一种提高小麦成熟胚再生率的组织培养方法技术

技术编号:25619752 阅读:99 留言:0更新日期:2020-09-15 21:06
本发明专利技术公开了一种提高小麦成熟胚再生率的组织培养方法,属于植物组织培养技术领域。本发明专利技术发现在小麦成熟胚的组织培养过程中,添加一定浓度的组蛋白去乙酰化酶抑制剂可以有效提高胚性愈伤组织诱导率和再生率;特别是在小麦成熟胚培养的预培养基中添加200μM的丁酸钠或0.5μM的曲古抑菌素A,可有效提高小麦材料CB037、Fielder和中国春的小麦成熟胚再生率。

【技术实现步骤摘要】
一种提高小麦成熟胚再生率的组织培养方法
本专利技术涉及植物组织培养
,具体涉及一种提高小麦成熟胚再生率的组织培养方法。
技术介绍
小麦(TriticumaestivumL.)是世界第一大口粮作物,约35%~40%的人以其为口粮。随着全球人口总量的不断增加和生物技术的不断发展,通过分子设计育种改良小麦的产量和品质等农艺性状已成为重要趋势。基因功能研究需要利用基因工程方法将外源基因导入小麦,而小麦组织培养的低再生频率是遗传转化的重要限制因素。目前,小麦遗传转化常用的外植体有幼胚、成熟胚、花药和幼穗等,其中,幼胚被认为是最理想的外植体,愈伤组织诱导率和植株再生率都比较高,获得转基因小麦植株的报道多以转化幼胚为主。但幼胚取材受时间和空间的限制,适宜的取材时间难以准确把握,在一定程度上制约了小麦遗传转化的规模化开展。成熟胚具有取材方便、不易受环境条件影响、个体间生理状态一致等优势,成为目前研究者进行突破的热点。但是,小麦成熟胚的组织培养比较困难,再生率比较低,能够用于遗传转化的基因型还很少。组蛋白修饰是表观遗传修饰的重要调控机制之一本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.组蛋白去乙酰化酶抑制剂在提高小麦成熟胚的胚性愈伤组织诱导率和再生率中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.组蛋白去乙酰化酶抑制剂在提高小麦成熟胚的胚性愈伤组织诱导率和再生率中的应用。


2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述组蛋白去乙酰化酶抑制剂选自曲古抑菌素A或丁酸钠。


3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述曲古抑菌素A的加入浓度为0.5μM,丁酸钠的加入浓度为200μM。


4.一种提高小麦成熟胚再生率的组织培养方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)对小麦种子进行预处理,将预处理后的小麦种子的成熟胚刮碎,接种于添加有组蛋白去乙酰化酶抑制剂的预培养基中,在黑暗、25℃条件下培养7天,得到小麦成熟胚愈伤组织;
(2)将步骤(1)得到的小麦成熟胚愈伤组织转移到诱导培养基中,在黑暗、25℃条件下培养14天,得到胚性愈伤组织;
(3)将步骤(2)得到的胚性愈伤组织转移到分化培养基中,在光照16小时/天、光强3500Lux、温度25℃条件下培养21天。


5.根据权利要求4所述的组织培养方法,其特征在于,步骤(1)中,所述组蛋白去乙酰化酶抑制剂选自曲古抑菌素A或丁酸钠;所述曲古抑菌素A的加入浓度为0.5μM,丁酸钠的加入浓度为200μM。


6.根据权利要求4所述的组织培养方法,其特征在于,步骤(1)中,所述预培养基以MS基本培养基为基础,并添加有0.7...

【专利技术属性】
技术研发人员:张宪省别晓敏李兴国高新起
申请(专利权)人:山东农业大学
类型:发明
国别省市:山东;37

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