【技术实现步骤摘要】
一株产抗菌肽的海洋芽孢杆菌及其发酵方法和应用
本专利技术涉及一株菌株及其发酵方法和应用，具体涉及一株产抗菌肽的海洋芽孢杆菌及其发酵方法和应用，属于微生物
技术介绍
在抗击致病菌的战争中，抗生素一直是人类所掌握的最重要的武器。但随着抗生素在医疗、饲料添加剂等方面的大量使用，使得许多致病菌进化出多种机制得以在诸多抗生素中存活，抗生素耐药性也成为当今社会面临的最严峻挑战之一。耐药性和药物残留问题日益严重，影响着人类健康。因此，寻找抗生素的替代物十分紧迫。筛选可以有效抵抗病原体的化学物质一直是生命科学领域研究的热点。抗菌肽又叫宿主防御肽，通常是由7-100个氨基酸组成的小分子多肽，是生物体天然免疫防御系统的重要组成部分，也是各种生物抵御入侵病原体的第一道防线，作为一种可从自然来源中提取并用于对抗抗生素耐药细菌的潜在候选物，已引起了广泛关注。抗菌肽具有广谱抗细菌、抗病毒、抗真菌、抗原虫、甚至抗肿瘤细胞等活性，另外抗菌肽还表现出了促进机体组织愈合及调节体内免疫系统等活性。以枯草芽孢杆菌（Bacillussubt...
【技术保护点】
1.一株产抗菌肽的海洋芽孢杆菌，其特征在于，该海洋芽孢杆菌是从采自于威海市南海新区某养殖池的底泥样品中分离、纯化得到的枯草芽孢杆菌M252，其对溶藻弧菌、金黄色葡萄球菌、嗜水气单胞菌和大肠杆菌均具有明显的抑制效果，保藏编号为CCTCC NO：M2020057，保藏日期为2020 年03月24日，保藏单位为中国典型培养物保藏中心，保藏地址为中国武汉。/n
【技术特征摘要】
1.一株产抗菌肽的海洋芽孢杆菌，其特征在于，该海洋芽孢杆菌是从采自于威海市南海新区某养殖池的底泥样品中分离、纯化得到的枯草芽孢杆菌M252，其对溶藻弧菌、金黄色葡萄球菌、嗜水气单胞菌和大肠杆菌均具有明显的抑制效果，保藏编号为CCTCCNO：M2020057，保藏日期为2020年03月24日，保藏单位为中国典型培养物保藏中心，保藏地址为中国武汉。
2.权利要求1所述的产抗菌肽的海洋芽孢杆菌的发酵方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤1：将枯草芽孢杆菌M252纯化后接入一级种子罐中，一级种子罐中的培养基的配方为：蛋白胨10g/L、酵母膏5g/L、氯化钠1g/L、用净化的海水配制，35℃、200rpm培养40h，得一级种子液；
步骤2：将一级种子液接入二级种子罐中，二级种子罐中的培养基的配方为：葡萄糖40g/L、酵母膏10g/L、玉米浆5g/L、硫酸铵1g/L、硫酸镁0.5g/L、磷酸二氢钾1.5g/L、氯化钙1g/L、用净化的海水配制，35℃、300rpm培养20h，得二级种子液；
步骤3：将二级种子液接入固体发酵罐中，固体发酵罐中的培养基的配方为：氯化钠5g/kg、磷酸二氢钾2g/kg、硫酸铵2g/kg、余量为麸皮、米糠或豆粕、含水量控制在20-40%，控制湿度30%，35℃、8rpm培养56h，然后低温鼓风干燥，得抗菌肽固剂。
3.采用权利要求2所述的发酵方法发酵得到的抗菌肽固剂的应用，其特征在于，作为饲料添加剂使用。
4.权利要求1所述的产抗菌肽的海洋芽孢杆菌的发酵方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤1：将枯草芽孢杆菌M252纯化后接入一级种子罐中，一级种子罐中的培养基的配方为：蛋白胨10g/L、酵母膏5g/L、氯化钠1g/L、用净化的海水配制，35℃、200rpm培养40h，得一级种子液；
步骤2：将一级种子液接入二级种子罐中，二级种子罐中的培养基的配方为：葡萄糖40g/L、酵母膏10g/L、玉米浆5g/L、硫酸铵1g/L、硫酸镁0.5g/L、磷酸二氢钾1.5g/L、氯化钙1g/L、用净化的海水配制，35℃、300rpm培养20h，得二级种子液；
步骤3：将二级种子液接入液体发酵罐中，液体发酵罐中的培养基的配方为：氯化铵1g/L、醋酸钠3g/L、氯化镁0.2g/L、氯化钙0.2g/L、磷酸二氢钾0.6g/L、氯化钠1g/L、酵母膏2g/L、葡萄糖2g/L、用净化的海水配制，设置温度35℃、转速400rpm、通风量0.75vvm、DO值25%，控制发酵液pH7-8，手动添加消泡剂，发酵56h，得发酵液，将发酵液于4℃、4000rpm离心，将所得上清液用旋转蒸发仪浓缩10倍，浓缩液通过0.22μm滤膜除去菌体及沉淀物，得抗菌肽液剂；
或者，将二级种子液接...
【专利技术属性】
技术研发人员：彭健，方素云，胡晓珂，闵军，
申请(专利权)人：中国科学院烟台海岸带研究所，中科海洋微生物产业技术研究院山东有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37
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