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一种制备功能性肝前体细胞或肝细胞或者功能性小肠上皮前体细胞或小肠上皮细胞的方法技术

技术编号:25811175 阅读:57 留言:0更新日期:2020-09-29 18:46
本发明专利技术提供一种功能性肝(前体)细胞或功能性小肠上皮(前体)细胞的制备方法,其包括在抗生素存在下培养包含肝(前体)细胞或者小肠上皮(前体)细胞的分离细胞群的步骤。另外,本发明专利技术还提供一种包含功能性肝前体细胞的实质上均匀的分离细胞群,其中,CYP3A4在所述功能性肝前体细胞中的表达水平与其在HepaRG(注册商标)细胞株中的表达水平相比至少增大5倍。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】一种制备功能性肝前体细胞或肝细胞或者功能性小肠上皮前体细胞或小肠上皮细胞的方法
本专利技术涉及一种制备功能性肝前体细胞或肝细胞或者功能性小肠上皮前体细胞或小肠上皮细胞的方法、以及由该方法得到的功能性肝前体细胞或肝细胞或者功能性小肠上皮前体细胞或小肠上皮细胞,以及使用它们的再生医疗或药物的毒性评价。
技术介绍
作为肝硬化等肝病的根治疗法,一直以来都在进行肝移植,目前肝移植也仍然是主流的治疗方法。然而,为了使肝移植作为常用医疗普及却存在诸如器官捐献者不足、费用高昂、组织相容性等诸多问题。因此,建立使用肝细胞或肝前体细胞的肝再生医疗方法成为当务之急。另外,在制药研究领域,药剂的毒性试验中多使用实验动物。然而,可能由于人与动物的物种差异而导致体内的药代动力学不同,在使用实验动物的试验中不能充分评价药物的安全性,导致在临床试验阶段才报道肝毒性,进而导致药剂开发中止的情况屡见不鲜。因此,非常期待建立一种使用人肝细胞的体外药物毒性评价系统,以用于在制药研究的初期阶段预测人体内的药代动力学。迄今为止已经建立了多个人肝细胞株,但其中大部分本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种制备功能性肝前体细胞或功能性肝细胞或者功能性小肠上皮前体细胞或功能性小肠上皮细胞的方法,其包括如下培养步骤:在抗生素存在下培养包含肝前体细胞或肝细胞或者小肠上皮前体细胞或小肠上皮细胞的分离细胞群。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20171227 JP 2017-2517251.一种制备功能性肝前体细胞或功能性肝细胞或者功能性小肠上皮前体细胞或功能性小肠上皮细胞的方法,其包括如下培养步骤:在抗生素存在下培养包含肝前体细胞或肝细胞或者小肠上皮前体细胞或小肠上皮细胞的分离细胞群。


2.如权利要求1所述的方法,其中,所述分离细胞群是来自肝组织或小肠上皮组织的原代培养物。


3.如权利要求1所述的方法,其中,所述分离细胞群是从干细胞分化诱导而成的。


4.如权利要求3所述的方法,其中,所述干细胞是胚胎干细胞(ES细胞)。


5.如权利要求3所述的方法,其中,所述干细胞是人工多能性干细胞(iPS细胞)。


6.如权利要求5所述的方法,其中,所述iPS细胞来自健康个体。


7.如权利要求5所述的方法,其中,所述iPS细胞来自药物性肝损害患者或药物性小肠损害患者。


8.如权利要求1~7中任一项所述的方法,其中,所述抗生素选自由嘌呤霉素、杀稻瘟菌素S、G418、潮霉素、腐草霉素以及腐草霉素D1所构成的组。


9.如权利要求1~8中任一项所述的方法,其中,所述抗生素是0.1μg/ml~100μg/ml的嘌呤霉素。


10.如权利要求1~9中任一项所述的方法,其中,所述培养步骤在肝分化诱导因子的存在下进行。


11.如权利要求10所述的方法,其中,所述肝分化诱导因子选自由细胞因子、细胞生长因子、ROCK抑制剂、MAPK抑制剂、ALK抑制剂以及细胞外基质所构成的组。


12.如权利要求1~11中任一项所述的方法,其还包括在氨的存在下培养所述分离细胞群的步骤...

【专利技术属性】
技术研发人员:梅泽明弘清野透
申请(专利权)人:梅泽明弘
类型:发明
国别省市:日本;JP

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