失笑散在制备治疗子宫内膜异位症疼痛症的药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了失笑散在制备治疗子宫内膜异位症疼痛症的药物中的应用，本发明专利技术通过实验验证，失笑散能显著提高子宫内膜异位症大鼠的热辐射痛和机械痛阈值，能够有效改善DRG神经元损伤，降低异位内膜组织中神经纤维NF200的密度；与伪手术组相比，模型组异位内膜组织和血清中IL‑1β、IL‑6、TNF‑α的表达均显著升高，失笑散可显著降低子宫内膜异位症大鼠血清及异位内膜组织中IL‑1β、IL‑6和TNF‑α的表达水平，由此可见，失笑散降低炎性因子的水平而抑制子宫内膜异位症的发生发展，同时失笑散通过改善DRG神经元损伤，降低神经纤维密度，能够有效缓解子宫内膜异位症疼痛。

【技术实现步骤摘要】
失笑散在制备治疗子宫内膜异位症疼痛症的药物中的应用
本专利技术属于中医药技术，特别是涉及失笑散在制备治疗子宫内膜异位症疼痛症的药物中的应用。
技术介绍
子宫内膜异位症(Endometriosis,EM)指有生长功能的子宫内膜组织出现在子宫腔被覆黏膜以外的身体其他部位而引起的病证[1]，是一种困扰女性健康的常见妇科疾病[2]。在育龄妇女中发病率较高,严重影响患者生活质量,其发病机制尚未完全清楚,治疗亦未臻完善。该病常伴随痛经、月经紊乱、性交痛和不孕等临床症状[3-5]。古代中医学无“子宫内膜异位症”的记载。其临床表现为腹中包块有形可征，经行腹痛，月经不调等症状，“血瘀”是其基本病因病机，疼痛是内异症的主要症状，痛经是子宫内膜异位症的典型症状。子宫内膜异位症引起疼痛原因及发病机理多样。神经、激素和免疫之间形成复杂的关联，导致子宫内膜异位症疼痛发生机制复杂[6-9]。子宫内膜异位症疼痛是一种伴随着炎性痛的神经病理性疼痛，以NGF为代表的神经营养因子家族在神经病理性疼痛中发挥重要的作用。炎症被认为是子宫内膜异位症疼痛的原因，炎症细胞的浸润、多种细胞因子的持续高表达共同激活前列腺素疼痛信号途径参与子宫内膜异位症疼痛发生过程。子宫内膜异位症的临床治疗包括药物和手术治疗两种，药物治疗目前存在疗效差、副作用大、停药后又极易复发等问题[10-11]。中医认为：疼痛发生的病机多为“不通则痛”，即气血受到各种因素的影响发生瘀结、冲逆和郁滞等，从而引起经络、脏腑等局部的疼痛，治疗上有比较明显的优势[12]。基于当前西药对子宫内膜异位症疼痛治疗的缺陷，探索更优的治疗方法和更有效的治疗药物迫在眉睫。根据中医辨证，子宫内膜异位症属于中医“癥瘕”、“痛经”的范畴。痛经，祖国医学有“经来腹痛”、“吊阴痛”、“经行下牛膜片”等记载。痛经的基本病机即“不通则痛”、“不荣则痛”，本质是“淤血”。失笑散由蒲黄、五灵脂两味药组成，出自宋代《太平惠民和剂局方》，意为：“既痛已止，妇人情不自禁地笑了”。《本草纲目》记载：蒲黄“生则能行，熟则能止”、“五灵脂通利血脉、散瘀止痛”。故两药相须为用，能相互促进，增强作用。本实验通过建立子宫内膜异位症大鼠模型观察失笑散对子宫内膜异位症大鼠疼痛的治疗作用，探索失笑散对子宫内膜异位症大鼠异位内膜组织神经元的密度分布及损伤的影响和血清中肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)表达，初步探讨其对子宫内膜异位症的疼痛的作用及机制。
技术实现思路
专利技术目的：针对上述现有技术，本专利技术提供了失笑散在制备治疗子宫内膜异位症疼痛症的药物中的应用。技术方案：本专利技术公开了失笑散在制备治疗子宫内膜异位症的药物中的应用。更进一步的，本专利技术公开的是失笑散在制备治疗子宫内膜异位症疼痛症的药物中的应用。本专利技术所述药物能够显著提高子宫内膜异位症大鼠的热辐射痛和机械痛阈值；能够改善DRG神经元损伤、降低神经纤维NF200密度；能够降低IL-1β、IL-6、TNF-α的表达水平。本专利技术所述失笑散为等份的蒲黄和五灵脂，具体炮制方法为：取等份的蒲黄和五灵脂，加黄酒加热回流，过滤取上清；药渣再加黄酒加热回流，过滤取上清；合并上清，浓缩即可。进一步的，加10倍量黄酒，加热回流120min；浓缩得到生药浓度0.12g/mL。其中，有效成分为原儿茶酸和香蒲新苷。失笑散由蒲黄、五灵脂两味药组成，出自宋代《太平惠民和剂局方》，意为：“既痛已止，妇人情不自禁地笑了”。《本草纲目》记载：蒲黄“生则能行，熟则能止”、“五灵脂通利血脉、散瘀止痛”。故两药相须为用，能相互促进，增强作用。有益效果：本专利技术通过实验验证，失笑散能显著提高子宫内膜异位症大鼠的热辐射痛和机械痛阈值，能够有效改善DRG神经元损伤，降低异位内膜组织中神经纤维NF200的密度；与伪手术组相比，模型组异位内膜组织和血清中IL-1β、IL-6、TNF-α的表达均显著升高，失笑散可有效降低IL-1β、IL-6、TNF-α的表达水平，由此可见，失笑散通过减轻炎性因子的增加而抑制子宫内膜异位症的发生发展，同时失笑散通过改善DRG神经元损伤，降低神经纤维密度，能够有效缓解子宫内膜异位症疼痛。附图说明图1是子宫内膜异位症大鼠模型的建立；图2是失笑散样品HPLC色谱图；图3是不同组别大鼠DRG神经元病理结果；图4是不同组别大鼠子宫内膜组织中NF200的表达情况(标尺：50μm)；图5是失效散对子宫内膜异位症大鼠血清中IL-1β蛋白表达水平的影响；图6是失效散对子宫内膜异位症大鼠血清中IL-6蛋白表达水平的影响；图7是失效散对子宫内膜异位症大鼠血清中TNF-α蛋白表达水平的影响；图8是失效散对子宫内膜异位症大鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α蛋白表达水平的影响(标尺：50μm)。具体实施方式下面结合具体实施例对本申请作出详细说明。本实验通过建立子宫内膜异位症大鼠模型，观察失笑散对子宫内膜异位症大鼠疼痛的治疗作用。1.材料与方法1.1实验材料SD大鼠：SPF级雌性SD大鼠50只，体重(200±20)g，购于上海斯莱克实验动物有限责任公司，合格证号：SCXK(沪)2012-0005。IL-1β、IL-6、TNF-α酶联免疫吸附检测试剂盒：购自杭州联科生物技术股份有限公司。失笑散：五灵脂和蒲黄炭各1.5g组成，由江苏省中西医结合医院中药房提供。加10倍量黄酒，加热回流120min，过滤取上清；药渣再加10倍量黄酒加热回流120min，过滤取上清。合并上清，浓缩到25mL，生药浓度0.12g/mL，作为失笑散样品。进样前样品过0.22μm滤膜，4℃保存备用。大鼠疼痛实验系统：美国Tail-flickAnalgesiaMeter。VonFrey纤维丝测痛仪：美国StoeltingCo。1.2实验方法1.2.1大鼠疼痛个体差异的排除：在实验造模前，通过机械痛觉实验，剔除对疼痛不敏感或过于敏感的大鼠，筛选出痛觉敏感性大致相同的大鼠进行造模；在模型成功后，同样采取机械痛觉实验，剔除对疼痛不敏感或过于敏感的大鼠，保证实验误差的最小化。1.2.2子宫内膜异位症大鼠模型的建立：将50只雌性健康大鼠，采用以上方法筛选痛阈值一致的大鼠取一部分作为伪手术组，其余大鼠按照胡春萍等[13-15]的方法建立大鼠子宫内膜异位症模型。大鼠皮肤常规消毒后，下腹部正中切口长约3cm，进腹后在膀胱背侧找到子宫。游离左侧子宫，近端离左子宫角lcm处结扎，远端离卵巢lcm处结扎。将切下的子宫组织放在盛有无菌生理盐水的培养皿中，纵行解剖开子宫段，剪取3mm×5mm的子宫内膜组织(含子宫肌层)1块。用6-0(1)肠线以内膜面贴于种植部位四角缝合于左侧腹壁上，令其表面上皮对着腹壁，缝合腹肌切口，常规关腹。伪手术组大鼠只作开腹手术，术后连续三天注射青霉素40万u/只，正常喂养。术后第2天开本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.失笑散在制备治疗子宫内膜异位症疼痛症的药物中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.失笑散在制备治疗子宫内膜异位症疼痛症的药物中的应用。


2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物提高子宫内膜异位症大鼠的热辐射痛和机械痛阈值。


3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物改善DRG神经元损伤、降低神经纤维NF200密度。


4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物降低子宫内膜异位症大鼠血清IL-1β、TNF-α的表达水平。


5.根据权利要求1所述的应用...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡春萍，曹鹏，孙晓艳，杨杰，吴秀玲，
申请(专利权)人：江苏省中医药研究院，
类型：发明
国别省市：江苏;32