内酰胺酶及其应用和酶法拆分制备(1R，4S)-文斯内酯的方法技术

本发明专利技术公开了一种内酰胺酶及其应用和酶法拆分制备(1R，4S)‑文斯内酯的方法，该内酰胺酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。用于编码上述内酰胺酶的核酸分子的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。酶法拆分制备(1R，4S)‑文斯内酯的方法包括：在缓冲液体系中，将底物和上述内酰胺酶混合反应，底物为2‑氮杂双环[2.2.1]庚‑5‑烯‑3‑酮。该内酰胺酶具有底物耐受度高，活性高的特点，将其用于酶法拆分制备(1R，4S)‑文斯内酯中的方法中，其能够使得较高浓度的底物在该内酰胺酶的作用下充分反应，获得收率和手性纯度较高的(1R，4S)‑文斯内酯，提供了生产效率，降低了生产成本。

【技术实现步骤摘要】
内酰胺酶及其应用和酶法拆分制备(1R，4S)-文斯内酯的方法
本专利技术涉及生物工程
，具体而言，涉及一种内酰胺酶及其应用和酶法拆分制备(1R，4S)-文斯内酯的方法。
技术介绍
γ-内酰胺是化合物2-氮杂二环[2.2.1]庚-5-烯-3-酮的简称(亦俗称为文斯内酯)，其分子式为C6H7NO。γ-内酰胺的其中一个异构体为(-)-γ-内酰胺即(1R，4S)-文斯内酯，由光学纯的(1R，4S)-文斯内酯出发合成的药物主要有抗HIV药物阿巴卡韦，由(1S，4R)-文斯内酯出发合成的主要有抗流感药物帕拉米韦。因而拆分制备(1R，4S)-文斯内酯具有重要的经济价值和社会价值。目前，通常采用生物催化法来获得光学纯的(1R，4S)-文斯内酯，但是目前用于生物催化法的酶的耐受度及活性普遍不太高，导致可正常进行的反应体系的底物浓度较小，降低了生产效率，成本较高。鉴于此，特提出本专利技术。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种内酰胺酶及其应用和酶法拆分制备(1R，4S)-文斯内酯的方法，以改善上述问题。本专利本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种内酰胺酶，其特征在于，所述内酰胺酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。/n

【技术特征摘要】
1.一种内酰胺酶，其特征在于，所述内酰胺酶的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。


2.一种核酸分子，其特征在于，其用于编码如权利要求1所述的内酰胺酶，优选地，所述核酸分子的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示。


3.如权利要求1所述的内酰胺酶在酶法拆分制备(1R，4S)-文斯内酯中的应用。


4.一种酶法拆分制备(1R，4S)-文斯内酯的方法，其特征在于，其包括：在缓冲液体系中，将底物和如权利要求1所述的内酰胺酶混合反应，所述底物为2-氮杂双环[2.2.1]庚-5-烯-3-酮。


5.根据权利要求4所述的酶法拆分制备(1R，4S)-文斯内酯的方法，其特征在于，所述反应温度为15～40℃，优选为20～35℃，更优选为25～30℃。


6.根据权利要求4所述的酶法拆分制备(1R，4S)-文斯内酯的方法，其特征在于，所述内酰胺酶的用量为所述底物质量的1％～2％，优选为1％。


7.根据权利要求4所述的酶法拆分制备(1R，4S)-文斯内酯的方法，其特征在于，所述底物在缓冲溶液体系中的浓度小于700g/L，优选地，所述底物在缓冲溶液体系中的浓度为500～600g/L，更优选地，所述底物在缓冲溶液体系中的浓度为550～600g/L。

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【专利技术属性】
技术研发人员：高仰哲，吴法浩，李钢，王志航，
申请(专利权)人：安徽红杉生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：安徽;34