一种海参肠肽及其制备方法和应用技术

本发明专利技术提供了一种海参肠肽及其制备方法和应用，所述海参肠肽的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。在本发明专利技术中，所述海参肠肽对乳腺癌和宫颈癌具有防治效果。

【技术实现步骤摘要】
一种海参肠肽及其制备方法和应用
本专利技术属于生物技术
，尤其涉及一种海参肠肽及其制备方法和应用。
技术介绍
海参肠卵中许多珍贵营养含量更高，如多糖、钒、核酸、精氨酸等，还含有极为丰富的性腺色素(β胡萝卜素、海胆紫酮、虾青素、玉米黄质、角黄素以及一些未知色素)、刺参脂质、刺参皂甙、硒、锌、铁等成分，具备较强的滋阴壮阳、改善消化系统微循环、增强心肌营养血液循环流量、抑制肿瘤细胞生长和扩散的功效。在现代生活环境的影响下，机体在环境污染、电脑辐射、自由基毒素、化学污染、遗传特性、内分泌失衡、免疫功能紊乱、致癌物质等一些致癌因素的作用下导致身体正常细胞发生癌变，目前治疗癌细胞的方法有很多，外科手术、放射治疗、化学药物治疗等，这些方法在治疗的同时也会把正常的细胞杀死，存在较强的不良反应。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种海参肠肽及其制备方法和应用，对乳腺癌和宫颈癌具有防治效果。为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供了以下技术方案：本专利技术提供了一种海参肠肽，所述海参肠肽的氨基酸序列如SEQIDNo.1所示。本专利技术还提供了上述技术方案所述的海参肠肽的制备方法，包括以下步骤：1)将海参肠与水混合，得到混合物，将所述混合物在50～55℃下处理50～70min，得到处理物；2)调节所述步骤1)得到的处理物的pH值为8.5，与碱性蛋白酶混合后在55～65℃下酶解2.5～3.5h，得到酶解物，调节所述酶解物的pH值为5，得到调节物；>3)将所述步骤2)得到的调节物灭酶，得到灭酶物，将所述灭酶物在55～60℃下经活性炭吸附50～70min，再依次过30000Da的陶瓷膜和1KD有机膜，干燥后，得到海参肠肽混合物；4)将所述步骤3)得到的海参肠肽混合物与水混合，得到混合液，将所述混合液经SephadexG-50层析柱分离纯化，收集保留时间为26.5min的组分，得到海参肠肽。优选的，所述步骤1)海参肠的质量与水的体积比为1000kg:2000L。优选的，所述步骤2)处理物与碱性蛋白酶的质量比为100:3。优选的，所述步骤1)水为无离子水。优选的，所述步骤4)分离纯化包括：流动相为体积百分含量为10％的甲醇溶液，流速为1ml/min。本专利技术还提供了上述技术方案所述的海参肠肽在制备抗肿瘤的药物中的应用。优选的，所述肿瘤包括乳腺癌和/或宫颈癌。本专利技术提供了一种海参肠肽，所述海参肠肽的氨基酸序列如SEQIDNo.1所示。在本专利技术中，所述海参肠肽对乳腺癌和宫颈癌具有防治效果。附图说明图1为海参肠肽(YQQPIIGGALF)液相色谱-QEXACTIVE质谱联用二级质谱图；图2为海参肠肽对于MCF-7细胞凋亡的作用；图3为海参肠肽对于Hela细胞凋亡的作用；图4为海参肠肽对斑马鱼人乳腺癌(MCF-7)移植瘤的抑制作用表型图；图5为海参肠肽对斑马鱼人乳腺癌(MCF-7)移植瘤的抑制作用(荧光强度值总和)，与模型对照组比较，***p<0.001；图6为海参肠肽对斑马鱼人乳腺癌(MCF-7)移植瘤，与模型对照组比较，***p<0.001。具体实施方式本专利技术提供了一种海参肠肽，所述海参肠肽的氨基酸序列如SEQIDNo.1所示，具体如下：YQQPIIGGALF。本专利技术还提供了上述技术方案所述的海参肠肽的制备方法，包括以下步骤：1)将海参肠与水混合，得到混合物，将所述混合物在50～55℃下处理50～70min，得到处理物；2)调节所述步骤1)得到的处理物的pH值为8.5，与碱性蛋白酶混合后在55～65℃下酶解2.5～3.5h，得到酶解物，调节所述酶解物的pH值为5，得到调节物；3)将所述步骤2)得到的调节物灭酶，得到灭酶物，将所述灭酶物在55～60℃下经活性炭吸附50～70min，再依次过30000Da的陶瓷膜和1KD有机膜，干燥后，得到海参肠肽混合物；4)将所述步骤3)得到的海参肠肽混合物与水混合，得到混合液，将所述混合液经SephadexG-50层析柱分离纯化，收集保留时间为26.5min的组分，得到海参肠肽。本专利技术将海参肠与水混合，得到混合物，将所述混合物在50～55℃下处理50～70min，得到处理物。在本专利技术中，所述海参肠的质量与水的体积比优选为1000kg:2000L。在本专利技术中，所述水优选为去离子水。本专利技术将所述混合物在50～55℃下处理50～70min，优选在50～55℃下处理60min。本专利技术调节得到的处理物的pH值为8.5，与碱性蛋白酶混合后在55～65℃下酶解2.5～3.5h，得到酶解物，调节所述酶解物的pH值为5，得到调节物。本专利技术优选使用1M的氢氧化钠溶液调节处理物的pH值。在本专利技术中，所述处理物与碱性蛋白酶的质量比优选为100:3。在本专利技术中，所述酶解的时间优选为3h，所述酶解的温度优选为60℃。本专利技术优选使用1M的盐酸溶液调节酶解物的pH值。本专利技术将得到的调节物灭酶，得到灭酶物，将所述灭酶物在55～60℃下经活性炭吸附50～70min，再依次过30000Da的陶瓷膜和1KD有机膜，干燥后，得到海参肠肽混合物。在本专利技术中，所述灭酶的温度优选为110℃，所述灭酶的时间优选为5min。在本专利技术中，所述干燥优选为喷雾干燥。本专利技术将得到的海参肠肽混合物与水混合，得到混合液，将所述混合液经SephadexG-50层析柱分离纯化，收集保留时间为26.5min的组分，得到海参肠肽。在本专利技术中，所述混合液中海参肠肽混合物的浓度优选为120mg/ml。在本专利技术中，所述SephadexG-50层析柱的规格为3×100cm。在本专利技术中，所述分离纯化的参数优选为：流动相为10％甲醇，流速为1ml/min，洗脱液214nm处测定吸光度。本专利技术还提供了上述技术方案所述的海参肠肽在制备抗肿瘤的药物中的应用。在本专利技术中，所述肿瘤优选包括乳腺癌和/或宫颈癌。本专利技术对所述药物的剂型没有特殊限定，采用海参肠肽在医学上可接受的剂型即可。下面结合实施例对本专利技术提供的技术方案进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本专利技术保护范围的限定。实施例1步骤一、海参肠肽的制备步骤一.取海参肠1000kg进行调浆，加入无离子水2000L，底物浓度为50％。步骤二.将步骤一的海参肠溶液搅拌均匀，并升温至55℃，保温1小时。步骤三.将步骤二的溶液用1MNaOH调pH至8.5，并升温至60℃。步骤四.将步骤三种的溶液加入3％的碱性蛋白酶(30Kg)，酶解3小时后加入1MHCl，调pH至5.0。步骤五.将步骤四中的溶液升温至110℃，保持5min。步骤六.将步骤五的灭酶溶液降温至55～60℃，加入活性炭，保温1小时后过30000Da陶瓷膜，然后过1Kd有机膜，喷雾干燥，得到海参肠肽混合物。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种海参肠肽，其特征在于，所述海参肠肽的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。/n

【技术特征摘要】
1.一种海参肠肽，其特征在于，所述海参肠肽的氨基酸序列如SEQIDNo.1所示。


2.权利要求1所述的海参肠肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)将海参肠与水混合，得到混合物，将所述混合物在50～55℃下处理50～70min，得到处理物；
2)调节所述步骤1)得到的处理物的pH值为8.5，与碱性蛋白酶混合后在55～65℃下酶解2.5～3.5h，得到酶解物，调节所述酶解物的pH值为5，得到调节物；
3)将所述步骤2)得到的调节物灭酶，得到灭酶物，将所述灭酶物在55～60℃下经活性炭吸附50～70min，再依次过30000Da的陶瓷膜和1KD有机膜，干燥后，得到海参肠肽混合物；
4)将所述步骤3)得到的海参肠肽混合物与水混合，得到混合液，将所述混合液经SephadexG-50层析柱分...

【专利技术属性】
技术研发人员：张九勋，张学军，田明展，张西平，魏玮，苏鹏，裴中立，
申请(专利权)人：中食都庆山东生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37