一种评估子宫内膜容受性的试剂盒及其使用方法技术

本发明专利技术涉及一种评估子宫内膜容受性的试剂盒，包括阳性对照标准品、阴性对照标准品、第一缓冲物、过氧化物酶和碱性磷酸酶封闭剂、非特异蛋白阻断粉剂、第二缓冲物、第一抗原修复液、第二抗原修复液、抗体稀释液、一抗、二级级联检测物、第一显色液色元、第一显色液底物、第一显色液活化剂、第二显色液色元、第二显色液底物、复染液、分化液、返蓝液以及封片剂。能够稳定的、准确的在同一组织样本内实现多指标分析子宫内膜容受性，从而在同一张切片上可以得到更为丰富的信息。

【技术实现步骤摘要】
一种评估子宫内膜容受性的试剂盒及其使用方法
本专利技术涉及医学和生物学检测领域，具体涉及一种评估子宫内膜容受性的试剂盒及其使用方法。
技术介绍
目前，中国不孕症的发生率约在15-20％，而且不孕不育患者的数量每年以数十万的速度递增。婚育年龄的推迟、工作压力的堆积以及生活方式的改变等因素直接或间接地减低了人们的生育能力。随着世界上首例试管婴儿的降生，体外受精-胚胎移植(IVF-ET)已成为不孕女性尽快获得妊娠的有效途径。尽管辅助生殖技术的发展和技术革新，使得大部分不孕症患者已经能够通过胚胎体外培养技术获得优质胚胎进而妊娠，但是仍有一部分优质胚胎在妊娠早期甚至极早期发生丢失。研究表明，胚胎因素(包括胚胎移植方式)和子宫内膜容受性因素与胚胎成功种植存在着一定的相关性。但是，如何基于胚胎因素和子宫内膜容受性因素的情况，来判断患者行辅助生殖技术后，妊娠成功的可能性，从而辅助临床决策，进行适当的靶向干预，是提高目前辅助生殖成功率的有效途径。在胚胎因素方面，胚胎的移植策略与妊娠成功率的关系日益受到关注。胚胎玻璃化冷冻保存技术的成功应用有效地提高了冻胚本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种评估子宫内膜容受性的试剂盒，其特征在于，包括阳性对照标准品(11)、阴性对照标准品(12)、第一缓冲物(13)、过氧化物酶和碱性磷酸酶封闭剂(14)、非特异蛋白阻断粉剂(15)、第二缓冲物(16)、第一抗原修复液(17)、第二抗原修复液(18)、抗体稀释液(19)、一抗(20)、二级级联检测物、第一显色液色元(24)、第一显色液底物(25)、第一显色液活化剂(26)、第二显色液色元(27)、第二显色液底物(28)、复染液(29)、分化液(30)、返蓝液(31)、封片剂(32)。/n

【技术特征摘要】
1.一种评估子宫内膜容受性的试剂盒，其特征在于，包括阳性对照标准品(11)、阴性对照标准品(12)、第一缓冲物(13)、过氧化物酶和碱性磷酸酶封闭剂(14)、非特异蛋白阻断粉剂(15)、第二缓冲物(16)、第一抗原修复液(17)、第二抗原修复液(18)、抗体稀释液(19)、一抗(20)、二级级联检测物、第一显色液色元(24)、第一显色液底物(25)、第一显色液活化剂(26)、第二显色液色元(27)、第二显色液底物(28)、复染液(29)、分化液(30)、返蓝液(31)、封片剂(32)。


2.根据权利要求1所述一种评估子宫内膜容受性的试剂盒，其特征在于，所述第一缓冲物(13)为TBS片剂；所述非特异蛋白阻断粉剂(15)为牛血清白蛋白；所述第二缓冲物(16)为吐温-20；所述第一抗原修复液(17)包括枸橼酸盐；所述第二抗原修复液(18)包括EDTA；所述抗体稀释液(19)为IHC抗体稀释液；所述一抗(20)包括抗人杀伤性T细胞表面分子CD8的抗体、抗人自然杀伤细胞表面分子CD56的抗体、抗人自然杀伤细胞-T细胞表面分子CD57的抗体、抗人巨噬细胞表面分子CD68的抗体、抗人未成熟树突状细胞表面分子抗体CD1a的抗体、抗人成熟树突状细胞表面分子CD83的抗体、抗人M2巨噬细胞表面分子CD163和抗人调节性T细胞核转录因子Foxp3的抗体；所述二级级联检测物包括兔抗小鼠IgG抗体(21)、抗兔IgG-聚合物AP抗体(22)和抗兔IgG-聚合物HRP抗体(23)；所述第一显色液色元(24)为APRed显色液色原；所述第一显色液底物(25)为APRed显色液底物；所述第一显色液活化剂(26)为APRed活化剂：所述第二显色液(27)为DAB显色液色元；所述第二显色液底物(28)为DAB显色液底物；所述复染液(29)为苏木素体细胞染色液，所述分化液(30)为1％v/v盐酸酒精，所述返蓝液(31)为1％v/v氨水，所述封片剂(32)为中性树胶封片剂。


3.根据权利要求1所述一种评估子宫内膜容受性的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括盒体(1)以及设置于所述盒体(1)内的第一抽屉式隔层(2)、第二抽屉式隔层(3)和第三抽屉式隔层(4)，
所述第一抽屉式隔层(2)内设有第一泡沫垫(801)，所述第二抽屉式隔层(3)内设有第二泡沫垫(802)，所述第三抽屉式隔层(4)内设有第三泡沫垫(803)，
所述第一泡沫垫(801)开设分别放置所述第一缓冲物(13)、所述过氧化物酶和碱性磷酸酶封闭剂(14)、所述非特异蛋白阻断粉剂(15)、所述第二缓冲物(16)、所述第一抗原修复液(17)和所述第二抗原修复液(18)的凹槽，所述第一泡沫垫(801)还开设放置载玻片(9)、盖玻片(10)、所述阳性对照标准品(11)和所述阴性对照标准品(12)的腔体，
所述第二泡沫垫(802)上开设分别放置所述抗体稀释液(19)的凹槽，放置所述一抗(20)的凹槽和放置所述二级级联检测物的凹槽，
所述第三泡沫垫(803)开设分别放置所述第一显色液色元(24)、所述第一显色液底物(25)、所述第一染色液活化剂(26)、所述第二色元(27)、所述第二显色液底物(28)、所述复染液(29)、所述分化液(30)、所述返蓝液(31)及所述封片剂(32)的凹槽。


4.根据权利要求3所述一种评估子宫内膜容受性的试剂盒，其特征在于，放置所述一抗(20)的凹槽为8个，分别放置抗人杀伤性T细胞表面分子CD8的抗体、抗人自然杀伤细胞表面分子CD56的抗体、抗人自然杀伤细胞-T细胞表面分子CD57的抗体、抗人巨噬细胞表面分子CD68的抗体、抗人未成熟树突状细胞表面分子CD1a的抗体、抗人成熟树突状细胞表面分子CD83的抗体、抗人M2巨噬细胞表面分子CD163、抗人调节性T细胞核转录因子Foxp3的抗体；放置所述二级级联检测物的凹槽为3个，分别放置兔抗小鼠IgG抗体(21)、抗兔IgG-聚合物AP抗体(22)和抗兔IgG-聚合物HRP抗体(23)。


5.根据权利要求3所述一种评估子宫内膜容受性的试剂盒，其特征在于，所述第一抽屉式隔层(2)、所述第二抽屉式隔层(3)和所述第三抽屉式隔层(4)由上至下层叠设置，且后端均设置第一磁性锁扣(6)，所述盒体(1)分别对应所述第一磁性锁扣(6)设置第二磁性锁扣(5)，所述第一磁性锁扣(6)和所述第二磁性锁扣(5)通过磁性连接。


6.根据权利要求4所述一种评估子宫内膜容受性的试剂盒，其特征在于，所述第一抽屉式隔层(2)、所述第二抽屉式隔层(3)和所述第三抽屉式隔层(4)前端均设置把手(7)。


7.根据权利要求3所述一种评估子宫内膜容受性的试剂盒，其特征在于，还包括一份使用说明书。


8.一种如权利要求1-7任一项所述评估子宫内膜容受性的试剂盒的使用方法，包括如下步骤，
(1)工作液配制及石蜡切片的制备：第一缓冲液和第二缓冲液的制备：将所述第一缓冲物溶于超纯水中，得到第一缓冲液；将所述第一缓冲物和所述第二缓冲物溶于超纯水中，得到第二缓冲液；一抗稀释：分别取所述抗人杀伤性T细胞表面分子CD8的抗体、所述抗人自然杀伤细胞表面分子CD56的抗体、所述抗人自然杀伤细胞-T细胞表面分子CD57的抗体、所述抗人巨噬细胞表面分子CD68的抗体、所述抗人未成熟树突状细胞表面分子CD1a的抗体、所述抗人成熟树突状细胞表面分子CD83的抗体、所述抗人M2巨噬细胞表面分子CD163和所述抗人调节性T细胞核转录因子Foxp3的抗体，然后分别加所述抗体稀释液稀释100倍，得到一抗工作液；二级级联检测物稀释：取所述兔抗小鼠IgG抗体，加所述抗体稀释液稀释100倍，得到兔抗小鼠IgG抗体工作液；取所述抗兔IgG-聚合物HRP抗体，加所述抗体稀释液稀释100倍，得到抗兔IgG-聚合物HRP抗体工作液；取所述抗兔IgG-聚合物AP抗体，加所述抗体稀释液稀释100倍，得到抗兔IgG-聚合物AP抗体工作液；非特异蛋白阻断粉剂溶解：将所述非特异性蛋白阻断粉剂溶于所述第二缓冲液中，得到0.05g/ml的非特异性蛋白阻断剂工作液；第一显色液工作液制备：取1mL所述第一显色液底物，加入200uL所述第一显色液活化剂，混合均匀，随后加入10uL所述第一显色液色元，得到第一显色工作液；第二显色液工作液制备：取50uL所述第二显色液色元，加所述第二显色液底物稀释20倍，得到第二显色液工作液；将人体子宫内膜经福尔马林固定和石蜡包埋处理得到样品石蜡切片；
(2)石蜡切片脱蜡：样品石蜡切片、阳性对照标准品和阴性对照标准品各1个，先放入二甲苯...

【专利技术属性】
技术研发人员：刁梁辉，蔡松辰，黄春宇，李玉叶，李龙飞，余姝毅，陈聪，曾勇，
申请(专利权)人：深圳市锦欣医疗科技创新中心有限公司，深圳中山泌尿外科医院，
类型：发明
国别省市：广东;44