响应面超声波辅助提取蜂巢黄酮方法、蜂巢黄酮及作用技术

本发明专利技术属于超声提取技术领域，公开了一种响应面超声波辅助提取蜂巢黄酮方法、蜂巢黄酮及应用，预测料液比1：30、乙醇浓度:60％、提取时间30min。本发明专利技术探讨超声提取蜂巢黄酮的最佳工艺并研究了蜂巢黄酮的抗氧化活性；在单因素实验的基础上，并根据响应面Box‑Benhnken原理，构建预测模型，进一步优化提取工艺，推动蜂巢资源开发利用。蜂巢黄酮的实际提取量为0.746％。本发明专利技术的方法提取出的蜂巢黄酮具有较强的羟基自由基清除能力、还原能力、抗菌能力。本发明专利技术以蜂巢为原料，采用响应面分析法对超声波提取蜂巢黄酮工艺进行优化，并分析提取的蜂巢黄酮抗氧化活性、抗菌能力作用。

【技术实现步骤摘要】
响应面超声波辅助提取蜂巢黄酮方法、蜂巢黄酮及作用
本专利技术属于超声提取
，尤其涉及一种响应面超声波辅助提取蜂巢黄酮方法、蜂巢黄酮及应用。
技术介绍
蜜蜂巢脾是指由蜜蜂筑造的双面布满横切面为六角形巢房的脾状蜡质结构，是蜜蜂栖息、繁殖和储存食物的地方。由于在贮藏过程中果皮与蜂产品残渣的积累，随着养蜂代的增加，巢的颜色逐渐转变为棕色和黑色。蜂巢的组成成分较为复杂，有研究证实蜂巢中含有多糖、多酚、氨基酸、黄酮类等活性物质，并富含锌、硅、锰、钾、铜等微量元素。蜂巢作为中国传统中药材，其中发挥主要作用的活性物质是黄酮，其具有广谱抗菌作用，对大多数病原菌和病毒均有抑制生长的作用，能增强人体免疫力，并且还具有显著的抗氧化、抗炎、免疫调节等活性作用，被广泛应用于食品、医药、化妆品等行业。目前提取蜂巢黄酮常用的方法有溶剂提取法、微波辅助提取法、生物酶法和超临界流体提取法，这些方法耗时长、溶剂消耗量大、效率低；同时，高温也会破坏蜂巢的功能物质，不同的提取方式对提取时间的要求并不相同，例如索氏提取，一般在8小时左右，耗时长，浸泡则需要大量溶剂，生物酶法成本相对较高，微波在短时间会产生大量的热，导致高温，过高的温度会导致黄酮物质分解，效率也不明显。近年来，超声波提取方法逐渐进入公众视野，这是因为其在有机溶剂和吸附剂的使用、维护成本和能源消耗等方面的要求较低，反应时间较短，环保性能较好。超声波的优势与声学空化的产生有关，空化会导致固体基体表面的破坏或破碎，这一现象促进了分子从溶液到吸附剂的传质加速，使得吸附速率呈指数增长，平衡时间缩短。但超声效率受超声时间、料液比、溶剂浓度等具体参数的影响。通过上述分析，现有技术存在的问题及缺陷为：目前提取蜂巢黄酮常用的方法耗时长、溶剂消耗量大、效率低；同时，高温也会破坏蜂巢的功能物质。解决以上问题及缺陷的意义为：通过新的提取方式，并在其基础上进行优化，得出做好的提起工艺，对实际生产有很大的推动作用，提高蜂巢资源在相关领域的运用。
技术实现思路
针对现有技术存在的问题，本专利技术提供了一种响应面超声波辅助提取蜂巢黄酮方法、蜂巢黄酮及应用。本专利技术是这样实现的，通过以下工艺流程所得：干燥蜂巢粉0.5g→乙醇浸溶→超声波提取→抽滤过滤掉残渣A→滤液3000rpm/min离心5min→上清液A残渣A→乙醇浸溶→超声波提取→抽滤过滤掉残渣B→滤液3000rpm/min离心5min→上清液B残渣B→乙醇浸溶→超声波提取→抽滤过滤掉残渣C→滤液3000rpm/min离心5min→上清液C冷却后将上清液A、B、C用90％乙醇定容于100mL棕色容量瓶中，待测在提取工艺过程中，考虑溶剂浓度、料液比、提取时间三个提取因素不同水平对蜂巢黄酮含量的影响,选择所得蜂巢黄酮含量最佳的提取条件，在其基础上，根据响应面Box-Benhnken原理，构建模型，对提取工艺进行优化，得到回归方程：Y＝-0.75－0.068A－0.042B－0.025C+0.013AB－2.10AC－0.020BC－0.13A2－0.069B2－0.079C2。得到预测值为料液比1∶29.76g/ml、乙醇浓度56.33％、提取时间28.88min。为了便于实际操作将优化工艺选择为提取时间30min，料液比1∶30g/ml、乙醇浓度60％。本专利技术的另一目的在于提供一种由所述响应面超声波辅助提取蜂巢黄酮方法提取的蜂巢黄酮。本专利技术的另一目的在于提供一种所述蜂巢黄酮在对病原菌和病毒抑制生长中的用途。本专利技术的另一目的在于提供一种所述蜂巢黄酮在增强人体免疫力中的用途。本专利技术的另一目的在于提供一种所述蜂巢黄酮在抗氧化、抗炎、免疫调节活性作用中的用途。结合上述的所有技术方案，本专利技术所具备的优点及积极效果为：本专利技术探讨超声提取蜂巢黄酮的最佳工艺并研究了蜂巢黄酮的抗氧化活性；在单因素实验的基础上,并根据响应面Box-Benhnken原理，构建预测模型，进一步优化提取工艺，推动蜂巢资源开发利用。结果表明：预测料液比1：29.76、乙醇浓度56.33％、提取时间28.88min，此条件下模型预测的蜂巢黄酮最大提取量为0.772％。最终优化工艺为提取时间30min，料液比1：30、乙醇浓度60％、此条件下蜂巢黄酮的实际提取量为0.746％，与理论值接近。本专利技术的方法提取出的蜂巢黄酮具有较强的羟基自由基清除能力和还原能力。本专利技术以蜂巢为原料，采用响应面分析法对超声波提取蜂巢黄酮工艺进行优化，并分析提取的蜂巢黄酮抗氧化活性。附图说明为了更清楚地说明本申请实施例的技术方案，下面将对本申请实施例中所需要使用的附图做简单的介绍，显而易见地，下面所描述的附图仅仅是本申请的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下还可以根据这些附图获得其他的附图。图1是本专利技术实施例提供的乙醇浓度对总黄酮提取率的影响示意图。图2是本专利技术实施例提供的料液比对总黄酮提取率的影响示意图。图3是本专利技术实施例提供的提取时间对总黄酮提取率的影响示意图。图4是本专利技术实施例提供的不同组合变量与黄酮提取量的关系响应曲面示意图；(a)、(b)和(c)不同因素两两相互作用对黄酮含量之间的影响。图5是本专利技术实施例提供的蜂巢黄酮和Vc对羟基自由基抑制作用示意图。图6是本专利技术实施例提供的蜂巢黄酮和Vc的还原能力示意图。具体实施方式为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。针对现有技术存在的问题，本专利技术提供了一种响应面超声波辅助提取蜂巢黄酮方法、蜂巢黄酮及应用，下面结合附图对本专利技术作详细的描述。本专利技术提供的响应面超声波辅助提取蜂巢黄酮方法包括以下步骤：预测料液比1：30、乙醇浓度:60％、提取时间30min。本专利技术提供的响应面超声波辅助提取蜂巢黄酮方法业内的普通技术人员还可以采用其他的步骤实施。下面结合试验对本专利技术的技术方案作进一步的描述。1材料与方法1.1材料与试剂蜂巢由江西汇仁集团提供。芦丁标准品为光谱纯，硝酸铝、醋酸钾、无水乙醇DPPH、三氯乙酸、铁氰化钾、三氯化铁、水杨酸、邻苯三酚、抗坏血酸、硫酸亚铁、三羟甲基氨基甲酸(Tris)、双氧水、过硫酸钾、磷酸氢二钠，磷酸二氢钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、无水碳酸钠、碳酸氢钠等均为分析纯。1.2仪器与设备FA2204B电子天平，上海精科天美科学仪器有限公司；GA－5200D超声波清洗机，无锡上佳生物科技有限公司；722G型可见分光光度计，上海仪电科学仪器股份有限公司；(型号)冷冻离心机，飞科科学仪器公司；HH-3数显恒温水浴锅，国华电器有限公司。1.3试验方法1.3.1总黄酮含量的测定按照GB/T20574－2006标准方法进行测定。1.3.1.1芦丁标准本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种响应面超声波辅助提取蜂巢黄酮方法，其特征在于，所述响应面超声波辅助提取蜂巢黄酮方法的预测料液比1：30、乙醇浓度:60％、提取时间30min。/n

【技术特征摘要】
1.一种响应面超声波辅助提取蜂巢黄酮方法，其特征在于，所述响应面超声波辅助提取蜂巢黄酮方法的预测料液比1：30、乙醇浓度:60％、提取时间30min。


2.一种由权利要求1所述响应面超声波辅助提取蜂巢黄酮方法提取的蜂巢黄酮。

【专利技术属性】
技术研发人员：吕亚宁，韦启鹏，陈小连，
申请(专利权)人：江西省农业科学院畜牧兽医研究所，
类型：发明
国别省市：江西;36