一种无酶聚合物免疫探针及其制备方法和应用技术

本发明专利技术提供了一种无酶聚合物免疫探针及其制备方法和应用，属于生物传感技术领域；本发明专利技术中首先将金纳米粒子、壳聚糖和Fc纳米球悬浊液混合制备了金纳米粒子功能化的二茂铁二甲酸Fc@AuNPs，并将其与金黄色葡萄球菌抗体反应生成免疫探针，最后将免疫探针组装成传感器，用于检测金黄色葡萄球菌；所述传感器能够快速、高效、灵敏的检测牛奶中金黄色葡萄球菌；所述金黄色葡萄球菌的检测范围为1.62×10

【技术实现步骤摘要】
一种无酶聚合物免疫探针及其制备方法和应用
本专利技术属于生物传感
，提供了一种无酶聚合物免疫探针及其制备方法和应用。
技术介绍
金黄色葡萄球菌（S.aureus）是一种较为常见的致病菌。其以视频为繁殖载体，在代谢活动中产生肠毒素，进而通过食物链进入人体引起食物中毒；并且金黄色葡萄球菌会导致奶牛患乳腺炎，造成奶业严重经济损失。因此研究出快速、高效的检测方法具有实际研究意义。金黄色葡萄球菌的检测方法主要有酶学显色检测法、免疫检测法、分子检测法等。基于特异性分泌酶进行显色培养的酶学显色检测法易出现检测结果的假阳性。基于全细胞或菌体特征性物质“抗体－抗原”结合识别原理的免疫检测法虽然特异性强，但是对所用生物制剂要求很高。基于基因扩增分析的分子检测法所需的检测费用太高。因此，亟需研究出一种能够满足现阶段食品安全需求的金黄色葡萄球菌检测方法。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种无酶聚合物免疫探针及其制备方法和应用。本专利技术中，首先将金纳米粒子、壳聚糖和Fc纳米球悬浊液混合制备了金纳米粒子功能化的二茂铁二甲酸Fc@本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种无酶聚合免疫探针的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：/n（1）Fc@AuNPs的制备：/n将Fc纳米球悬浊液与AuNPs溶液、壳聚糖溶液混合反应，反应过程中不断搅拌，反应结束后离心取沉淀、将沉淀用蒸馏水洗涤、过滤后，得到金纳米粒子功能化的二茂铁二甲酸Fc@AuNPs固体，将其分散于一定量的超纯水中，得到Fc@AuNPs悬浊液，储存于冰箱中备用；/n（2）无酶聚合物免疫探针的制备：/n将步骤（1）中制备的Fc@AuNPs悬浊液与金黄色葡萄球菌抗体混匀，在37 ℃下反应40min，反应过程中不断搅拌， 反应结束后离心取沉淀，然后蒸馏水洗涤、过滤，最后将其分散于一定量的PBS溶液中，得到无...

【技术特征摘要】
1.一种无酶聚合免疫探针的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
（1）Fc@AuNPs的制备：
将Fc纳米球悬浊液与AuNPs溶液、壳聚糖溶液混合反应，反应过程中不断搅拌，反应结束后离心取沉淀、将沉淀用蒸馏水洗涤、过滤后，得到金纳米粒子功能化的二茂铁二甲酸Fc@AuNPs固体，将其分散于一定量的超纯水中，得到Fc@AuNPs悬浊液，储存于冰箱中备用；
（2）无酶聚合物免疫探针的制备：
将步骤（1）中制备的Fc@AuNPs悬浊液与金黄色葡萄球菌抗体混匀，在37℃下反应40min，反应过程中不断搅拌，反应结束后离心取沉淀，然后蒸馏水洗涤、过滤，最后将其分散于一定量的PBS溶液中，得到无酶聚合物免疫探针。


2.根据权利要求1所述的无酶聚合免疫探针的制备方法，其特征在于，步骤（4）中，所述Fc纳米球悬浊液、AuNPs溶液、壳聚糖溶液的体积比5：1~1.5：1~2，所述超纯水的用量为5mL；所述反应时间为1h。


3.根据权利要求1所述的无酶聚合免疫探针的制备方法，其特征在于，步骤（5）中，所述加入的金黄色葡萄球菌抗体浓度为80μg/mL，Fc@AuNPs悬浊液与金黄色葡萄球菌抗体的体积分别为5mL、1mL，所述PBS溶液pH值为7.4，其添加量为2mL。


4.一种权利要求1-3任一项所述方法制备的无酶聚合物免疫探针，其特征在于，所述免疫探针基于金纳米粒子功能化的二茂铁二甲酸Fc@AuNPs与金黄色葡萄球菌抗体组装而成。


5.一种基于权利要求4所述无酶聚合物免疫探针制备的免疫传感器，其特征在于，所述传感器包括工作电极、辅助电极和参比电极；...

【专利技术属性】
技术研发人员：韩恩，丁文龙，张云，张毛妮，
申请(专利权)人：江苏大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32