高特异性生产麦芽三糖的麦芽三糖淀粉酶突变体制造技术

本发明专利技术公开了高特异性生产麦芽三糖的麦芽三糖淀粉酶突变体，属于基因工程和酶工程领域。本发明专利技术对来源于Thermobifidafusca NTU22的TfAmyA进行改造，对TfAmyA进行了一项截短和，并在此基础上对47位的亮氨酸，101位的甘氨酸，103位的甘氨酸，153位的甘氨酸，进行定点突变。获得的突变体酶的主产物麦芽三糖的特异性增加，产率增加，更适用于麦芽三糖的生产。

【技术实现步骤摘要】
高特异性生产麦芽三糖的麦芽三糖淀粉酶突变体
本专利技术涉及高特异性生产麦芽三糖的麦芽三糖淀粉酶突变体，属于基因工程和酶工程领域。
技术介绍
麦芽三糖(Maltotriose，α-D-Glc-(1→4)-α-D-Glc-(1→4)-D-Glc，简称G3)属于一种功能性低聚糖，由三个葡萄糖单元经α-(1→4)糖苷键连接而成。其分子式为C18H32O16，相对分子质量为504.438，密度为1.8±0.1g·cm-3，熔点为132-135℃，常温下为白色固体粉末。G3具有多种优异的物理化学和生理学性质，其是可消化的营养甜味品，具有非致龋、低甜度、低粘度、低热量、抗结晶和低渗透压的特点，可用于改变冷冻食品的冷冻温度，并控制热加工食品中美拉德反应引起的褐变量。G3提供高保湿能力，防止过度干燥和低水分活度，便于控制微生物污染，具有强稳定性，是淀粉回生的强抑制剂。G3在食品、饮料、化工、医药等行业应用广泛。市场上的G3产品大都来自日本。日本食品化工公司的“富士低聚G3”、日本玉米淀粉公司的“新型麦芽低聚糖”、日本三菱化学食品株式会社的“线性寡糖origo”、本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.麦芽三糖淀粉酶的突变体，其特征在于，所述突变体是以氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的麦芽三糖淀粉酶为亲本，将末端截短，或将亲本的第47位、第101位、第103位、第153位任一位点的氨基酸发生突变。/n

【技术特征摘要】
1.麦芽三糖淀粉酶的突变体，其特征在于，所述突变体是以氨基酸序列如SEQIDNO.1所示的麦芽三糖淀粉酶为亲本，将末端截短，或将亲本的第47位、第101位、第103位、第153位任一位点的氨基酸发生突变。


2.根据权利要求1所述的突变体，其特征在于，所述突变体为以下(a)～(e)任一：
(a)将亲本的第451-572位氨基酸截去；
(b)将序列如SEQIDNO.4第47位的亮氨酸突变为赖氨酸或精氨酸；
(c)将序列如SEQIDNO.4所示氨基酸的第101位的甘氨酸突变为丝氨酸、苏氨酸、天冬氨酸、天冬酰胺、谷氨酸、或谷氨酰胺；
(d)将序列如SEQIDNO.4所示氨基酸的第103位的甘氨酸突变为组氨酸；
(e)将序列如SEQIDNO.4所示氨基酸的第153位的甘氨酸突变为丝氨酸、天冬氨酸、天冬酰胺、谷氨酸、谷氨酰胺或组氨酸。


3.编码权利要求1或2所述突变体的基因。


4.携带权利要求3所述基...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴敬，王蕾，胡凡，陈晟，宿玲恰，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32