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一种调控目的基因表达和CCA效应的元件制造技术

技术编号:25703163 阅读:49 留言:0更新日期:2020-09-23 02:49
本发明专利技术公开了一种调控目的基因表达和CCA效应的元件,属于生物工程技术领域。所述元件包括载体、启动子和靶基因结合序列,所述靶基因结合序列为AGCTTT‑Y‑AAAGCT或AAAGCT‑Y‑AGCTTT(Y代表长度为0‑14bp的核苷酸序列)。含有AGCTTT‑Y‑AAAGCT的元件,响应葡萄糖存在时的CCA效应,甘油存在时的CCR效应;含AAAGCT‑Y‑AGCTTT的元件,响应葡萄糖存在时的CCR效应,甘油存在时的CCA效应。本发明专利技术为后续地衣芽孢杆菌表达原件的开发提供了高效的、靶向的分子手段。

【技术实现步骤摘要】
一种调控目的基因表达和CCA效应的元件
本专利技术涉及一种调控目的基因表达和CCA效应的元件,属于生物工程

技术介绍
1942年,JacquesMonod发现大肠杆菌在葡萄糖和半乳糖的混合碳源下优先利用葡萄糖,在葡萄糖消耗完时才利用半乳糖,存在着明显的二次生长现象。之后,人们相继在不同微生物以及不同的碳水化合物之间发现类似的效应,这表明这种分级代谢现象在细菌中广泛发生,是细菌应对复杂环境的生长策略。尽管在革兰氏阳性菌与革兰氏阴性菌中都存在这种分级代谢现象,但是主要负责调控的转录因子却大不相同。在革兰氏阳性菌中,负责分级代谢的主要转录因子为CcpA蛋白,而在革兰氏阴性菌中,负责分级代谢的主要转录因子为CRP蛋白。CcpA蛋白作为LacI-GalR蛋白家族的成员,结构中包含N-末端螺旋-转-螺旋(HTH)基序和结合效应物的羧基末端结构域。作为负责调控革兰氏阳性菌中碳水化合物代谢的主要调控因子,不仅在复杂碳水化合物的分级代谢中发挥着重要的作用,还负责调控氮代谢、孢子生成以及一些重要的生理过程如产溶剂、毒性基因的表达。研究表明本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种调控目的基因表达和/或CCA效应的元件,其特征在于,所述元件包括启动子、靶基因结合序列和载体;所述靶基因结合序列位于启动子转录起始位点上游,所述启动子和靶基因结合序列位于载体的多克隆位点区,所述靶基因结合序列是AGCTTT-Y-AAAGCT或AAAGCT-Y-AGCTTT,其中,Y表示长度为0-14bp的核苷酸序列。/n

【技术特征摘要】
1.一种调控目的基因表达和/或CCA效应的元件,其特征在于,所述元件包括启动子、靶基因结合序列和载体;所述靶基因结合序列位于启动子转录起始位点上游,所述启动子和靶基因结合序列位于载体的多克隆位点区,所述靶基因结合序列是AGCTTT-Y-AAAGCT或AAAGCT-Y-AGCTTT,其中,Y表示长度为0-14bp的核苷酸序列。


2.根据权利要求1所述的元件,其特征在于,所述载体为pHY-PLK300。


3.根据权利要求1所述的元件,其特征在于,所述启动子为核苷酸如SEQIDNO.5所示的海藻糖启动子。


4.根据权利要求1所述的元件,其特征在于,所述AGCTTT-Y-AAAGCT的核苷...

【专利技术属性】
技术研发人员:石贵阳李由然肖丰旭张梁丁重阳徐沙顾正华张玉鹏王瀚容
申请(专利权)人:江南大学
类型:发明
国别省市:江苏;32

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