活化肿瘤浸润淋巴细胞(TILs)的方法技术

提供一种在有需要的个体中活化肿瘤浸润淋巴细胞(tumor‑infiltrating lymphocytes，TIL)的方法，具体而言是通过向该个体施用经由在培养基中共生微生物群发酵而产生的发酵组合物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】活化肿瘤浸润淋巴细胞(TILs)的方法相关申请本申请根据35U.S.C.§119主张于2018年1月9日申请的美国专利临时申请案第62/615,300号的权益，其全部内容以引用方式合并于本文。
本专利技术涉及一种在有需要的个体中活化肿瘤浸润淋巴细胞(tumor-infiltratinglymphocytes，TILs)的方法，具体而言是通过向该个体施用经由在培养基中共生微生物群发酵而产生的发酵组合物。
技术介绍
肿瘤浸润淋巴细胞(TILs)为免疫细胞族群，其被积极地招募到肿瘤部位以引发针对肿瘤生长及转移的免疫反应。已经显示肿瘤浸润淋巴细胞(TILs)直接攻击肿瘤组织并且与对检查点阻塞的反应及有利的临床结果相关联。然而，在所有患者中，肿瘤浸润淋巴细胞(TILs)的活化并非总是可行的或充分的。此外，据报导，癌细胞可引起微环境改变及抑制抗肿瘤免疫，导致对癌症药物/疗法的不敏感或耐受。需要活化肿瘤浸润淋巴细胞(TILs)或增强个体的免疫疗法特别是对抗癌症的敏感性。
技术实现思路
本专利技术基于意外的发现，即本文所述的共生微生物群的发酵产物可有效活化肿瘤动物模型中的肿瘤浸润细胞(TILs)，具体而言是促进肿瘤浸润淋巴细胞(TILs)迁移到肿瘤中并增加肿瘤内肿瘤浸润淋巴细胞(TILs)的数量，从而将冷肿瘤转化为热肿瘤并将免疫抑制性肿瘤微环境改变为免疫反应性肿瘤微环境，从而增强抗癌治疗效果，特别是与免疫检查点调节剂组合。还发现的是，在肿瘤内施用如本文所述的由共生微生物群产生的发酵产物提供了改善的治疗效果，其中给药量减少、给药过程缩短，甚至被认为无反应的远程部位的肿瘤也可以被成功地治疗。因此，本专利技术的一方面为提供一种在有需要的个体中活化肿瘤浸润淋巴细胞(TILs)的方法，包括对该个体施用发酵组合物的量，该发酵组合物是经由在培养基中共生微生物群发酵而产生，其中该共生微生物群包括(i)至少二种或更多种乳酸菌菌株，或(ii)至少二种或更多种酵母菌株，或(iii)至少一种或更多种乳酸菌菌株与至少一种或更多种酵母菌株，该量有效于增加该个体中肿瘤浸润淋巴细胞(TILs)的产生或活性的量。于某些具体实施例中，该用于发酵的培养基包含碳源、氮源，以及微量元素。于某些具体实施例中，该培养基发酵组合物包含经由该发酵产生的多种代谢物。于某些具体实施例中，该发酵组合物是通过包括下列的方法所制备：(i)在允许发酵产生多种代谢物的条件下培养在该培养基中的共生微生物群；以及(ii)收集从步骤(i)获得的该发酵组合物。于某些具体实施例中，该制备方法进一步包括对从步骤(ii)获得的该发酵组合物进行灭菌、过滤及/或浓缩。于某些具体实施例中，该发酵组合物有效地(i)改变肿瘤微环境以避免抑制抗肿瘤免疫，及/或(ii)改善化学疗法及/或癌症疗法的效果，及/或(iii)将冷肿瘤转化为热肿瘤，及/或(iv)提高反应率，及/或(v)减小肿瘤大小，及/或(vi)提高该个体的存活率。于某些具体实施例中，该个体患有肿瘤疾病。于某些具体实施例中，该个体患有癌症。于某些具体实施例中，该个体患有细菌感染的肿瘤。于某些具体实施例中，该癌症选自由下列所组成的群组：结肠癌、肺癌、乳癌、胰脏癌、皮肤癌、脑癌、卵巢癌、肾脏癌、胃癌、头颈癌、食道癌、膀胱癌、直肠癌、骨癌、子宫癌、前列腺癌，以及血液系统恶性肿瘤。于某些具体实施例中，该个体已经历、正在经历或正计划进行针对肿瘤疾病的免疫疗法，例如，使用免疫检查点调节剂。于某些具体实施例中，该方法包括在施用该发酵组合物之前选择有需要活化肿瘤浸润淋巴细胞(TILs)的个体。于某些具体实施例中，该个体已经确定具有相较参考含量相对较低含量的肿瘤浸润淋巴细胞(TILs)。于某些具体实施例中，该肿瘤浸润淋巴细胞(TILs)包括CD4+、CD8+，及/或CD86+树突细胞。于某些具体实施例中，该发酵组合物经由口服施用或注射施用方式给药。于其他具体实施例中，该发酵组合物经由肿瘤内施用方式给药。经由在如本文所述的培养基中共生微生物群的发酵产生的发酵组合物也在本专利技术的范围内，用于在有需要的个体中活化肿瘤浸润淋巴细胞(TILs)。本专利技术的特征还在于经由在如本文所述的培养基中共生微生物群发酵而产生的发酵组合物在制备用于在有需要的个体中活化肿瘤浸润淋巴细胞(TILs)的药物中的用途。本专利技术进一步提供了一种套组或组合，包含经由在如本文所述的培养基中共生微生物群发酵而产生的发酵组合物，任选地与免疫检查点调节剂组合，用于在有需要的个体中活化肿瘤浸润淋巴细胞(TILs)。于某些具体实施例中，该套组或组合可用于(i)改变肿瘤微环境以避免抑制抗肿瘤免疫，及/或(ii)改善化学疗法及/或癌症疗法的效果，及/或(iii)将冷肿瘤转化为热肿瘤，及/或(iv)提高反应率，及/或(v)减小肿瘤大小，及/或(vi)提高该个体的存活率。较佳地，该套组或组合提供协同效应。于下列的描述中阐述了本专利技术之一或多个具体实施例的细节。由下列对数个具体实施例的详细描述以及由所附的申请权利要求书中，本专利技术的其他特征或优点将显而易见。附图说明当结合附图阅读时，将更好地理解前述
技术实现思路
以及本专利技术的下列详细描述。出于说明本专利技术的目的，在附图中示出了目前较佳的具体实施例。然而，应当理解的是，本专利技术不限于所示的精确配置及手段。于附图中：图1所示为本专利技术的发酵组合物对骨髓树突细胞(bonemarrowdendriticcells，BMDCs)成熟的刺激作用。培养该细胞并以抗CD83抗体检测。***P<0.001。**P<0.01。通过每个干预组及对照组的比较获得P值。图2为用于在结肠癌小鼠模型中经由口服施用研究本专利技术的发酵组合物的效果的实验设计的示意图。将结肠癌CT26细胞移植到该小鼠中，并以该发酵组合物处理，任选地与抗-PD1抗体组合。图3为显示来自结肠癌小鼠模型的肿瘤的免疫组织化学分析结果的图像，包括CD4T细胞、CD8T细胞或CD86树突细胞的免疫荧光染色。将结肠癌CT26细胞移植到该小鼠中，并以载剂对照、组合物X，或组合物X与抗PD1抗体的组合处理。图4为显示来自结肠癌小鼠模型的肿瘤的免疫组织化学分析结果的图像，包括CD4T细胞、CD8T细胞，或CD86树突细胞的免疫荧光染色。将结肠癌CT26细胞移植到该小鼠中，并以载剂对照、抗PD1抗体、组合物LT12，或组合物LT12与抗PD1抗体的组合处理。从该小鼠获得肿瘤样品并进行免疫组织化学分析。图5为显示结肠癌小鼠模型中肿瘤CD8T细胞分析结果的图表。将结肠癌CT26细胞移植到该小鼠中，并以载剂对照、抗PD1抗体、组合物LT12，或组合物LT12与抗PD1抗体的组合处理。消化从小鼠获得的肿瘤样品以提供细胞悬浮液，包括解离的肿瘤细胞，将其定量以确定总肿瘤活细胞中CD8T细胞的量。图6包括显示结肠癌小鼠模型的存活率及肿瘤大小的图表。将结肠癌CT26细胞移本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种在有需要的个体中活化肿瘤浸润淋巴细胞(tumor-infiltratinglymphocytes，TILs)的方法，包括对该个体施用发酵组合物的量，该发酵组合物是经由在培养基中共生微生物群发酵而产生的，其中该共生微生物群包括(i)至少二种或更多种乳酸菌菌株，或(ii)至少二种或更多种酵母菌株，或(iii)至少一种或更多种乳酸菌菌株与至少一种或更多种酵母菌株，该量有效于增加该个体中肿瘤浸润淋巴细胞(TILs)的产生或活性。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180109 US 62/615,3001.一种在有需要的个体中活化肿瘤浸润淋巴细胞(tumor-infiltratinglymphocytes，TILs)的方法，包括对该个体施用发酵组合物的量，该发酵组合物是经由在培养基中共生微生物群发酵而产生的，其中该共生微生物群包括(i)至少二种或更多种乳酸菌菌株，或(ii)至少二种或更多种酵母菌株，或(iii)至少一种或更多种乳酸菌菌株与至少一种或更多种酵母菌株，该量有效于增加该个体中肿瘤浸润淋巴细胞(TILs)的产生或活性。


2.如权利要求1的方法，其中该培养基包括碳源、氮源，以及微量元素。


3.如权利要求1的方法，其中该发酵组合物包括经由该发酵产生的多种代谢物。


4.如权利要求1的方法，其中该发酵组合物是通过包括下列的方法所制备：
(i)在允许发酵产生多种代谢物的条件下培养在该培养基中的共生微生物群；以及
(ii)收集从步骤(i)获得的该发酵组合物。


5.如权利要求1的方法，其中该制备方法进一步包括对从步骤(ii)获得的该发酵组合物进行灭菌、过滤及/或浓缩。


6.如权利要求1的方法，其中该发酵组合物的量是有效于(i)改变肿瘤微环境以避免抑制抗肿瘤免疫，及/或(ii)改善化学疗法及/或癌症疗法的效果，及/或(iii)将冷肿瘤转化为热肿瘤，及/或(iv)提高反应率，及/或(v)减小肿瘤大小，及/或(vi)提高该个体的存活率。


7.如权利要求1的方法，其中该个体患有肿瘤疾病。


8.如权利要求1的方法，其中该个体患有癌症。


9.如权利要求1的方法，其中该个体患有细菌感染的肿瘤。


10.如权利要求8的方法，其中该癌症选自由下列所组成的群组：结肠癌、肺癌、乳癌、胰脏癌、皮肤癌、脑癌、卵巢癌、肾脏癌、胃癌、头颈癌、食道癌、膀胱癌、直肠癌、骨癌、子宫癌、前列腺癌，以及血液系统恶性肿瘤。


11.如权利要求1的方法，其中该个体已经历、正...

【专利技术属性】
技术研发人员：路孔明，郭明良，杨瑷祯，
申请(专利权)人：中天生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：中国台湾;71