一种细管冻精生产中精液手动罐装的方法技术

本发明专利技术公开了一种细管冻精生产中精液手动罐装的方法，通过S1精液预稀释、S2精液冻存基础液的配置、S3精液冻存Ⅰ液的配置、S4精液冻存Ⅱ液的配置、S5鲜精灌装液的配置、S6手动灌装、S7精液冷冻等步骤，从而完成细管冻精生产中精液手动罐装的整个过程。本发明专利技术一种细管冻精生产中精液手动罐装的方法，方便快捷，效率高，可靠性高，价格便宜，非常适合于广大的中小型畜牧企业使用。

【技术实现步骤摘要】
一种细管冻精生产中精液手动罐装的方法
本专利技术涉及精液生产
，具体为一种细管冻精生产中精液手动罐装的方法。
技术介绍
猪的人工受精技术已经广泛的应用，其所用的精液多为液态保存的精液，但以液态保存精液不适于长途运输，并不能充分利用优良的种公猪，这就需要冻精来解决。冻精可以使优良基因得到永久保存，延长公猪使用年限。公猪个体的原因如：死亡、采精间隔、繁殖不育、损失的限制被打破，能更好的使优秀的公猪和较多的母猪配种以便获得更大的遗传进展。冻精在引种尤其是引入国外品种上有着非常大的优势，冻精使时间和地理位置上的差异的影响消除，其可节省外汇的支出，保证了生物安全，有利于人工受精体系的完善。随着全国性、区域性联合育种工作和保种工作的深入开展，猪的冷冻精液技术研究越来越显得重要。精液自动罐装目前仅在一些大型养殖企业中得到了应用，并没有得到普及其主要原因是价格过高，一台国产的低性能罐装机价格都在20万元之上，进口的高性能灌装机价格更贵价格在60万以上。这让很多小型养殖企业，科研工作者望而却步。目前的自动罐装设备一般都比较大，其不便于携带和运输，这让很多经常需要到实地操作的保种育种科研工作者无比的头疼。同时，自动罐装设备可靠性也有待考证，其若出现损坏将带来高额的维修费用。因此，研发一种性价比高、可靠性好的细管冻精生产中精液手动罐装方法，是十分有必要的。
技术实现思路
本专利技术的目的在于：提供一种细管冻精生产中精液手动罐装的方法，以解决以上缺陷。为了实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：<br>一种细管冻精生产中精液手动罐装的方法，包括以下步骤：S1、精液预稀释：取BTS标准液，并添加庆大霉素300mg/L，配置成精液预稀释液，将取回来的鲜精液与精液预稀释液，按照体积比1：(0.5～2)进行预稀释，然后将稀释后的精液放置于23℃的环境中平衡0.5～2h，待稀释的精液温度稳定后，再放置于17℃的恒温箱中放置2～3h，直至稀释后的精液温度稳定至17℃，从而完成鲜精液的预稀释，制得鲜精稀释液；S2、精液冻存基础液的配置：取葡萄糖、柠檬酸、Tris若干量，加水定容至100mL，并添加少量卡那霉素，放置于磁力搅拌器上充分混匀，制得精液冻存基础液；S3、精液冻存Ⅰ液的配置：取新鲜的去除蛋清的鸡蛋黄若干，用滤纸折叠包裹，并用力致卵黄膜破裂，使卵黄流出到事先准备好的量筒中，将卵黄与S2步骤制得的精液冻存基础液，按照体积比1：(2～4)混合，并放置于磁力搅拌器上搅拌20～40min，最后置于17℃的恒温箱中，待混合液温度稳定后，即制得精液冻存Ⅰ液；S4、精液冻存Ⅱ液的配置：取精液冻存Ⅰ液定量，并添加甘油、磷酸酯渗透剂适量，放置于磁力搅拌器上搅拌混匀后，再放置于4℃的冰箱中降温至4℃备用，从而制得精液冻存Ⅱ液；S5、鲜精灌装液的配置：取S1步骤制得的鲜精稀释液适量，放入大容量离心机中，于800g条件下离心10～20min，然后去除上清液，再根据计算公式添加适量精液冻存Ⅰ液充分混匀后移入集精瓶中，并放入4℃的冰箱中水浴降温2～4h；最后从冰箱中取出，并等体积加入精液冻存Ⅱ液，轻轻摇匀，放入4℃的冰箱中备用，即制得鲜精灌装液；S6、手动灌装：将S5步骤制得的鲜精灌装液，从冰箱中取出，利用灌装器吸满鲜精灌装液，并将灌装器前端插入麦管无棉花端，然后轻推灌装器，使灌装器内的鲜精灌装液缓慢进入麦管内，直至灌装器内的鲜精灌装液与麦管前端的棉花相接触，而灌装器受到阻力为止停止灌装；S7、精液冷冻：将S6步骤中灌装好鲜精灌装液的麦管的非棉花端进行封口，并将封好口的麦管放入程序冷冻仪中进行冷冻，从而完成细管冻精生产中精液手动罐装的整个过程。优选地，在S1步骤中，所述BTS标准液的组分包括：葡萄糖37g/L，EDTA1.25g/L，柠檬酸钠6g/L，碳酸氢钠1.25g/L，氯化钾0.75g/L，余量为水。优选地，在S2步骤中，以加水定容制备100mL精液冻存基础液计算，所述精液冻存基础液的原料包括：葡萄糖1.1g、柠檬酸1.48g、Tris2.42g、卡那霉素微量。优选地，在S3步骤中，所述卵黄与精液冻存基础液的体积比为1：4。优选地，在S4步骤中，以体积份计，所述精液冻存Ⅱ液的原料包括：精液冻存Ⅰ液400份、甘油24份、磷酸酯渗透剂6份。优选地，在S5步骤中，所述计算公式为：其中，V为加入的精液冻存Ⅰ液的体积；V1为离心前的鲜精稀释液的体积，单位为mL；为鲜精稀释液中的鲜精液的体积百分比浓度；ρ为鲜精液的密度，单位为亿/mL；Λ为鲜精液的活力。优选地，在S6步骤中，所述灌装器，包括注射器、点胶针头、硅胶垫片，所述硅胶垫片于点胶针头上部穿刺而过，并与注射器组装在一起。优选地，在S6步骤中，所述灌装器，包括注射筒、活塞组件、注射针头组件，所述注射筒前端设置有喇叭形口颈，所述喇叭形口颈前端设置有圆管形连接端；所述活塞组件，包括活塞柄、活塞杆、活塞片，所述活塞柄、活塞片分别设置在活塞杆的两端，所述活塞片的前端设置有与叭形口颈相适配的喇叭形堵塞，所述喇叭形堵塞前端设置有圆柱形堵塞，所述活塞片、喇叭形堵塞、圆柱形堵塞设置在注射筒内；所述注射针头组件，包括针栓、针梗，所述针栓安装在圆管形连接端上，所述针梗外壁上设置有环形硅胶片，所述环形硅胶片上设置有环形槽，所述针梗前端设置有锥形台状针尖，所述锥形台状针尖顶端设置连通针梗和针栓的内通孔，所述锥形台状针尖外壁上设置有多个连通内通孔的旁通孔。优选地，所述针栓一端设置有外凸的环形限位片。优选地，所述针栓、针梗、锥形台状针尖、环形限位片、以及环形硅胶片，均采用硅胶制成。本专利技术的有益效果在于：本专利技术一种细管冻精生产中精液手动罐装的方法，步骤简单、便捷，通过对鲜精液的稀释、以及精液冻存基础液、精液冻存Ⅰ液、精液冻存Ⅱ液的混匀处理，提高精液在细管冻存、及解冻后的活力；通过灌装器对鲜精灌装液在麦管中进行手动灌装，方便快捷，可靠性高；同时灌装器结构简单，方便携带，不易损坏，非常适合于经常需要到实地操作的保种育种科研工作者，避免高额的维修费用。本专利技术一种细管冻精生产中精液手动罐装的方法，方便快捷，效率高，可靠性高，价格便宜，非常适合于广大的中小型畜牧企业使用。附图说明图1：本专利技术实施例中的灌装器结构示意图。具体实施方式为了便于本领域技术人员理解，下面结合具体实施例对本专利技术作进一步的说明。实施例1：一种细管冻精生产中精液手动罐装的方法，包括以下步骤：S1、精液预稀释：取BTS标准液，并添加庆大霉素300mg/L，配置成精液预稀释液，将取回来的鲜精液与精液预稀释液，按照体积比1：0.5进行预稀释，然后将稀释后的精液放置于23℃的环境中平衡0.5h，待稀释的精液温度稳定后，再放置于17℃的恒温箱中放置3h，直至稀释后的精液温度稳定至17℃，从而完成鲜精液的预稀释，制得鲜精稀释液；上述BTS标准液的组分包括：葡萄糖37g/L，EDTA1.25g本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种细管冻精生产中精液手动罐装的方法，其特征在于，包括以下步骤：/nS1、精液预稀释：取BTS标准液，并添加庆大霉素300mg/L，配置成精液预稀释液，将取回来的鲜精液与精液预稀释液，按照体积比1：(0.5～2)进行预稀释，然后将稀释后的精液放置于23℃的环境中平衡0.5～2h，待稀释的精液温度稳定后，再放置于17℃的恒温箱中放置2～3h，直至稀释后的精液温度稳定至17℃，从而完成鲜精液的预稀释，制得鲜精稀释液；/nS2、精液冻存基础液的配置：取葡萄糖、柠檬酸、Tris若干量，加水定容至100mL，并添加少量卡那霉素，放置于磁力搅拌器上充分混匀，制得精液冻存基础液；/nS3、精液冻存Ⅰ液的配置：取新鲜的去除蛋清的鸡蛋黄若干，用滤纸擦干卵黄表面蛋清，再用滤纸折叠包裹卵黄，并用力致卵黄膜破裂，使卵黄流出到事先准备好的量筒中，将卵黄与S2步骤制得的精液冻存基础液，按照体积比1：(2～4)混合，并放置于磁力搅拌器上搅拌20～40min，最后置于17℃的恒温箱中，待混合液温度稳定后，即制得精液冻存Ⅰ液；/nS4、精液冻存Ⅱ液的配置：取精液冻存Ⅰ液定量，并添加甘油、磷酸酯渗透剂适量，放置于磁力搅拌器上搅拌混匀后，再放置于4℃的冰箱中降温至4℃备用，从而制得精液冻存Ⅱ液；/nS5、鲜精灌装液的配置：取S1步骤制得的鲜精稀释液适量，放入大容量离心机中，于800g条件下离心10～20min，然后去除上清液，再根据计算公式添加适量精液冻存Ⅰ液充分混匀后移入集精瓶中，并放入4℃的冰箱中水浴降温2～4h；最后从冰箱中取出，并等体积加入精液冻存Ⅱ液，轻轻摇匀，放入4℃的冰箱中备用，即制得鲜精灌装液；/nS6、手动灌装：将S5步骤制得的鲜精灌装液，从冰箱中取出，利用灌装器吸满鲜精灌装液，并将灌装器前端插入麦管无棉花端，然后轻推灌装器，使灌装器内的鲜精灌装液缓慢进入麦管内，直至灌装器内的鲜精灌装液与麦管前端的棉花相接触，而灌装器受到阻力为止停止灌装；/nS7、精液冷冻：将S6步骤中灌装好鲜精灌装液的麦管的非棉花端进行封口，并将封好口的麦管放入程序冷冻仪中进行冷冻，从而完成细管冻精生产中精液手动罐装的整个过程。/n...

【技术特征摘要】
1.一种细管冻精生产中精液手动罐装的方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、精液预稀释：取BTS标准液，并添加庆大霉素300mg/L，配置成精液预稀释液，将取回来的鲜精液与精液预稀释液，按照体积比1：(0.5～2)进行预稀释，然后将稀释后的精液放置于23℃的环境中平衡0.5～2h，待稀释的精液温度稳定后，再放置于17℃的恒温箱中放置2～3h，直至稀释后的精液温度稳定至17℃，从而完成鲜精液的预稀释，制得鲜精稀释液；
S2、精液冻存基础液的配置：取葡萄糖、柠檬酸、Tris若干量，加水定容至100mL，并添加少量卡那霉素，放置于磁力搅拌器上充分混匀，制得精液冻存基础液；
S3、精液冻存Ⅰ液的配置：取新鲜的去除蛋清的鸡蛋黄若干，用滤纸擦干卵黄表面蛋清，再用滤纸折叠包裹卵黄，并用力致卵黄膜破裂，使卵黄流出到事先准备好的量筒中，将卵黄与S2步骤制得的精液冻存基础液，按照体积比1：(2～4)混合，并放置于磁力搅拌器上搅拌20～40min，最后置于17℃的恒温箱中，待混合液温度稳定后，即制得精液冻存Ⅰ液；
S4、精液冻存Ⅱ液的配置：取精液冻存Ⅰ液定量，并添加甘油、磷酸酯渗透剂适量，放置于磁力搅拌器上搅拌混匀后，再放置于4℃的冰箱中降温至4℃备用，从而制得精液冻存Ⅱ液；
S5、鲜精灌装液的配置：取S1步骤制得的鲜精稀释液适量，放入大容量离心机中，于800g条件下离心10～20min，然后去除上清液，再根据计算公式添加适量精液冻存Ⅰ液充分混匀后移入集精瓶中，并放入4℃的冰箱中水浴降温2～4h；最后从冰箱中取出，并等体积加入精液冻存Ⅱ液，轻轻摇匀，放入4℃的冰箱中备用，即制得鲜精灌装液；
S6、手动灌装：将S5步骤制得的鲜精灌装液，从冰箱中取出，利用灌装器吸满鲜精灌装液，并将灌装器前端插入麦管无棉花端，然后轻推灌装器，使灌装器内的鲜精灌装液缓慢进入麦管内，直至灌装器内的鲜精灌装液与麦管前端的棉花相接触，而灌装器受到阻力为止停止灌装；
S7、精液冷冻：将S6步骤中灌装好鲜精灌装液的麦管的非棉花端进行封口，并将封好口的麦管放入程序冷冻仪中进行冷冻，从而完成细管冻精生产中精液手动罐装的整个过程。


2.根据权利要求1所述的一种细管冻精生产中精液手动罐装的方法，其特征在于，在S1步骤中，所述BTS标准液的组分包括：葡萄糖37g/L，EDTA1.25g/L，柠檬酸钠6g/L，碳酸氢钠1.25g/L，氯化钾0.75g/L，余量为水。


3.根据权利要求1所述的一种细管冻精生产中精液手动罐装的方法，其特征在于，在S2步骤中，以加水定容制备100mL精液冻存基础液计算，所述精液冻存基础液的原料包括：葡萄糖1.1g、柠檬酸1.48g、Tr...

【专利技术属性】
技术研发人员：曹祖兵，任尚，杨贤树，张翔栋，汝振远，张运海，
申请(专利权)人：安徽农业大学，
类型：发明
国别省市：安徽;34