一株耐低温聚磷菌及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一株耐低温聚磷菌及其应用，属于生物工程和环境工程技术领域。本发明专利技术中耐低温聚磷菌株聚磷菌命名为HCSW‑3，经鉴定属于不动杆菌属(Acinetobacter sp.)，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期为2019年8月14日，保藏号为CGMCC No.18385。将菌株Acinetobacter sp.HCSW‑3进行活化培养后，投入试验中，在低温条件下(10℃)，对初始磷浓度为11mg/L的污水中磷的去除率高达100％。因此，Acinetobacter sp.HCSW‑3在低温条件下仍然具有良好的除磷效能，可应用于污水生物除磷及黑臭河道治理等。

【技术实现步骤摘要】
一株耐低温聚磷菌及其应用
本专利技术属于生物工程和环境工程
，涉及一株耐低温聚磷菌及其应用。
技术介绍
水体中较高浓度的磷是导致“水体富营养化”的主要原因之一。水体中的磷主要来源于人类生产活动所产生的生活污水、工业废水、农田径流及农业排水。随着环境问题的日渐突出，污水排放标准的日趋严格，如何经济、高效的去除污水及黑臭河道中的磷污染已成为水体污染防治领域的研究热点。生物除磷技术因其经济、环保等优点而得到广泛应用。到目前为止，聚磷菌株要集中在Pseudomonas菌属、Klebsiella菌属、RahnellaIzard菌属、Acinetobacter菌属、Aeromonas菌属，但已报道的聚磷菌的除磷效能参差不齐，且研究多集中在降解基因和降解机理方面，实际应用研究有限。温度是污水处理过程中一个重要的生态因子，其对活性污泥中微生物群落结构及功能有较大影响。寒冷恶劣的气候条件会严重抑制污水处理厂活性污泥的中微生物的活性，尤其对聚磷菌的活性有较大影响，可直接导致污水处理厂在低温期除磷效能不合格。因此，筛选出一株耐低温的高效聚磷菌，对于保证低温条件下生物除磷的效果具有重要的实际意义。
技术实现思路
针对现有技术存在的上述问题，本专利技术所要解决的技术问题在于提供一株耐低温聚磷菌。本专利技术所要解决的另一技术问题在于提供所述耐低温聚磷菌在污水除磷中的应用。为了解决上述技术问题，本专利技术所采用的技术方案如下：一株耐低温聚磷菌Acinetobactersp.HCSW-3，所述的耐低温聚磷菌Acinetobactersp.HCSW-3即不动杆菌HCSW-3，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCCNo.18385，保藏日期为2019年8月14日，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。耐低温聚磷菌Acinetobactersp.HCSW-3为革兰氏阴性杆菌，兼性好氧，接触酶阳性，氧化酶阴性，在pH5.0-11.0、10-30℃条件下生长，无鞭毛；在固体培养基上生长为圆形乳白色半透明菌落，表面光滑，边缘整齐有隆起，能以多种有机物为碳源，具有良好的聚磷效能，可用于污水生物除磷。耐低温聚磷菌Acinetobactersp.HCSW-3的16SrDNA序列如SEQIDNO.1所示。耐低温聚磷菌Acinetobactersp.HCSW-3的专性培养基为配方如下：CH3COONa，3.23g/L；KH2PO4，35mg/L；CaCl2，19.39mg/L；NH4Cl，305.52mg/L；MgSO4·7H2O，91.26mg/L；PIPESbuffer，8.5g/L；微量元素，2mL。pH调至7.0。其中，微量元素配方为：FeSO4·7H2O5g/L、CuSO4·5H2O1.6g/L、MnCl2·4H2O5g/L、(NH4)6Mo7O24·4H2O1.1g/L、H3BO30.05g/L、CoCl2·6H2O0.05g/L、KI0.01g/L。121℃条件下灭菌20min，冷却至室温后使用。耐低温聚磷菌Acinetobactersp.HCSW-3在污水除磷中的应用。所述的应用为：在污水处理的厌氧池中投加耐低温聚磷菌Acinetobactersp.HCSW-3菌种，使耐低温聚磷菌Acinetobactersp.HCSW-3菌在厌氧池中挂膜并吸磷。所述的应用的具体步骤包括：1)制备所述耐低温聚磷菌Acinetobactersp.HCSW-3的冻干菌粉；2)停止厌氧池进出水，并将步骤1)所得低温聚磷菌Acinetobactersp.HCSW-3的冻干菌粉投加到污水处理的厌氧池中，开启厌氧池的内循环；3)耐低温聚磷菌Acinetobactersp.HCSW-3菌在厌氧池中挂膜并吸磷。步骤1)制备所述耐低温聚磷菌Acinetobactersp.HCSW-3的冻干菌粉的具体方法为：使用专性培养基培养所述的耐低温聚磷菌Acinetobactersp.HCSW-3，培养完成后，通过离心机离心去除70％的上清液，将剩下的高浓度菌液加入菌种保护剂玉米芯粉与海藻糖进行冷冻干燥，制成耐低温聚磷菌Acinetobactersp.HCSW-3的冻干菌粉。相比于现有技术，本专利技术的有益效果为：本专利技术提供的耐低温聚磷菌Acinetobactersp.HCSW-3在低温条件下仍然具有极强的除磷效能，将耐低温聚磷菌Acinetobactersp.HCSW-3投入试验中，在低温条件下(10℃)，对初始磷浓度高达11mg/L的污水中磷的去除率仍可达到100％。附图说明图1为菌株Acinetobactersp.HCSW-3在低温条件下(10℃)的生长曲线图；图2为菌株Acinetobactersp.HCSW-3在低温条件下(10℃)对可溶性磷的降解净化结果图。具体实施方式下面结合具体实施例对本专利技术进一步进行描述。实施例1：菌株HCSW-3的筛选及生理生化鉴定(1)菌株来源本专利技术所用菌源来源于低温条件下稳定运行的SBR中的活性污泥。(2)培养基为避免选用常规筛菌培养基进行菌种分离时得到菌落数目过多，并且得到菌落无法保证均有聚磷效果，徒增菌种分离的工作量。本专利技术选用专性培养基进行菌株的分离筛选。专性培养基配方如下：CH3COONa，3.23g/L；KH2PO4，35mg/L；CaCl2，19.39mg/L；NH4Cl，305.52mg/L；MgSO4·7H2O，91.26mg/L；PIPESbuffer，8.5g/L；微量元素，2mL。pH调至7.0。固体培养基加入1.8-2.0％的琼脂粉。其中，微量元素配方为：FeSO4·7H2O5g/L、CuSO4·5H2O1.6g/L、MnCl2·4H2O5g/L、(NH4)6Mo7O24·4H2O1.1g/L、H3BO30.05g/L、CoCl2·6H2O0.05g/L、KI0.01g/L。所有培养基均于121℃条件下灭菌20min，冷却至室温后使用。(3)筛选通过涂布、划线分离等常规操作得到若干株初筛菌株。然后，通过好氧吸磷实验对菌株进行复筛。初步确定菌株是否有聚磷效能，并比较其聚磷能力的强弱。选择其中聚磷效能最好的菌株命名为HCSW-3。(4)生理生化鉴定通过对菌株HCSW-3进行一系列的生理生化实验，结果表明该菌株HCSW-3为革兰氏阴性杆菌，兼性好氧，接触酶阳性，氧化酶阴性，在pH5.0-11.0、10-30℃条件下生长，无鞭毛；HCSW-3杆菌在固体培养基上生长为圆形乳白色半透明菌落，表面光滑，边缘整齐有隆起，能以多种有机物为碳源，具有良好的聚磷效能，可用于污水生物除磷。实施例2：菌株HCSW-3的种属鉴定通过扩增该菌株的16SrDNA，得到了长度为1395bp的16SrDNA序列，如SEQIDNO.1所示。PCR引物采用细菌通用引物7F5′-CAGAGTTT本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一株耐低温聚磷菌Acinetobacter sp.HCSW-3，其特征在于，所述的耐低温聚磷菌Acinetobacter sp.HCSW-3，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.18385，保藏日期为2019年8月14日，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。/n

【技术特征摘要】
1.一株耐低温聚磷菌Acinetobactersp.HCSW-3，其特征在于，所述的耐低温聚磷菌Acinetobactersp.HCSW-3，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCCNo.18385，保藏日期为2019年8月14日，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。


2.权利要求1所述的耐低温聚磷菌Acinetobactersp.HCSW-3的专性培养基，其特征在于，所述的专性培养基配方为：CH3COONa，3.23g/L；KH2PO4，35mg/L；CaCl2，19.39mg/L；NH4Cl，305.52mg/L；MgSO4·7H2O，91.26mg/L；PIPESbuffer，8.5g/L；微量元素，2mL；pH调至7.0。


3.根据权利要求2所述的耐低温聚磷菌Acinetobactersp.HCSW-3的专性培养基，其特征在于，所述的微量元素的配方为：FeSO4·7H2O5g/L、CuSO4·5H2O1.6g/L、MnCl2·4H2O5g/L、(NH4)6Mo7O24·4H2O1.1g/L、H3BO30.05g/L、CoCl2·6H2O0.05g/L、KI0.01g/L。


4.权利要求1所述的耐低温聚磷菌Acinetobactersp.HCSW-3在污水处理中除磷的应用。


5.根据权利要求4所述的耐低温聚磷菌A...

【专利技术属性】
技术研发人员：尹安伟，龚劲松，李昂，宋丽明，陈明，
申请(专利权)人：扬州市海诚生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32