一种用琼脂糖凝胶4B吸附尿液中尿激酶的方法技术

本发明专利技术公开了一种用琼脂糖凝胶4B吸附尿液中尿激酶的方法，涉及分离提取技术领域。该方法包括如下步骤：(1)将琼脂糖凝胶4B亲和包放入过滤瓶中，使尿液穿过琼脂糖凝胶4B亲和包流入过滤瓶；(2)尿液流完后取出琼脂糖凝胶4B亲和包，装入层析柱，用缓冲液洗涤，然后用解脱液解脱，待解脱液流出颜色发生变化时进行收集，即得尿激酶溶液；(3)将步骤(2)所得的尿激酶溶液冷冻干燥，得尿激酶粉末。本发明专利技术提供的吸附尿液中尿激酶的方法无需对尿液进行处理，操作简单，得到的尿激酶收率佳、纯度高。

【技术实现步骤摘要】
一种用琼脂糖凝胶4B吸附尿液中尿激酶的方法
本专利技术涉及分离提取
，具体涉及一种用琼脂糖凝胶4B吸附尿液中尿激酶的方法。
技术介绍
尿激酶是从新鲜人尿里提取的一种溶血栓药物，是由人肾小管上皮细胞产生的一种丝氨酸蛋白酶，是一种碱性蛋白，等电点在PH8.7左右，为白色非结晶状粉末，易溶于水。稀溶液性状不稳定，必须新鲜配用，且不得用酸性溶液稀释，冻干状态可稳定数年。尿激酶是专一性很强的蛋白水解酶。对合成底物的活性与胰蛋白酶和纤溶酶近似，也有酯酶的活力，无抗原性，不使体内产生抗体。体内半衰期为(14±6)min。尿激酶能激活纤溶酶原转化为有活性的纤溶酶，纤溶酶能使不溶性的纤维蛋白转变为可溶性的肽，从而使血栓溶解。因此，临床上多用于治疗血栓形成、血栓栓塞等症。尿激酶与抗癌剂合用时，由于它能溶解癌细胞周围的纤维蛋白，使得抗癌剂能更有效地穿入癌细胞，从而提高抗癌剂杀伤癌细胞的能力。所以，尿激酶也是一种很好的癌症辅助治疗剂，而且它无抗原性问题，可长时间使用。由于尿激酶有着重要的医药价值，所以相继有很多专刊报道了尿激酶粗品的提取方法，因人本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用琼脂糖凝胶4B吸附尿液中尿激酶的方法，其特征在于，包括如下步骤：/n(1)将琼脂糖凝胶4B亲和包放入过滤瓶中，使尿液穿过琼脂糖凝胶4B亲和包流入过滤瓶；/n(2)尿液流完后取出琼脂糖凝胶4B亲和包，装入层析柱，用缓冲液洗涤，然后用解脱液解脱，待解脱液流出颜色发生变化时进行收集，即得尿激酶溶液；/n(3)将步骤(2)所得的尿激酶溶液冷冻干燥，得尿激酶粉末。/n

【技术特征摘要】
1.一种用琼脂糖凝胶4B吸附尿液中尿激酶的方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)将琼脂糖凝胶4B亲和包放入过滤瓶中，使尿液穿过琼脂糖凝胶4B亲和包流入过滤瓶；
(2)尿液流完后取出琼脂糖凝胶4B亲和包，装入层析柱，用缓冲液洗涤，然后用解脱液解脱，待解脱液流出颜色发生变化时进行收集，即得尿激酶溶液；
(3)将步骤(2)所得的尿激酶溶液冷冻干燥，得尿激酶粉末。


2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述尿液和琼脂糖凝胶4B的体积比为400000-600000:15，尿液穿过的流速为1-10mL/min。


3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述缓冲液选自磷酸缓冲液、Tris-HCl缓冲液、硫酸铵缓冲液、柠檬酸缓冲液、醋酸-Tris缓冲液、甘氨酸-Tris缓冲液中的至少一种。


4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述缓冲液为磷酸缓冲...

【专利技术属性】
技术研发人员：顾京，李争，刘艳红，郭芬，唐维，魏飘飘，
申请(专利权)人：江苏尤里卡生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32