一种基于脱细胞肋软骨基质的3D打印生物墨水及其制备方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种基于脱细胞肋软骨基质的3D打印生物墨水及其制备方法与应用，属于生物医学材料技术领域。所述3D打印生物墨水包括脱细胞肋软骨基质、可光固化水凝胶和苯基‑2,4,6‑三甲基苯甲酰基膦酸锂，采用本发明专利技术所述3D打印生物墨水通过逆向工程系统和光固化3D打印技术可以成功制备人工耳廓。通过本发明专利技术制备的3D打印脱细胞肋软骨基质耳廓保留了天然胶原蛋白和弹性蛋白，无免疫原性，具有良好的生物相容性，充分利用供体肋软骨材料，减轻患者手术病痛，在小耳畸形重建手术中具有巨大临床应用价值。

【技术实现步骤摘要】
一种基于脱细胞肋软骨基质的3D打印生物墨水及其制备方法与应用
本专利技术属于生物医学材料
，具体涉及从CT扫描图像数据到耳廓制作的逆向工程方法，尤其涉及脱细胞肋软骨脱基质生物墨水的配制方法及其成型制造技术。技术背景先天性小耳畸形(Congenitalmicrotia)是一类以重度耳廓发育不全、外耳道闭锁或狭窄、中耳畸形为主要临床特征的先天性疾病。据统计，小耳畸形的发病率在东方人群约为1/3000～1/5000，其临床症状及伴发畸形不仅引起了患儿外形以及听力等器官功能障碍，更是使患儿及其家庭产生了极大的心理负担。先天性小耳畸形通常通过耳廓重建进行治疗，由于外耳呈现复杂的三维立体结构，细微结构较多，使得耳廓再造术成为整形外科中最复杂、难度最大的手术之一。目前针对小耳畸形的主要手术方法为自体肋软骨雕刻技术。该手术具体流程如下：首先需手术切取患耳一侧7-8肋软骨(对于肋软骨较小者可酌情加取第6肋软骨)；然后医师根据患儿发育正常耳(少部分双侧小耳畸形患儿根据父母正常发育外耳)的耳廓结构进行雕刻；最后再将雕刻完成耳廓植入患儿患侧耳本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于脱细胞肋软骨基质的3D打印生物墨水，其特征在于，包括脱细胞肋软骨基质、可光固化水凝胶和苯基-2,4,6-三甲基苯甲酰基膦酸锂。/n

【技术特征摘要】
1.一种基于脱细胞肋软骨基质的3D打印生物墨水，其特征在于，包括脱细胞肋软骨基质、可光固化水凝胶和苯基-2,4,6-三甲基苯甲酰基膦酸锂。


2.根据权利要求1所述的3D打印生物墨水，其特征在于，所述可光固化水凝胶为甲基丙烯酸酐化明胶、甲基丙烯酸酐化透明质酸、甲基丙烯酸酐化丝素蛋白、甲基丙烯酸酐化壳聚糖中的一种或多种。


3.一种如权利要求1所述的3D打印生物墨水的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)对肋软骨进行脱细胞基质处理；
(2)制备可光固化水凝胶；
(3)配制苯基-2,4,6-三甲基苯甲酰基膦酸锂溶液，并与步骤(2)所得的可光固化水凝胶在50℃～60℃下充分混合；
(4)将步骤(1)所得的肋软骨进行脱细胞基质和步骤(3)所得混合溶液通过混合脱泡仪进行充分混合，得到3D打印生物墨水。


4.根据权利要求3所述的3D打印生物墨水的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)具体为：取临床肋软骨余料置于pH7.6无菌PBS溶液中，然后在无菌条件下粉碎、去细胞；软骨碎片在含有3.5％(w/v)苯甲基磺酰氟和0.1％(w/v)EDTA的磷酸盐缓冲盐水(PBS)中清洗和粉碎，以抑制蛋白酶活性；随后将软骨碎片悬浮液在离心机中以2000r/min旋转5分钟，然后去除沉积物，并以7000转/分的速度将新悬浮液再离心5分钟；粉碎和差速离心后制备直径约为500nm至5μm的软骨微丝，然后在1％TritonX-100中在低张Tris-HCl中以4℃温和搅拌12h，然后在50U/mL脱氧核糖核酸酶I中培养12h，在10mMTris-HCl中以7.5pH培养1U/mL核糖核酸酶A，在PBS中洗涤后在37℃下搅拌，无蛋白酶抑制；...

【专利技术属性】
技术研发人员：李正勇，唐佩，宋平，周长春，吴丽娜，彭智愚，雷皓远，范洪远，蒋青，樊渝江，张兴栋，
申请(专利权)人：四川大学，
类型：发明
国别省市：四川;51