本发明专利技术公开了3α，6α，12α‑三羟基‑5β‑胆酸和3α，6β，12α‑三羟基‑5β‑胆酸的合成方法，以3α，7α，12α‑三羟基‑5β‑胆酸为原料，经Mukaiyama羟醛缩合反应、氧化裂解、还原脱除等十步反应制得3α，6α，12α‑三羟基‑5β‑胆酸和3α，6β，12α‑三羟基‑5β‑胆酸。本发明专利技术合成方法绿色、高效的特点。
【技术实现步骤摘要】
一种3α，6α(β)，12α-三羟基-5β-胆酸的合成方法
本专利技术涉及3α，6α，12α-三羟基-5β-胆酸和3α，6β，12α-三羟基-5β-胆酸化合物的制备新方法，属于有机化合物制备
技术介绍
胆酸类化合物的体内代谢水平与肝病患者、胚胎及新生儿的健康情况密切相关。然而，目前关于该类化合物的合成方法的文献报道较少。S.L.HSIA课题组报道了以猪胆酸1为原料，主要经氧化，保护，还原等反应合成3α，6α-二羟基-5β-胆酸4的方法(如图1所示，参考文献：J.Bio.Chem.1958,233(6):1337)。RobertL课题组报道了以3α，7α，12α-三羟基-5β-胆酸为原料首先合成关键Δ6,7烯中间体5，再选择性羟溴加成，脱溴及水解反应合成3α，6β，12α-三羟基-5β-胆酸7b的方法(如图2所示，参考文献：J.Bio.Chem.1960,236(3):685)。TakashiIida课题组报道了以3α，12α-二羟基-5β-胆酸为原料，经关键的双烯中间体15、20选择性地环氧、开环氧在C6位引入羟基的策略来合成3α，6α，12α-三羟基-5β-胆酸(7a，如图4所示，参考文献：J.Lip.Res.1991,32:649)和3α，6β，12α-三羟基-5β-胆酸(7b，如图3)的方法。综上，前述现有技术即3α，6α，12α-三羟基-5β-胆酸7a和3α，6β，12α-三羟基-5β-胆酸7b的合成方法，其合成效率不高，经六步反应才能制备关键中间体14，再分别经十二步和五步反应才能最终制备得到目标产物7a和7b。同时合成中所使用到的氧化剂重铬酸钾具有致癌性，环境不友好。所以发展更加高效，绿色环保的路线完成7a、7b的制备仍具有重要意义。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供制备3α，6α，12α-三羟基-5β-胆酸7a和3α，6β，12α-三羟基-5β-胆酸7b的方法。本专利技术通过以下技术方案解决现有3α，6α，12α-三羟基-5β-胆酸7a和3α，6β，12α-三羟基-5β-胆酸7b制备方法中存在的合成路线长、使用环境不友好的试剂、合成成本高等问题。本专利技术具有高效、经济和环境友好的特点：以牛、羊体内含量丰富的3α，7α，12α-三羟基-5β-胆酸26为起始原料(来源丰富，成本低)，主要经Mukaiyama羟醛缩合反应、氧化裂解、还原脱除等反应制得3α，6α，12α-三羟基-5β-胆酸7a和3α，6β，12α-三羟基-5β-胆酸7b。其具体反应过程如图5所示：现详细说明本专利技术3α，6α，12α-三羟基-5β-胆酸7a和3α，6β，12α-三羟基-5β-胆酸7b的合成方法，包括以下步骤：第一步：甲基化。将3α，7α，12α-三羟基-5β-胆酸26溶于N,N-二甲基甲酰胺(DMF)中，加入碳酸钾、碘甲烷，于室温下搅拌反应至薄层色谱检测显示反应结束。加入水淬灭反应，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩所得粗品经闪式硅胶柱层析得白色固体即3α，7α，12α-三羟基-5β-胆酸甲酯27。上述第一步中，所述3α，7α，12α-三羟基-5β-胆酸26：碳酸钾：碘甲烷：DMF适用的质量比范围为1：0.5-1.5：1-3：20-25。第二步：氧化。将3α，7α，12α-三羟基-5β-胆酸甲酯27溶于丙酮/水的混合溶剂中，加入N-溴代丁二酰亚胺(NBS)，于室温下搅拌反应至薄层色谱检测反应结束。减压浓缩，二氯甲烷萃取，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩所得粗品经闪式硅胶柱层析得白色固体即3α，12α-二羟基-7-酮-5β-胆酸甲酯28。上述第二步中，所述3α，7α，12α-三羟基-5β-胆酸甲酯27：NBS：丙酮：水的质量比范围为1：0.4-0.6：5-15：5-15。第三步：烯醇硅醚化。将3α，12α-二羟基-7-酮-5β-胆酸甲酯28溶于干燥的二氯甲烷中，加入2，6-二甲基吡啶，再加入叔丁基二甲硅烷基三氟甲磺酸酯(TBSOTf)，室温下搅拌反应至薄层色谱检测反应结束。加入饱和氯化铵淬灭反应，二氯甲烷萃取，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩所得粗品经闪式硅胶柱层析得淡黄色固体即3α，7α，12α-三叔丁基二甲硅氧基-5β-胆酸-6-烯甲酯29。上述第三步中，所述3α，12α-二羟基-7-酮-5β-胆酸甲酯28：2，6-二甲基吡啶：TBSOTf：二氯甲烷的质量比范围为1：1-3：2-4：30-35。第四步：Mukaiyama羟醛缩合反应。将3α，7α，12α-三叔丁基二甲硅氧基-5β-胆酸-6-烯甲酯29溶于干燥的二氯甲烷中，将反应液置于-80℃，依次加入乙醛、三氟化硼乙醚溶液，搅拌反应至薄层色谱检测反应结束。加入饱和碳酸氢钠溶液淬灭反应，二氯甲烷萃取，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩所得粗品经闪式硅胶柱层析得白色固体即3α，12α-三叔丁基二甲硅氧基-6-乙叉基-7-酮-5β-胆酸甲酯30。上述第四步中，所述3α，7α，12α-三叔丁基二甲硅氧基-5β-胆酸-6-烯甲酯29：乙醛：三氟化硼乙醚溶液：二氯甲烷的质量比范围为1：0.1-0.4：0.1-0.5：70-90。第五步：还原。将3α，12α-三叔丁基二甲硅氧基-6-乙叉基-7-酮-5β-胆酸甲酯30溶于甲醇/四氢呋喃的混合溶液中，于0℃加入硼氢化钠，搅拌反应至薄层色谱检测反应结束。加入水淬灭反应，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩所得粗品经闪式硅胶柱层析得白色固体即3α，12α-三叔丁基二甲硅氧基-6-乙叉基-7-羟基-5β-胆酸甲酯31。上述第五步中，所述3α，12α-三叔丁基二甲硅氧基-6-乙叉基-7-酮-5β-胆酸甲酯30：硼氢化钠：甲醇：四氢呋喃的质量比范围为1：0.05-0.2：7-9：8-10。第六步：乙酰化。将3α，12α-三叔丁基二甲硅氧基-6-乙叉基-7-羟基-5β-胆酸甲酯31溶于吡啶中，依次加入4-二甲氨基吡啶(DMAP)、醋酐，于80℃搅拌反应至薄层色谱检测反应结束。加入饱和氯化铵溶液淬灭反应，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩所得粗品经闪式硅胶柱层析得白色固体即3α，12α-三叔丁基二甲硅氧基-6-乙叉基-7-乙酰氧基-5β-胆酸甲酯32。上述第六步中，所述3α，12α-三叔丁基二甲硅氧基-6-乙叉基-7-羟基5β-胆酸甲酯31：DMAP：醋酐：吡啶的质量比范围为1：0.1-0.2：0.5-1.0：10-20。第七步：氧化裂解。将3α，12α-三叔丁基二甲硅氧基-6-乙叉基-7-乙酰氧基-5β-胆酸甲酯32溶于二氯甲烷中，通入臭氧，于-78℃下搅拌反应至薄层色谱检测反应结束。加入二甲基硫搅拌3h，减压浓缩所得粗品经闪式硅胶柱层析得白色固体即3α，12α-三叔丁基二甲硅氧基-6-羰基-7-乙酰氧基-5β-胆酸甲酯33。上述第七步中，所述3α，12α-三叔丁基二甲硅氧基-6-乙叉基-7-乙酰氧基-5β-胆酸甲酯32：二甲基硫：二氯甲烷的质量比范围为1：0.01-0.1：100-120。<本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种3α，6α，12α-三羟基-5β-胆酸7a和3α，6β，12α-三羟基-5β-胆酸7b的合成方法，其特征在于，主要以牛、羊体内含量丰富的3α，7α，12α-三羟基-5β-胆酸26为原料，经Mukaiyama羟醛缩合反应、氧化裂解、还原脱除等反应制得3α，6α，12α-三羟基-5β-胆酸7a和3α，6β，12α-三羟基-5β-胆酸7b。/n
【技术特征摘要】
1.一种3α，6α，12α-三羟基-5β-胆酸7a和3α，6β，12α-三羟基-5β-胆酸7b的合成方法，其特征在于，主要以牛、羊体内含量丰富的3α，7α，12α-三羟基-5β-胆酸26为原料，经Mukaiyama羟醛缩合反应、氧化裂解、还原脱除等反应制得3α，6α，12α-三羟基-5β-胆酸7a和3α，6β，12α-三羟基-5β-胆酸7b。
2.如权利要求1所述3α，6α，12α-三羟基-5β-胆酸7a和3α，6β，12α-三羟基-5β-胆酸7b的合成方法，其特征在于，以牛、羊体内含量丰富的3α，7α，12α-三羟基-5β-胆酸为原料，廉价易得。
3.如权利要求1所述3α，6α，12α-三羟基-5β-胆酸7a和3α，6β，12α-三羟基-5β-胆酸7b的合成方法，其特征在于，包括以下步骤：
第五步：还原：将3α，12α-三叔丁基二甲硅氧基-6-乙叉基-7-酮-5β-胆酸甲酯30溶于甲醇/四氢呋喃的混合溶液中，于0℃加入硼氢化钠，并继续搅拌反应至薄层色谱检测显示反应结束，加入水淬灭反应，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩所得粗品经闪式硅胶柱层析得白色固体即3α，12α-三叔丁基二甲硅氧基-6-乙叉基-7-羟基-5β-胆酸甲酯31；
第六步：乙酰化：将3α，12α-三叔丁基二甲硅氧基-6-乙叉基-7-羟基-5β-胆酸甲酯31溶于吡啶中，依次加入4-二甲氨基吡啶(DMAP)、醋酐，升温至80℃，并搅拌反应至薄层色谱检测显示反应完全，加入饱和氯化铵溶液淬灭反应，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩所得粗品经闪式硅胶柱层析得白色固体即3α，12α-三叔丁基二甲硅氧基-6-乙叉基-7-乙酰氧基-5β-胆酸甲酯32；
第七步：氧化裂解：将3α，12α-三叔丁基二甲硅氧基-6-乙叉基-7-乙酰氧基-5β-胆酸甲酯32溶于二氯甲烷中，于-78℃下通入臭氧，搅拌反应至薄层色谱检测显示反应结束，加入二甲基硫醚，缓慢升至室温，并继续搅拌3h，减压浓缩所得粗品经闪式硅胶柱层析得白色固体即3α，12α-三叔丁基二甲硅氧基-6-羰基-7-乙酰氧基-5β-胆酸甲酯33；
第八步：还原脱除：将3α，12α-三叔丁基二甲硅氧基-6-羰基-7-乙酰氧基-5β-...
【专利技术属性】
技术研发人员：徐亮，高灵芝，程航，
申请(专利权)人：四川大学，
类型：发明
国别省市：四川;51
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