菜籽粕添加谷氨酰胺作鸡饲料蛋白源改善鸡免疫力的方法技术

一种菜籽粕添加谷氨酰胺作鸡饲料蛋白源改善鸡免疫力的方法，在肉鸡日粮中添加5%‑25%的菜籽粕，并在菜籽粕日粮基础上添加0.5%‑2%谷氨酰胺，日粮添加1.0%Gln能够提高肉鸡机体免疫性能，可在一定程度上改善肠道健康。为肉鸡日粮科学配制及菜籽粕的合理利用及添加安全上限提供依据。在肉鸡饲料日粮中最大限度地以菜籽粕替代豆粕作为植物蛋白源，日粮中添加Gln最大限度降低菜籽粕的毒副作用，不影响肉鸡的正常生长，降低饲料成本，提高经济效益。

【技术实现步骤摘要】
菜籽粕添加谷氨酰胺作鸡饲料蛋白源改善鸡免疫力的方法
本专利技术涉及菜籽粕日粮添加谷氨酰胺对肉鸡的影响，尤其涉及菜籽粕添加谷氨酰胺作肉鸡饲料蛋白源保护肉鸡肠道及改善肉鸡免疫性能的方法。
技术介绍
油菜籽粕是油菜榨油后的副产物，其粗蛋白的含量为38%-40%，氨基酸组成较为合理且蛋氨酸含量较高，是良好的植物性蛋白来源，将油菜籽粕更有效地应用于畜禽饲料中是解决目前我国饲料蛋白质短缺的一个有效途径。但随着油菜粕添加量的增加，动物的生长性能、肠道形态、饲料转化率及蛋白质利用效率均有所下降，因而使得油菜籽粕在肉鸡日粮上的应用量受到一定的限制。随着日粮中菜籽粕添加量的增加，会破坏肉鸡的肠道形态，从而影响着营养物质的利用效率。因此采用合理的营养调控手段来提高菜籽粕在肉鸡日粮中利用效率成为必然。谷氨酰胺（Gln）是血液中含量最丰富的氨基酸，占到整个机体氨基酸氮来源的30%-35%，是机体中氮转运的重要载体。Gln是肠道上皮细胞的重要能量来源，是合成嘌呤和嘧啶的必需前体，在维持肠道上皮完整性和养分吸收方面发挥重要的作用。肠道是营养物质代谢、消化和吸收的主要器官，也是体内最大的免疫器官。促进小肠上皮细胞增殖，对促进肠道发育、维持家禽健康及提高养分消化利用具有重要意义。
技术实现思路
本专利技术的目的是菜籽粕添加谷氨酰胺作鸡饲料蛋白源提高鸡免疫力的方法，在肉鸡日粮中添加5%-25%的菜籽粕，并在菜籽粕日粮基础上分别添加0.5%-2%谷氨酰胺，对1-42日龄肉鸡生长性能（平均日增重、平均日采食量及料重比）、免疫性能（包括免疫器官指数、肠道分泌型sIgA及肠道粘蛋白1和2）、肠道形态（绒毛高度、隐窝深度及绒毛高度与隐窝深度比值）、肠道紧密连接蛋白（Occudin-1、ZO-1及Claudin）mRNA表达，都起到较好的效果。试验结果表明日粮添加1.0%Gln能够提高肉鸡机体免疫性能，可在一定程度上改善肠道健康。菜籽粕是油菜籽压榨或浸提工艺生产食用油后的副产品，粗蛋白含量在34.8%~40%，富含蛋氨酸，矿物质中的钙、磷和B族维生素等含量丰富，是替代豆粕的优选植物性蛋白原料。然而，菜籽粕中含有葡萄糖硫甙、芥子碱、单宁等抗营养因子，会对动物产生一定的毒害作用及抗营养作用。研究表明，在早期肉鸡日粮添加10%左右的菜粕并不影响肉鸡的生长性能。但随菜籽粕添加量的增加，肉鸡的生长性能、器官发育等受到抑制。研究显示，菜籽粕日粮菜籽粕含量达到或超过20%时，肉鸡的肠道形态受到破坏。因而，为了提升菜籽粕的利用，本专利技术旨在选用一定的外源营养调控剂来克服以上的缺陷是一种有效的方法。所述的外源营养调控剂为谷氨酰胺（Gln）。谷氨酰胺（Gln）是机体内一种重要的营养素，在肌肉和血液中含量比较丰富，是一种重要的功能性氨基酸。Gln是蛋白质、氨基酸、嘌呤等生物大分子合成的重要前体，也是肠黏膜上皮细胞快速分裂增殖的主要能源物质，改善小肠黏膜功能和维持肠道黏膜健康方面起着重要的作用。大量研究表明，日粮添加1%Gln显著增加了肉鸡十二指肠及空肠绒毛高度，增加肠道绒毛高度与隐窝深度的比值，有利于维持肠道形态结构的完整性及提高肠道黏膜免疫水平。在肉鸡日粮中分别添加0%、0.5%、1%及1.5%Gln，结果发现，日粮添加Gln显著增加了肉鸡胸腺指数及脾脏指数，并且以1%Gln添加效果最好。但就我们所知，有关Gln对菜籽粕日粮肉鸡免疫性能及肠道免疫机能的影响还未见报道。因此，本方法用鸡为对象，通过在其日粮中添加20%的菜籽粕和不同比例的Gln，对肉鸡免疫性能及肠道免疫机能的影响，以期为肉鸡日粮科学配制及菜籽粕的合理利用及添加安全上限提供依据。采用本方法的有益效果：在肉鸡饲料日粮中最大限度地以菜籽粕替代豆粕作为植物蛋白源，日粮中添加Gln最大限度降低菜籽粕的毒副作用，不影响肉鸡的正常生长，降低饲料成本，提高经济效益，是行之有效的方法之一。附图说明图1为20%菜籽粕和Gln添加对鸡空肠黏膜sIgA含量的影响图。图2为20%菜籽粕添加对空肠黏膜MUC1mRNA表达的影响图。图3为20%Gln添加对空肠黏膜MUC2mRNA表达的影响图。具体实施方式本专利技术的菜籽粕添加谷氨酰胺作鸡饲料蛋白源改善鸡免疫力的方法，在肉鸡日粮中添加5%-25%的菜籽粕，并在菜籽粕日粮基础上分别添加0.5%-2%谷氨酰胺，对1-42日龄肉鸡生长性能（平均日增重、平均日采食量及料重比）、免疫性能（包括免疫器官指数、肠道分泌型sIgA及肠道粘蛋白1和2）、肠道形态（绒毛高度、隐窝深度及绒毛高度与隐窝深度比值）、肠道紧密连接蛋白（Occudin-1、ZO-1及Claudin）mRNA表达，都起到较好的效果。试验结果表明日粮添加1.0%Gln能够提高肉鸡机体免疫性能，可在一定程度上改善肠道健康。其具体材料与方法详述如下：1.1试验材料及来源试验用菜籽粕购自遵义金鼎农业科技有限公司（粗蛋白含量为35.0%，葡萄糖硫甙含量为34.5μmol/g）；谷氨酰胺（glutamine，Gln）购自上海斐雅科技有限公司，含量99.10%。1.2试验设计及饲养管理选取1d体重相近且健康的黔东南小香鸡120只，随机分为4个处理（A、B、C及D），每个处理5个重复，每个重复6只鸡。其中A组饲喂基础日粮（对照组，不添加菜籽粕），B组饲喂添加20%菜籽粕日粮，C组和D组分别在B组日粮的基础上额外添加0.5%和1%Gln，试验期为42d。具体日粮配方及营养水平如表1所示。饲养管理具体如下：试验1~3d鸡舍内的温度为32~34℃，以后每周降低2~3℃，使最终室温维持在26℃左右。试验1~3d鸡舍内湿度维持在70%左右，以后维持在60%~65%左右。每天投料3次（早、中、晚各1次），整个试验期鸡只自由采食和饮水。按常规鸡只免疫程序进行免疫，试验地点为贵州榕江山农发展有限公司。1.3试验主要仪器VELPZX3型旋涡混合器（东南科仪）；UV-5200紫外可见分光光度计（上海元析仪器有限责任公司）；HL-7K掌式离心机（上海沪析实业有限公司）；R134a-低温高速离心机（Effendorf，美国）；CB1600-H型超净工作台（苏洁医疗器械（苏州）有限公司）；ND2000超微量核酸蛋白测定仪（Thermo，德国）；CFXConnect-三通道梯度荧光定量PCR仪（Bio-rad，美国）。1.4试验样品采集试验结束时，每个处理选择10只鸡进行空腹称重（与各处理组平均体重接近）并宰杀，迅速采集颈静脉血液于10mL离心管中，倾斜放置便于收集血清。血液采集完毕，立即打开腹腔，分别摘取脾脏、胸腺和法氏囊进行称重并记录。同时采集5cm左右的空肠，纵向剖开后用预冷生理盐水冲净食糜，用载玻片轻轻刮取肠黏膜并装入冻存管，放入液氮中保存待测。1.5测定指标与方法1.5.1肠道指数所有鸡只进行空腹称重后，每个处理组分别选择10只符合群体均重的肉鸡进行称重并宰杀。宰杀后立即打开腹腔，分别收集十二指肠、空肠及回肠，用于肠道指数的测本文档来自技高网...

【技术保护点】
1. 菜籽粕添加谷氨酰胺作鸡饲料蛋白源改善鸡免疫力的方法，其特征在于：，在肉鸡日粮中添加5%-25%的菜籽粕，并在菜籽粕日粮基础上添加0.5%-2%谷氨酰胺，对1-42日龄肉鸡生长性能包括：平均日增重、平均日采食量及料重比、免疫性能包括免疫器官指数、肠道分泌型sIgA及肠道粘蛋白1和2、肠道形态包括绒毛高度、隐窝深度及绒毛高度与隐窝深度比值、肠道紧密连接蛋白Occudin-1、ZO-1及Claudin 的mRNA表达，都起到较好的效果，表明日粮添加1.0% Gln能够提高肉鸡机体免疫性能，可在一定程度上改善肠道健康。/n

【技术特征摘要】
1.菜籽粕添加谷氨酰胺作鸡饲料蛋白源改善鸡免疫力的方法，其特征在于：，在肉鸡日粮中添加5%-25%的菜籽粕，并在菜籽粕日粮基础上添加0.5%-2%谷氨酰胺，对1-42日龄肉鸡生长性能包括：平均日增重、平均日采食量及料重比、免疫性能包括免疫器官指数、肠道分泌型sIgA及肠道粘蛋白1和2、肠道形态包括绒毛高度、隐窝深度及绒毛高度与隐窝深度比值、肠道紧密连接蛋白Occudin-1、ZO-1及Claudin的mRNA表达，都起到较好的效果，表明日粮添加1.0%Gln能够提...

【专利技术属性】
技术研发人员：张柏林，刘宁，孙泽威，宋培勇，
申请(专利权)人：遵义师范学院，
类型：发明
国别省市：贵州;52