表皮生长因子受体激酶底物8类蛋白3在增强多靶点激酶抑制剂疗效中的用途制造技术

本申请涉及表皮生长因子受体激酶底物8类蛋白3在增强多靶点激酶抑制剂疗效中的用途。表皮生长因子受体激酶底物8类蛋白3(EPS8L3)是HCC一个新型癌基因。体内体外实验证实，敲低EPS8L3可降低HCC肿瘤细胞的生长潜能。除此之外，敲低EPS8L3的细胞对索拉非尼的治疗更加敏感。本申请的技术方案不仅为HCC进展提供重要因素，同时也为晚期HCC治疗提供了潜在治疗靶点。

【技术实现步骤摘要】
表皮生长因子受体激酶底物8类蛋白3在增强多靶点激酶抑制剂疗效中的用途
本专利技术涉及医学领域。具体而言涉及表皮生长因子受体激酶底物8类蛋白3和索拉非尼的协同作用。
技术介绍
肝癌是一种常见肿瘤，世界范围内每年有780000例新确诊肝癌患者(Ferlay等人，2015))，其中大约四分之三为原发性肝细胞癌(hepatocellularcarcinoma，HCC)(Siegel等人，2018)。肝炎病毒、酗酒、肥胖、糖尿病以及吸烟等等都与HCC的发生发展密切相关(Yang和Roberts2010)。尽管有些早期HCC可通过手术切除或肝移植获得治愈，但晚期HCC仍然缺乏较好的治疗手段。事实上，索拉非尼、瑞格非尼等相关的多靶点激酶抑制剂是晚期HCC患者的唯一治疗药物。除此之外，尽管已有十余种药物进行了HCC治疗的临床试验，但尚未有任何一种药物到达三期临床试验的终点(Llovet和Hernandez-Gea2014)。不同于其它肿瘤随着早期手术或其它治疗手段的进步死亡率逐步降低，HCC的死亡率在2006年至2015年持续升高(Siegel等人，2018)，这提示了寻找治疗新靶点的重要性。近年来的全基因组研究揭示了HCC常见的相关突变基因，包括TP53、CTNNB1、LTTR1、EEF1A1、SF3B1以及SMARCA4(Schulze等人，2015；Totoki等人，2014)。尽管这些基因在HCC中突变率较高，HCC进展的具体分子机制却始终不甚明朗。本研究中，本专利技术人利用CancerGenomeAtlas(TCGA)的RNA数据库(Weinstein等人，2013)，比较了恶性肿瘤组织和周围正常组织的基因表达谱，发现表皮生长因子受体激酶底物8类蛋白3(epidermalgrowthfactorreceptorkinasesubstrate8-likeprotein3，EPS8L3)在HCC患者中上调，提示该基因可能与肿瘤进展相关。EPS8L3与EPS8L1以及EPS8L2一样，均属于表皮生长因子受体激酶底物8(EPS8)相关蛋白家族。由于分子结构的相似性，EPS8相关蛋白通常具有相似的细胞功能如Rac介导的肌动蛋白细胞骨架重塑(Offenhauser等人，2004)。然而，只有EPS8L1以及EPS8L2可以激活Rac并使其局限于肌动蛋白富集区域，EPS8L3的功能依旧未知。至今EPS8家族做为肿瘤关键驱动基因的作用尚未见报道。尽管有些早期肝细胞癌可通过手术切除或肝移植获得治愈，但晚期肝细胞癌仍然缺乏较好的治疗手段。索拉非尼是针对酪氨酸蛋白激酶如VEGFR、PDGFR以及Raf家族激酶的抑制剂。索拉非尼通过介导细胞自噬，进而抑制肿瘤生长，是晚期不可手术的HCC患者为数不多的治疗手段之一。然而，这种治疗手段带来的中位生存期延长只有数月，而且通常由于酪氨酸激酶突变伴有后续的多药耐药。高剂量索拉非尼带来的副作用也限制了该药使用。因此，亟需一种新的治疗手段克服索拉非尼的局限性。
技术实现思路
根据本公开的一些实施方式，提供了EPS8在制备治疗原发性肝细胞癌的药物中的用途。根据本公开的一些实施方式，提供了EPS8作为靶点在制备治疗原发性肝细胞癌的药物中的用途。根据本公开的一些实施方式，提供了靶向EPS8的试剂在制备治疗原发性肝细胞癌的药物中的用途。在一些实施方式中，所述的靶向EPS8的试剂是指能够在核酸水平或者在蛋白水平调节EPS8的表达水平或活性的试剂。在一些具体的实施方式中，靶向EPS8的试剂，能选择性识别并结合EPS8基因或其表达产物。在一些实施方式中，靶向EPS8的试剂，能够调节EPS8基因或其表达产物的水平或活性。在一些具体的实施方式中，靶向EPS8的试剂，能够降低EPS8基因或其表达产物的水平或活性。在一些具体的实施方式中，靶向EPS8的试剂能够敲除EPS8基因。在一些实施方案中，EPS8基因的表达产物是指EPS8基因在各阶段中的各种形式的分子，例如但不限于EPS8基因在扩增、复制、转录、剪接、加工、翻译、修饰过程中所产生的分子，例如cDNA、mRNA、前体蛋白、成熟的蛋白、及其片段。在一些实施方式中，靶向EPS8的试剂选自：核酸或多肽。在一些实施方式中，所述核酸选自DNA、RNA、DNA/RNA；多肽选自：抗体或其抗原结合片段。根据本公开的一些实施方式，提供了靶向试剂和多靶点激酶抑制剂的组合在制备药物中的用途，所述靶向试剂调节表皮生长因子受体激酶底物8蛋白家族(EPS8)。在一些实施方式中，所述的调节选自：抑制、降低、失活、敲除、降低、或其组合。因而，所述靶向试剂抑制、降低、失活、敲除或敲低EPS8的活性或水平。在一些实施方式中，所述水平是核酸水平。在一些实施方式中，所述水平是蛋白水平。在具体的实施方式中，靶向EPS8的试剂选自：敲除试剂、反义寡核苷酸、siRNA、dsRNA、核酶、核糖核酸内切酶III制备的小干扰RNA(esiRNA)或者短发夹RNA(shRNA)。在一些具体的实施方式中，所述敲除试剂是指现有技术中公知的那些，包括但不限于MariekeAarts编著的《基因敲除实验指南》(科学出版社中)中提到的那些方法或试剂。在一些具体的实施方式中，EPS8作为靶点是指将EPS8基因或其表达产物作为靶标(例如，通过敲除、敲低、RNA干扰)从而调节(降低)原发性肝细胞癌的细胞内EPS8基因或其表达产物的水平或活性。在一些实施方案中，EPS8选自：EPS8L1、EPS8L2、EPS8L3及其组合。在具体的实施方案中，是EPS8L3。在一些实施方案中，多靶点激酶抑制剂选自：索拉非尼、瑞格非尼、仑伐替尼、阿帕替尼、安罗替尼。在一些实施方案中，靶向试剂和多靶点激酶抑制剂组合制备药物用于预防或治疗原发性肝细胞癌。在具体的实施方案中，治疗晚期原发性肝细胞癌。根据本公开的一些实施方式，提供一种治疗组合物，其包含EPS8靶向试剂和多靶点激酶抑制剂。根据本公开的一些实施方式，提供表皮生长因子受体激酶底物8蛋白家族的鉴定试剂在制备诊断装置中的用途，其中所述诊断装置体现为试剂盒或芯片；所述诊断装置用于评价原发性肝细胞癌的预后。在一些实施方案中，鉴定试剂能够确定表皮生长因子受体激酶底物8蛋白家族的水平。在具体的实施方案中，所述水平是核酸水平或蛋白水平，优选RNA水平。在具体的实施方案中，当受试者中表皮生长因子受体激酶底物8蛋白家族的RNA水平高于对照水平，指示受试者中原发性肝细胞癌进展或恶化。在具体的实施方案中，当受试者中表皮生长因子受体激酶底物8蛋白家族的RNA水平高于对照水平，指示原发性肝细胞癌受试者的预后不良。在具体的实施方案中，当受试者中表皮生长因子受体激酶底物8蛋白家族的RNA水平高于对照水平，指示原发性肝细胞癌受试者的生存率降低。根据本公开的一些实施方式，提供表皮生长因子受体激酶底物8蛋白家族的靶向试剂在制备药物中的用途，其中所述靶向试本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.靶向试剂和多靶点激酶抑制剂的组合在制备药物中的用途，其中：/n所述靶向试剂调节表皮生长因子受体激酶底物8蛋白家族(EPS8)；/n优选地，所述靶向试剂选自：降低试剂、敲除试剂、反义寡核苷酸、siRNA、shRNA；/n所述的调节选自：抑制、降低、失活、敲除、降低、或其组合；/n优选，所述靶向试剂抑制、降低、失活、敲除或敲低EPS8的活性或水平；/n优选，所述水平是核酸水平或蛋白水平；/n所述EPS8选自：EPS8L1、EPS8L2、EPS8L3及其组合，优选EPS8L3；/n所述多靶点激酶抑制剂选自：索拉非尼、瑞格非尼、仑伐替尼、阿帕替尼、安罗替尼；/n所述药物用于预防或治疗原发性肝细胞癌，优选晚期原发性肝细胞癌。/n

【技术特征摘要】
1.靶向试剂和多靶点激酶抑制剂的组合在制备药物中的用途，其中：
所述靶向试剂调节表皮生长因子受体激酶底物8蛋白家族(EPS8)；
优选地，所述靶向试剂选自：降低试剂、敲除试剂、反义寡核苷酸、siRNA、shRNA；
所述的调节选自：抑制、降低、失活、敲除、降低、或其组合；
优选，所述靶向试剂抑制、降低、失活、敲除或敲低EPS8的活性或水平；
优选，所述水平是核酸水平或蛋白水平；
所述EPS8选自：EPS8L1、EPS8L2、EPS8L3及其组合，优选EPS8L3；
所述多靶点激酶抑制剂选自：索拉非尼、瑞格非尼、仑伐替尼、阿帕替尼、安罗替尼；
所述药物用于预防或治疗原发性肝细胞癌，优选晚期原发性肝细胞癌。


2.表皮生长因子受体激酶底物8蛋白家族的鉴定试剂在制备诊断装置中的用途，其中：
所述诊断装置体现为试剂盒或芯片；
所述诊断装置用于评价原发性肝细胞癌的预后；
所述表皮生长因子受体激酶底物8蛋白家族选自：EPS8L1、EPS8L2、EPS8L3及其组合，优选EPS8L3；
所述鉴定试剂是确定表皮生长因子受体激酶底物8蛋白家族的水平的试剂；
所述水平是核酸水平或蛋白水平；
所述核酸水平是DNA水平或RNA水平，优选RNA水平；
所述鉴定试剂选自：探针、引物、抗体或抗原结合片段；
优选地，受试者中表皮生长因子受体激酶底物8蛋白家族的RNA水平高于对照水平，指示受试者中原发性肝细胞癌进展或恶化；和/或
优选地，受试者中表皮生长因子受体激酶底物8蛋白家族的RNA水平高于对照水平，指示原发性肝细胞癌受试者的预后不良；和/或优选地，受试者中表皮生长因子受体激酶底物8蛋白家族的RNA水平高于对照水平，指示原发性肝细胞癌受试者的生存率降低。


3.表皮生长因子受体激酶底物8蛋白家族的靶向试剂在制备药物中的用途，其中：
所述靶向试剂调节表皮生长因子受体激酶底物8蛋白家族(EPS8)；
优选地，所述靶向试剂选自：敲低试剂、敲除试剂、反义寡核苷酸、...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈波，李晔雄，潘艳，许新，刘建香，
申请(专利权)人：中国医学科学院肿瘤医院，
类型：发明
国别省市：北京;11