一种羧基微球偶联氨基的方法、致敏胶乳及试剂盒技术

本发明专利技术提供一种羧基微球偶联氨基的方法、致敏胶乳及试剂盒，属于医药试剂技术领域。该方法先将CDI溶液滴加到胶乳微球溶液，震荡混匀，得到活化的胶乳微球；向活化的胶乳微球中加入偶联缓冲液调节pH；将抗体加入到调节pH后的溶液中，震荡混匀，得到偶联后的溶液；将牛血清白蛋白母液加入到偶联后的溶液中，震荡混匀，得到致敏胶乳。本发明专利技术还提供上述制备方法得到的致敏胶乳。本发明专利技术还提供一种含上述致敏胶乳的试剂盒。本发明专利技术的方法偶联效率高、成本低，得到的试剂盒性能优异。

【技术实现步骤摘要】
一种羧基微球偶联氨基的方法、致敏胶乳及试剂盒
本专利技术属于医药试剂
，具体涉及一种羧基微球偶联氨基的方法、致敏胶乳及试剂盒。
技术介绍
体外诊断目前主要的方法有酶联免疫法、胶乳比浊法、化学发光法及分子诊断等方法。胶乳比浊法和化学发光法中涉及用到微球标记蛋白。微球标记蛋白(抗原或抗体或亲和素)的方法主要是吸附法和共价偶联法，目的是将待测物质相对应的抗体或抗原包被在微球上，通过待测物质与包被了相应抗原抗体的微球反应后的特性进行检测提高试验的敏感性。共价偶联法中常用的微球表面偶联有功能基团-羧基。胶乳增强免疫比法(Latexparticle-enhancedturbidimetricimmunoassay,LETIA)是一种较为稳定、准确的体液蛋白均相免疫比浊检测方法。其原理通过在高分子乳胶微球表面交联的单克隆抗体，当抗原与交联有抗体的微球结合后，能够在短时间内迅速聚集在一起，改变反应溶液的吸光度。而且，反应液吸光度的改变与被测抗原的浓度在一定范围内具有线性关系，可用来反映被测抗原的浓度。LETIA法需要采用物理或者化学的方法本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种羧基微球偶联氨基的方法，其特征在于，包括以下步骤：/n步骤一：将CDI溶液滴加到胶乳微球溶液，震荡混匀，10-37℃震荡活化20-30min，震荡速度为50-200rpm/min，得到活化的胶乳微球；/n步骤二：向步骤一的活化的胶乳微球中加入偶联缓冲液调节pH至7-9；/n步骤三：将抗体加入到调节pH后的溶液中，震荡混匀，10-37℃震荡偶联2-3h，震荡速度为50-200rpm/min，得到偶联后的溶液；/n步骤四：将牛血清白蛋白母液加入到偶联后的溶液中，震荡混匀，10-37℃震荡封闭1-2h，震荡速度为50-200rpm/min，然后将溶液清洗换液，得到致敏胶乳。/n

【技术特征摘要】
1.一种羧基微球偶联氨基的方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤一：将CDI溶液滴加到胶乳微球溶液，震荡混匀，10-37℃震荡活化20-30min，震荡速度为50-200rpm/min，得到活化的胶乳微球；
步骤二：向步骤一的活化的胶乳微球中加入偶联缓冲液调节pH至7-9；
步骤三：将抗体加入到调节pH后的溶液中，震荡混匀，10-37℃震荡偶联2-3h，震荡速度为50-200rpm/min，得到偶联后的溶液；
步骤四：将牛血清白蛋白母液加入到偶联后的溶液中，震荡混匀，10-37℃震荡封闭1-2h，震荡速度为50-200rpm/min，然后将溶液清洗换液，得到致敏胶乳。


2.根据权利要求1所述的一种羧基微球偶联氨基的方法，其特征在于，所述步骤一中CDI溶液是将CDI用pH6.0的50mM/L2-(N-吗啡啉)乙磺酸溶解后得到的，CDI的浓度为0.01g/mL。


3.根据权利要求1所述的一种羧基微球偶联氨基的方法，其特征在于，所述步骤一中胶乳微球溶液用pH6.0的50mM/L2-(N-吗啡啉)乙磺酸稀释后得到的，胶乳微球的浓度为1-3％w/v。


4.根据权利要求1所述的一种羧...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈凯丽，刘玲，徐李鹏，
申请(专利权)人：吉林基蛋生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：吉林;22