一种电泳凝胶上蛋白质的双重染色方法技术

本发明专利技术涉及一种电泳凝胶上蛋白质的双重染色方法，包括如下步骤：１）将蛋白质样品电泳后的凝胶置于固定液中，染色液染色；２）洗脱，敏化液敏化；３）去离子水水洗，硝酸银溶液银染；４）去离子水水洗，显影剂显色，ＥＤＴＡ溶液终止。本发明专利技术所述的双重染色方法灵敏度高，较现有染色法所需时间更短，质谱兼容性好，安全价廉。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及蛋白质染色领域，具体的说，涉及。
技术介绍
在蛋白质组学研究中，凝胶蛋白质染色技术是衔接二维电泳和下游质谱分析的关键技术。当前先进的质谱仪已能够分析pg级的痕量蛋白。常规的考马斯亮蓝染色法和银染法由于灵敏度低等因素严重的制约了蛋白质组学的发展。近三四十年开发出了不少新的染色技术，但是还是存在着如下一个或几个缺点灵敏度低、重现性差、毒性大、质谱兼容性差、价格昂贵等。寻找新的染色方法以适应当前先进的质谱分析技术已成为后基因组时代推动蛋白质组学发展的当务之急。对常规的染料进行筛选、组合或染色条件的优化已难以有实质性的突破，必须以新的化学理论为指导方可突破当前在利用质谱分析对蛋白质定性的技术瓶颈。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种高灵敏度的电泳凝胶上蛋白质的双重染色方法。为了实现本专利技术的目的，本专利技术提供了，包括如下步骤1)将蛋白质样本电泳后的凝胶置于固定液中固定10～60min，染色液染色10～60min；2)固定液洗脱10～60min，敏化液敏化5～60min；3)去离子水水洗1～3次，每次1～10min，硝酸银溶液银染5～60min； 4)去离子水水洗1～本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种电泳凝胶上蛋白质的双重染色方法，包括如下步骤：１）将蛋白质样本电泳后的凝胶置于固定液中固定１０～６０ｍｉｎ，染色液染色１０～６０ｍｉｎ；２）固定液洗脱１０～６０ｍｉｎ，敏化液敏化５～６０ｍｉｎ；３）去离子水水洗１ ～３次，每次１～１０ｍｉｎ，硝酸银溶液银染５～６０ｍｉｎ；４）去离子水水洗１～３次，每次１０～６０ｓ，显影剂显色４～８ｍｉｎ，ＥＤＴＡ溶液终止。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：金利泰，崔重甲，李校堃，丛维涛，
申请(专利权)人：温州医学院，
类型：发明
国别省市：33[中国|浙江]