一种检测尿液中阿尔茨海默病相关神经丝蛋白的荧光免疫层析试纸的制备方法技术

本发明专利技术公开了检测尿液中阿尔茨海默病相关神经丝蛋白的荧光免疫层析试纸的制备方法，其包括，提纯AD7c‑NTP单克隆抗体1；制备单克隆抗体结合垫：将偶联AD7c‑NTP单克隆抗体1的荧光微球喷涂于聚酯膜上，制得单克隆抗体结合垫；制备硝酸纤维素包被膜：将AD7c‑NTP单克隆抗体2、标记抗体IgG喷涂在硝酸纤维素膜上分别作为检测带及质控带抗体；制备样品垫。本发明专利技术能够实现快速、单人份定量检测，且灵敏度高、误差小、检测限低，为临床使用提供了极大的便利。

【技术实现步骤摘要】
一种检测尿液中阿尔茨海默病相关神经丝蛋白的荧光免疫层析试纸的制备方法
本专利技术属于阿尔茨海默病免疫荧光层析试纸制备方法
，具体涉及一种检测尿液中阿尔茨海默病相关神经丝蛋白的荧光免疫层析试纸的制备方法。
技术介绍
阿尔茨海默症(Alzheimer'sdisease，AD，又叫老年性痴呆)是一种起病隐袭、进行性发展的慢性神经退行性疾病，是一种严重的智力致残症。随着人口老龄化的高速发展，AD已成为继心脏病、癌症、中风之后，导致老年人死亡的第四大病因，也是花费最多的三种疾病之一(仅次于肿瘤和心脏病)。病人从轻度记忆与认知障碍到最后的植物状态，要经历几年甚至几十年，这对病人和家属都是一个痛苦的过程。AD不是自然衰老，是疾病，早发现，早干预，早治疗，至关重要。阿尔茨海默症相关神经丝蛋白(AD-associatedneuronalthreadprotein，AD7C-NTP)是一种安全、有效的生物标记物，在AD诊断有着重要意义，具有广阔的应用前景。AD7C-NTP隶属于神经丝蛋白家族，是一种相对分子质量为41000的跨膜磷蛋白。AD7本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测尿液中阿尔茨海默病相关神经丝蛋白的荧光免疫层析试纸的制备方法，其特征在于：包括，/n提纯AD7c-NTP单克隆抗体1；/n制备单克隆抗体结合垫：将偶联AD7c-NTP单克隆抗体1的荧光微球喷涂于聚酯膜上，制得单克隆抗体结合垫；/n制备硝酸纤维素包被膜：将AD7c-NTP单克隆抗体2、标记抗体IgG喷涂在硝酸纤维素膜上分别作为检测带及质控带抗体；/n制备样品垫。/n

【技术特征摘要】
1.一种检测尿液中阿尔茨海默病相关神经丝蛋白的荧光免疫层析试纸的制备方法，其特征在于：包括，
提纯AD7c-NTP单克隆抗体1；
制备单克隆抗体结合垫：将偶联AD7c-NTP单克隆抗体1的荧光微球喷涂于聚酯膜上，制得单克隆抗体结合垫；
制备硝酸纤维素包被膜：将AD7c-NTP单克隆抗体2、标记抗体IgG喷涂在硝酸纤维素膜上分别作为检测带及质控带抗体；
制备样品垫。


2.如权利要求1所述的检测尿液中阿尔茨海默病相关神经丝蛋白的荧光免疫层析试纸的制备方法，其特征在于：所述提纯AD7c-NTP单克隆抗体1，为4℃条件下，用浓度为0.05mol/L，pH值为7.2～7.6的磷酸缓冲溶液对AD7c-NTP单克隆抗体1进行透析提纯处理；所述AD7c-NTP单克隆抗体1，选自商品化抗体ADJ700912。


3.如权利要求1或2所述的检测尿液中阿尔茨海默病相关神经丝蛋白的荧光免疫层析试纸的制备方法，其特征在于：所述荧光微球为包裹有荧光染料且表面修饰有氨基或羧基的聚苯乙烯球，其平均粒径为200nm。


4.如权利要求3所述的检测尿液中阿尔茨海默病相关神经丝蛋白的荧光免疫层析试纸的制备方法，其特征在于：所述制备单克隆抗体结合垫，其为，首先用浓度为0.05mol/L，pH值为7.4的MES冲溶液对荧光微球进行洗涤处理，并将荧光微球质量浓度调整为1％，然后用碳二亚胺和N-羟基琥珀亚酰胺共价偶联的方式将AD7c-NTP单克隆抗体1标记在所述荧光微球上；再使用定量喷膜仪以4μl/cm2的量将标记有AD7c-NTP单克隆抗体1喷涂于聚酯膜上，抗体与微球的质量比例1：20～80，避光条件下35～38...

【专利技术属性】
技术研发人员：蒋为，周衍，周彬，丁兆生，刘熙，林马明，陈啸，张嘉玮，
申请(专利权)人：江苏省荣军医院，无锡市江原实业技贸总公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32