将MAL蛋白作为肿瘤标记的应用制造技术

本发明专利技术涉及一种将ＭＡＬ蛋白作为上皮性肿瘤及其他人类病理学中的新型标记与分子目标的应用。更特别地，本发明专利技术涉及一种检测ＭＡＬ蛋白或其前体物质的应用，以所述检测作为标记，对肿瘤或其他影响上皮细胞、Ｔ淋巴细胞、肥大细胞、髓磷脂形成细胞或其他通常表达有ＭＡＬ的细胞类型的病理进行诊断或预后判断。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及将MAL蛋白作为上皮性肿瘤及其他人类病理学中的新型标记与分子目标的应用。本专利技术主要包括制药/生物诊断部分，用于卫生保健/临床领域。
技术介绍
对不同类型肿瘤诊断和/或预后的描述，是通过肿瘤形态学检查、肿瘤细胞组织学分析以及与肿瘤进展相关的标记的表达的免疫组织化学分析来实现的。而在某些情况下，遗传学及细胞遗传学资料或其他任何天然资料也支持了这些评估。特异标记表达的或特异标记表达缺少的免疫组织化学分析是有助于对肿瘤形成阶段进行详细描述并建立导向治疗的方法之一(Rosai and Ackermann，1996)。人类MAL基因最初是在寻找T淋巴细胞分化处理中表达的基因时被鉴定出来的(Alonso and Weissman，1987)，它位于人类2号染色体的短臂上(Alonso et al.，1988)。除了T淋巴细胞之外，MAL基因还在髓磷脂形成细胞(少突胶质细胞与许旺氏细胞)(Kim etal.，1995；SchaerSchaeren-Wiemers et al.，1995)及一些上皮源性的极化细胞株(Zacheti et al.，1995；-Belmonte et al.，1998)中表达。由MAL基因编码的蛋白(简称为MAL)，是一种约17,000道尔顿、具有若干疏水性片段及一些潜在免疫原性疏水区的膜内在蛋白(integral membrane protein)(Alonso and Weissman 1987；Weissman and Alonso 1989)。一种能够识别人类MAL蛋白，被称为单克隆抗体6D9的小鼠单克隆抗体的出现，开辟了对MAL的生物化学及功能描述的道路(Martn-Belmonte et al.，1998；Millán and Alonso，1998)。当与富含糖脂与胆固醇的细胞膜段相关联时，MAL蛋白能得以提纯。上述的细胞膜段由复杂的脂质膜混合物组成，后者的主要特性是4℃下不溶于非离子去污剂(如三硝基甲苯(Triton)-100)(Brown and Rose，1992)。在完整的细胞当中，这些膜形成名为″脂质筏″的细微区域，分布于细胞表面或细胞内部(Simons and Ikonen，1997；Brown and London，2000)。脂质筏的存在最初是用来解释极化上皮细胞中，特定蛋白质是如何转运到细胞顶端表面的(Simonsand Wanding-Ness，1990)，而最近发现，其他细胞类型的细胞内蛋白质转运，以及T淋巴细胞、B淋巴细胞、肥大细胞与成纤维细胞中的细胞信号传导过程，也涉及了这些脂质筏。在极化的上皮细胞及T淋巴细胞中，MAL主要分布在细胞内结构上，而较少分布在质膜上(Millán et al.1997)。在一系列研究中，使用了反义寡核苷酸来降低MAL蛋白，并使用了被称为马-达二氏犬肾细胞系(MDCK)及Fischerrat tyroid(FRT)细胞的上皮极化细胞作为模型。这些研究表明，MAL蛋白是一种蛋白装置的基本成分，后者参与了转运到膜内在蛋白、以及糖基磷脂酰肌醇锚定蛋白及分泌蛋白顶端表面，(Puertollano etal.，1999；Cheong et al.，1999；Martn-Belmonte et al.，2000，2001)。在T淋巴细胞中，除了在胞内运输中可能发挥作用外(Millán etal.，2002)，MAL蛋白还可能参与了细胞信号传导过程，这提示MAL蛋白与LCK蛋白酪氨酸激酶(这类细胞中激活装置的一种基本成分)有关联(Millán and Alonso，1998；Alonso and Millán，2001)。在各种类型的细胞中，将蛋白转运到质膜是细胞正常功能的一个基本过程。细胞极性的丧失是肿瘤转变及其他病理的一个极其普通的现象(Schoenenberger and Matlin，1991；Fish and Molitoris，1994)，并且是引起上述这些病理的最有可能的原因之一。无论是肿瘤转变如何影响转运装置组分，还是一些转运装置组分表达的维持或丧失如何影响肿瘤的晚期进展或治疗，人们对其了解的都不是很详细。所有这些考虑已引导了我们去检测MAL蛋白在不同上皮细胞及其他细胞类型的表达，并在比较MAL蛋白在正常组织与在来源于相同组织的不同类型肿瘤中的表达时，研究MAL蛋白的亚细胞表达和/或分布是否存在差异。尽管MAL蛋白在上皮细胞转运过程中具有重要的作用，但到目前为止，还没有人使用MAL蛋白作为标记以鉴定肿瘤或其他影响上皮细胞的病理。中隔膜的主要B细胞淋巴瘤与MAL表达具有良好的相关性(Copie-Bergman et al.，1999)。除此之外，当病理所影响的细胞是通常表达有MAL的细胞(如T淋巴细胞、肥大细胞、髓磷脂形成细胞或其他任何细胞类型)时，也并没有使用MAL蛋白作为标记。目前还无法确定，MAL在纵隔B细胞淋巴瘤的表达是否是由于MAL在这些细胞中的异常表达所造成，还是恰恰相反，表明了较少的淋巴细胞数，而后者可能是纵隔B细胞淋巴瘤的预兆。引用文献目录1.Alonso M.A、Millán J.0(2001)，脂质筏在T淋巴细胞信号发送及膜运输中的作用(The role of lipid rafts in signaling andmembrane trafficking in T lymphocytes)，细胞学杂志(J.Cell Sci)，1143957-3965。2.Alonso，M.A.、Weissman，S.M.(1987)，MAL的cDNA克隆化及序列——一种与人类T细胞分化相关的疏水性蛋白(cDNAcloning and sequence of MAL，a hydrophobic protein associated withhuman T-cell differentiation)，美国科学院通报(Proc.Nat.Acad.Sci.USA)，84，1997-2001。3.Alonso M.A.、Barton D.E、Francke U.(1988)，T细胞分化基因MAL基因的定位——位于人类2号染色体的cen-q13区上(Assignment of the T cell differentiation gene MAL to humanchromosome 2，region cen-q13)，免疫遗传学(Immunogenetics)27，91-95。4.Brown，DA、London，E.(2000)富含神经鞘脂及胆固醇的膜性筏的结构与功能(Structure and function of sphingolipid-andcholesterol-rich membrane rafts)，生物化学杂志(J.Biol.Chem.)275，17221-17224。5.Brown，D.A.、Rose，J.K.(1992)，在转运到顶端细胞的过程中，富含糖脂的膜性亚区对GPI锚定蛋白的分选(Sorting ofGPl-anchored proteins to Glycolipid-enriched membrane subdomainsduring transport to 本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种检测ＭＡＬ蛋白或其前体物质的应用，其特征在于，以所述检测作为标记，对肿瘤或其他影响上皮细胞、Ｔ淋巴细胞、肥大细胞、髓磷脂形成细胞或其他通常表达有ＭＡＬ的细胞类型（除纵隔的初期Ｂ细胞淋巴瘤外）的病理进行诊断或预后判断。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：米格尔安基尔阿隆佐莱布莱罗，莫妮卡玛拉祖勒阿斯比罗斯，阿格斯丁路易斯阿塞多巴伯拉，
申请(专利权)人：高级科研部理事会，
类型：发明
国别省市：ES[西班牙]