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一种绵羊子宫内膜上皮细胞和基质细胞获取方法、分离纯化方法及应用技术

技术编号:25703080 阅读:45 留言:0更新日期:2020-09-23 02:49
本发明专利技术属于生物技术领域,尤其涉及一种绵羊子宫内膜上皮细胞和基质细胞获取方法、分离纯化方法及应用。本发明专利技术利用组织块培养法简便快速大量的获得绵羊子宫内膜上皮细胞和基质细胞,并在分离部位进行了改变。本申请中将子宫角纵向剪开,展开后剪下上面一个个圆形的子宫阜,将子宫阜用镊子夹入2mL的离心管中,再用小号剪子在离心管中剪成1mm

【技术实现步骤摘要】
一种绵羊子宫内膜上皮细胞和基质细胞获取方法、分离纯化方法及应用
本专利技术属于生物
,尤其涉及一种绵羊子宫内膜上皮细胞和基质细胞获取方法、分离纯化方法及应用。
技术介绍
子宫内膜上皮细胞(endometrialepitheliumcells,EECs)和子宫内膜基质细胞(endometrialstromalcells,ESCs)是子宫内膜主要构成细胞,均可受卵巢激素的影响产生周期性的变化。为了更好地研究子宫与胚胎之间的应答反应,分离子宫内膜,在体外进行原代细胞培养,可为体外研究子宫内膜对胚胎的影响建立模型,为研究细胞结构与功能创造了条件。原代培养的方法很多,最基本和常用的有两种,即组织块法和消化法。组织块培养法是一种简便易行且成功率较高的常用的原代培养方法,即将组织剪成小块后,直接置于培养瓶中。此方法特别适合于组织量少的原代培养。消化培养法是采用前述的组织消化分散法,将妨碍细胞生长的细胞间质包括基质、纤维等除去,使细胞分散,形成悬液,易于从外界吸收养分和排出代谢产物。此法适用于培养大量组织,原代细胞产量高。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种绵羊子宫内膜上皮细胞和基质细胞获取方法,其特征在于,包括:将子宫角纵向剪开,露出位于子宫腔面的子宫阜,剪下子宫阜并冲洗;将子宫阜剪碎,接种于D-MEM/F-12培养基,于常规子宫内膜细胞培养条件培养。/n

【技术特征摘要】
1.一种绵羊子宫内膜上皮细胞和基质细胞获取方法,其特征在于,包括:将子宫角纵向剪开,露出位于子宫腔面的子宫阜,剪下子宫阜并冲洗;将子宫阜剪碎,接种于D-MEM/F-12培养基,于常规子宫内膜细胞培养条件培养。


2.根据权利要求1所述的一种绵羊子宫内膜上皮细胞和基质细胞获取方法,其特征在于:剪下的子宫阜用含5%青霉素-链霉素双抗的PBS冲洗。


3.根据权利要求1所述的一种绵羊子宫内膜上皮细胞和基质细胞获取方法,其特征在于:将子宫阜剪碎呈1mm3小块,PBS冲洗。


4.根据权利要求1所述的一种绵羊子宫内膜上皮细胞和基质细胞获取方法,其特征在于:子宫内膜细胞培养条件为37℃、5%CO2培养箱内培养。


5.一种绵羊子宫内膜上皮细胞和基质细胞分离纯化方法,其特征在于,包括:将含有子宫内膜上皮细胞和基质细胞的组织块于常规子宫内...

【专利技术属性】
技术研发人员:胡广东王静凌芳郝科兴谷新利曾维斌黄涛陈慧慧龙德智
申请(专利权)人:石河子大学
类型:发明
国别省市:新疆;65

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