一种采用荧光光谱定量检测胶原类蛋白的方法技术

本发明专利技术公开一种采用荧光光谱定量检测胶原类蛋白的方法，涉及胶原蛋白检测技术领域，本发明专利技术包括以下步骤：(1)将含有胶原类蛋白的原料粉碎后匀浆，在4℃条件下加入胃蛋白酶作用24h，然后经离心、盐析、透析处理后，冷冻干燥制得胶原类蛋白；(2)将胶原溶于0.1mol/L醋酸水溶液中，制成不同浓度梯度的胶原类蛋白溶液；(3)对胶原类蛋白溶液进行荧光扫描，绘制标准曲线；(4)将含有胶原蛋白的待测样品溶于0.1mol/L醋酸中，进行荧光扫描，将测得的吸收峰强度与标准曲线进行比对，即测得待测样品中胶原类蛋白的含量。本发明专利技术的有益效果在于：该方法具有准确、快速、灵敏和重现性好的优点，符合准确定量的要求。

【技术实现步骤摘要】
一种采用荧光光谱定量检测胶原类蛋白的方法
本专利技术涉及胶原蛋白检测
，具体涉及一种采用荧光光谱定量检测胶原类蛋白的方法。
技术介绍
胶原作为细胞外基质(ECM)的主要成分，是一种广泛分布于动物有机体皮肤、肌腱、软骨和血管等器官和组织中的天然大分子蛋白质，对动物的机体和器官起着支撑和保护的作用，其含量约占动物机体总蛋白质的三分之一。胶原具有良好的生物相容性、生物降解性和低免疫原性等特点，使其在组织工程、生物医药和食品等领域具有重要的应用。目前对蛋白质的定量检测方法已有相关报道，如TNBS法、Lorry法和Bergman法。但是对于胶原类蛋白质含量的专一性的检测方法尚未系统报道，仅以相关蛋白质的检测方法为标准进行检测，且这些方法具有操作繁琐、灵敏度较低的缺陷，如TNBS法是以检测自由氨基的量转换为胶原的含量的一种检测方法，该法要求物质纯度较高，且全程避光试验，导致试验结果经常出现误差。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题在于现有技术中胶原类蛋白质的定量检测方法容易出现误差，提供一种采用荧光光谱定量检测胶原本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种采用荧光光谱定量检测胶原类蛋白的方法，其特征在于：包括以下步骤：/n(1)将含有胶原类蛋白的原料粉碎后匀浆，在4℃条件下加入胃蛋白酶作用24h，然后经离心、盐析、透析处理后，冷冻干燥制得胶原类蛋白；/n(2)将胶原溶于0.1mol/L醋酸水溶液中，制成不同浓度梯度的胶原类蛋白溶液，于4℃条件下静置24h；/n(3)对步骤(2)中不同浓度梯度的胶原类蛋白溶液进行荧光扫描，以胶原类蛋白溶液浓度为横坐标，以最大吸收峰强度为纵坐标，绘制标准曲线；/n(4)将含有胶原蛋白的待测样品按照步骤(1)处理后，溶于0.1mol/L醋酸中，于4℃条件下静置24h后，进行荧光扫描，将测得的吸收峰强度与标准曲...

【技术特征摘要】
1.一种采用荧光光谱定量检测胶原类蛋白的方法，其特征在于：包括以下步骤：
(1)将含有胶原类蛋白的原料粉碎后匀浆，在4℃条件下加入胃蛋白酶作用24h，然后经离心、盐析、透析处理后，冷冻干燥制得胶原类蛋白；
(2)将胶原溶于0.1mol/L醋酸水溶液中，制成不同浓度梯度的胶原类蛋白溶液，于4℃条件下静置24h；
(3)对步骤(2)中不同浓度梯度的胶原类蛋白溶液进行荧光扫描，以胶原类蛋白溶液浓度为横坐标，以最大吸收峰强度为纵坐标，绘制标准曲线；
(4)将含有胶原蛋白的待测样品按照步骤(1)处理后，溶于0.1mol/L醋酸中，于4℃条件下静置24h后，进行荧光扫描，将测得的吸收峰强度与标准曲线进行比对，即测得待测样品中胶原类蛋白的含量。


2.根据权利要求1所述的采用荧光光谱定量检测胶原类蛋白的方法，其特征在于：所述步骤(1)中的胶原类蛋白包括胶原、明胶或胶原衍生物。


3.根据权利要求2所述的采用荧光光谱定量检测胶原类蛋白的方法，其特征在于：所述步骤(1)中含有胶原类蛋白的原料包括牛皮、猪皮或鱼皮等。


4.根据权利要求1所述的采用荧光光谱定量检测胶原类蛋白的方法，其特征在于：所述步骤(2)中胶原类蛋白溶液的浓度为0.1-1.0mg/mL。


5.根据权利要求1所述的采用荧光光谱定量检测胶原类蛋白的方法，其特征在于：所述步骤(3)中荧光扫描的步骤包括：将静置的胶原类蛋白溶液移至四通石英...

【专利技术属性】
技术研发人员：李从虎，吴彦，龙槿彦，
申请(专利权)人：安庆师范大学，
类型：发明
国别省市：安徽;34