【技术实现步骤摘要】
一种检测β-内酰胺酶的探针及其在荧光检测耐药菌上的应用
本专利技术涉及生物化学技术及医药
，具体地说是涉及一种检测β-内酰胺酶的探针及其在荧光检测耐药菌上的应用。
技术介绍
抗生素是现代医学最成功的药物类型之一，它的出现和发展也是现代医学重要的里程碑之一。但是由于全球范围内人们收入的增加，获取抗生素的途径越来越简单，使得抗生素使用量大大的增加，这是细菌产生耐药性的重要原因之一。同时，抗生素的误用、滥用也加剧了细菌耐药。以上等等原因造成由耐药菌引起的感染者数量越来越多，无法治愈的感染概率越来越大。世卫组织WHO首份全球抗生素耐药报告显示，全世界正在面临严重的公共卫生威胁，WHO新的全球抗菌素监测系统(GLASS)显示，在22个国家的50万疑似细菌感染患者中广泛存在抗生素耐药性。预计到2050年，全球范围内由于细菌耐药引起每年死亡人数会上升至一千万，花费高达一万亿美金。β-内酰胺类抗生素是在临床实践中使用最广泛的药物类型之一，该药物的药效团β-内酰胺四元环由于环键角小、环张力大，导致该类药物的化学性质不稳定，易被打...
【技术保护点】
1.一种检测β-内酰胺酶的探针，其特征在于，当检测为头孢噻吩时，所述探针如B1
【技术特征摘要】
1.一种检测β-内酰胺酶的探针，其特征在于，当检测为头孢噻吩时，所述探针如B1所示；当检测为A类β-内酰胺酶特异性水解的底物时，所述探针如P1
所示；当检测为B类β-内酰胺酶特异性水解的底物时，所述探针如P2所示；当检测为C类β-内酰胺酶特异性水解的底物时，所述探针如P3所示。
2.基于权利要求1所述的一种检测β-内酰胺酶的探针在检测耐药菌上的应用。
3.一种多重环境下适应性的检测试纸，其特征在于，所述检测试纸的检测区域含有上述检测β-内酰胺酶的探针。
4.基于多重环境下适应性的检测试纸的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤1，选取一张层析纸作为进样层，并利用软件在层析纸上画出第一层图形，利用蜡打印技术在层析纸上形成检测微区，并将打印好的层析纸置于烘箱中烘烤，使蜡熔化并穿透纸张厚度，形成亲水-疏水壁垒；其中进样口区(1)、样品渗透0区(2)所示两个圆形所连接的区域为亲水区，其余部分均为蜡印疏水区；
步骤2，另选一张纸作为检测一层，并利用软件在层析纸上画出第二层图形；
利用蜡打印技术在层析纸上形成检测微区，并将打印好的层析纸置于烘箱中烘烤，使蜡熔化并穿透纸张厚度，形成亲水-疏水壁垒；其中探针B1区(1-1)和对照0区(2-1)为亲水区，其余部分均为蜡印疏水区；步骤1处理后的层析纸与步骤2处理后的层析纸通过粘贴黏在一起，粘贴时，应确保进样口区(1)与探针B1区(1-1)的完全重合，样品渗透0区2(2)与对照0区(2-1)完全重合；
步骤3，另选一张纸作为样品渗透区，并利用软件在层析纸上画出第三层图形，利用蜡打印技术在层析纸上形成检测微区，并将打印好的层析纸置于烘箱中烘烤，使蜡熔化并穿透纸张厚度，形成亲水-疏水壁垒；其中相互连通的9孔形区域，连通的中心区域即扩散区(1-2)与9个孔均为亲水区，所述9孔区域分别为渗透1区(3)、渗透2区(4)、渗透3区(5)、渗透4区(6)、渗透5区(7)，渗透6区(8)、渗透7区(9)、渗透8区(10)、渗透9区(11)，其余部分均为蜡印疏水区；将步骤2中粘贴后的第二层层析纸与步骤3中处理后的层析纸粘贴，粘贴时，应确保扩散区(1-2)与探针B1区(1-1)完全重合；
步骤4，另选一张纸作为检测二层，并利用软件在层析纸上画出第四层图形，利用蜡打印技术在层析纸上形成检测微区，并将打印好的层析纸置于烘箱中烘烤，使蜡熔化并穿透纸张厚度，形成亲水-疏水壁垒；其中独立的9孔区域分别为探针P1区(3-1)、探针P2区(4-1)、探针P3区(5-1)、空白对照区(6-1)、C1浓度荧光素区(7-1)、C2浓度荧光素区(8-1)、C3浓度荧光素区(9-1)、C4浓度荧光素区(10-1)、C5浓度荧光素区(11-1)为亲水区，其余部分均为蜡印疏水区；将步骤3中粘合后的层析纸与步骤4处理后的层析纸粘贴，粘贴时，渗透1区(3)、渗透2区(4)、渗透3区(5)、渗透4区(6)、渗透5区(7)，渗透6区(8)、渗透7区(9)、渗透8区(10)、渗透9区(11)分别与探针P1区(3-1)、探针P2区(4-1)、探针P3区(5-1)、空白对照区(6-1)、C1浓度荧光素区(7-1)、C2浓度荧光素区(8-1)、C3浓度荧光...
【专利技术属性】
技术研发人员：李林，丁阳，吴琼，余昌敏，姬文辉，黄晓，郑冰，杨乃娣，于海东，刘金华，黄维，
申请(专利权)人：南京工业大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32
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