻璃纤维膜包被的金标抗体包含金标抗Ａ抗体Ⅰ和金标抗Ｂ抗体Ⅰ，玻璃纤维膜还包被联结了生物素的抗Ｂ抗体Ⅱ。本发明专利技术将测心肌梗塞标志物的两个或多个单独的免疫反应系统组合到心肌梗塞的一个检测试剂盒中，通过一次检测即可同时获得两个以上心肌梗塞的检测项目结果，具有检测灵敏度、准确性和可靠性。（*该技术在2021年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物医学领域，特别涉及一种在医学检验中应用的一步法多指标检测心肌梗塞的快速金标检测试剂盒。免疫胶体金技术作为一种新的免疫学方法，其发展十分迅速，在生物医学各研究领域，特别是在医学检验中得到了日益广泛的应用。胶体金已成为继荧光素、放射同位素和酶之后，在免疫标记技术中较为常用的一种非放射性标剂。胶体金是由氯金酸在还原剂如鞣酸、柠檬酸三钠的作用下聚合形成特定大小的金颗粒，并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态，它具有高电子密度、能与多种生物大分子结合的特点。免疫金标记技术主要利用了金颗粒的这一特征，在金标蛋白结合处于显微镜下可见黑褐色颗粒，当这些标物在相应的配体处大量聚集时，肉眼可见红色或紫红色斑点，因而用于定性或半定量的快速免疫检测方法中。由于胶体金检测试剂盒与放免、酶标试剂盒相比，具有操作使用安全、简便、易单人份检测和快速等优点，因此近几年来金标诊断试剂盒正日益流行，在某些项目上已逐渐替代了放免、酶标试剂盒，如早早孕试剂条(HCG Test Strip)等。急性心肌梗塞(Acute Myocardial Infarction，AMI)病情凶险，死亡率高，是一种较为危险的疾病，AMI致死的一个重要原因就是不能早期诊断，延误了治疗时机。所以近年来，对于AMI标志物的研究十分活跃。AMI的生化标志物包括有肌红蛋白(Myoglobin，Mb)、心肌肌钙蛋白T和心肌肌钙蛋白I(cardiac Troponin T，cTnT，cardiac Troponin I，cTnI)、肌酸激酶(Myoglobin，MB)同工酶(Cytokinase-Myoglobin，CK-MB)、糖原磷酸化酶同工酶(GPBB)等。目前市场上现有的同类产品有罗氏公司(Roche)生产的cTnT金标检测条，福建三明蓝波生物技术研究所研制的血清Mb金标免疫斑点法等。这些产品具有下列缺点1、只能单独检测血液中的某个心梗指标。2、单个项目检测结果的灵敏度和特异性稍逊。3、如果要得到两项或多项结果则需操作两次以上，较为麻烦。4、两个或多个独立试剂盒的生产成本要高于一个复合试剂盒。5、这些试剂盒的组成均适用于医院诊断，而不适用于家庭，因为试剂盒包装内无采血针、小吸管及真空包装酒精绵球。本专利技术的目的是提供一种一步法多指标检测心肌梗塞的快速金标检测试剂盒，通过一次检测即可同时获得两个以上心肌梗塞的检测项目结果。本专利技术的技术方案如下一种一步法多指标检测心肌梗塞的快速金标检测试剂盒，它包括底板，在底板下端设置的样品垫，在底板上端设置的吸水纸，以及在底板的位于样品垫上方处贴置的固定有金标抗体的玻璃纤维膜，所述底板的位于玻璃纤维膜与上端吸水纸之间的区域内分别喷有抗A抗体II条带、链霉亲和素条带和抗抗体条带；所述玻璃纤维膜包被的金标抗体包含金标抗A抗体I和金标抗B抗体I，玻璃纤维膜还包被联结了生物素的抗B抗体II。本专利技术将测心肌梗塞标志物的两个或多个单独的免疫反应系统组合到心肌梗塞的一个检测试剂盒中，运用于金标检测板或检测条，其检测的检出率、灵敏度指标符合临床检测要求，提高了检测的准确性和可靠性。使用本专利技术时，可将两个或多个心肌梗塞检测项目放在一块检测板上，一次检测即可同时获得两个或多个检测项目结果，快速而又简便，提高了效率。通过多个项目的联合检测，增加了检测的特异性，提高了检测的灵敏度，准确、可靠，更有助于作出准确的诊断。本专利技术的产品由于省却了重复操作的材料，所以其生产成本低于各单项检测板相加之和的成本。本产品采用适合家庭用的包装，即在每一试剂盒中加入采血针、取血吸管、消毒棉球，病人如感不适，可在家中采血检测，10分钟即出结果。本产品对患者尤其对隐性心绞痛的患者，根据检测结果及时去医院进一步确诊和治疗具有积极的帮助作用。同时，病人在家中可自我观察是否再度梗塞，解决了病人若有不适必须去医院排队做检测的问题，节省了病人看病时间。下面结合附图和实施例对本专利技术作详细说明。附图说明图1是一种一步法多指标检测心肌梗塞的快速金标检测试剂盒的结构示意图。图2是图1检测试剂盒的外观示意图。图3是图1检测试剂盒的原理图。图4表示图1检测试剂盒的检测结果释义。参看图1，一种一步法多指标检测心肌梗塞的快速金标检测试剂盒包括底板1，在底板1下端设置的样品垫2，在底板1上端设置的吸水纸3，以及底板1的位于样品垫2上方处贴置的固定有金标抗体的玻璃纤维膜4。在底板1的位于玻璃纤维膜4与上端吸水纸3之间的区域内分别喷有抗A抗体II条带5、链霉亲和素条带6和抗抗体条带7。玻璃纤维膜4包被的金标抗体包含金标抗A抗体I和金标抗B抗体I。玻璃纤维膜4还包被联结了生物素的抗B抗体II。在本实施例中，金标抗A抗体I是抗Mb抗体α。金标抗B抗体I是抗cTnTb抗体a。联结了生物素的抗B抗体II是联结了生物素的抗cTnTb抗体b。抗A抗体II条带5包被了Mb抗体β。抗抗体条带7包被了羊抗鼠二抗。参看图2，标号21是加样孔，22是T1检测带，23是T2检测带，24是C对照带。此种一步法多指标检测心肌梗塞标志物的试剂盒可以有多种形式，如Mb、cTnT联检试剂盒，GPBB、cTnI、CK-MB联检试剂盒等。由于采用了全血分离膜，因此可同时适用于血清、全血。在试剂盒的生产工艺中，对低浓度的指标(如cTnT等)采用了生物素放大的技术，因而增加了检测的灵敏度。该试剂盒组成中还装有采血针、小吸管及真空包装酒精棉球，除了在医院使用外，还可适用于家庭。本专利技术的实施例采用肌红蛋白(myoglobin，Mb)、心肌肌钙蛋白(cardiacTroponin T，cTnT)联合检测快速金标检测试剂盒。肌红蛋白(myoglobin，Mb)和心肌肌钙蛋白(cardiac Troponin T，cTnT)是心肌受损后释放的两种物质，其中Mb是早期释放物，其临界值为75ng/ml，cTnT是心肌梗塞最具特异的标志物，其临界值为0.1ng/ml。对于这两种指标的同时检测能提高灵敏度与特异性。该试剂盒将这两种检测放于一块检测板上，只需2滴血即可同时进行两项检测，快速简便而准确。参看图3，图中○表示胶体金，↓表示生物素，标号31为联结了胶体金的cTnT单抗a，32为联结了胶体金的Mb单抗α，33为联结了生物素的cTnT单抗b，34为包被在膜上的链霉亲和素，35为包被在膜上的Mb单抗β，36为包被在膜上的羊抗鼠二抗。本试剂盒采用全血分离系统、双抗体夹心免疫检测系统、生物素信号放大等原理，其检测原理如下1、在样品垫上滴加全血后，通过全血分离膜的分离，血清被分离开来，进一步运动到胶体金垫。2、在Mb检测系统中，联结胶体金的抗Mb单抗α与血标本中存在的Mb结合形成抗原一抗体复合物层析移动至检测区T1处，与包被在此的抗Mb单抗β结合形成一条紫红色条带。3、在cTnT检测系统中，联结胶体金的抗cTnT单抗a与血标本中的cTnT结合形成抗原一抗体复合物。此复合物再结合标记了生物素的抗cTnT单抗b，形成另一条紫红色条带，经层析移动至检测区T2处被包埋在此的链霉亲和素捕获固定。4、同时，多余的Mb单抗α-胶体金及cTnT单抗a-胶体金移动至对照区，与此处的羊抗鼠二抗反应生成一条紫红色C带。本试剂盒的每个包装中包含检测板1块，干燥剂1g，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种一步法多指标检测心肌梗塞的快速金标检测试剂盒，它包括底板，在底板下端设置的样品垫，在底板上端设置的吸水纸，以及在底板的位于样品垫上方处贴置的固定有金标抗体的玻璃纤维膜，其特征在于，所述底板的位于玻璃纤维膜与上端吸水纸之间的区域内分别喷有抗Ａ抗体Ⅱ条带、链霉亲和素条带和抗抗体条带；所述玻璃纤维膜包被的金标抗体包含金标抗Ａ抗体Ⅰ和金标抗Ｂ抗体Ⅰ，玻璃纤维膜还包被联结了生物素的抗Ｂ抗体Ⅱ。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：张涛，李宾，周军，龚丹，彭永济，任一萍，
申请(专利权)人：上海晶泰生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]