一种以巨噬细胞为载体的载药超声造影剂的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种以巨噬细胞为载体的载药超声造影剂的制备方法，包括：a、阳离子微泡的制备；b、载药阳离子微泡制备；c、载药阳离子氟碳液滴的制备；d、β‑glucan修饰载药阳离子氟碳液滴的制备；e、巨噬细胞超声诊疗剂的制备。本发明专利技术利用低温相变纳米液滴标记细胞可解决以往超声造影剂标记细胞稳定性差，寿命短，体内安全性低的缺陷。通过制备特异性靶向巨噬细胞的超声诊疗剂可解决以往超声造影剂细胞标记率低的限制。利用“特洛伊木马”效应可以靶向到目标区域，增加靶器官的成像效果及药物浓度，从而增加药物疗效，减少毒副作用。可应用于各种巨噬细胞参与的相关疾病。将超声成像与药物治疗相结合，实现诊疗一体化。

【技术实现步骤摘要】
一种以巨噬细胞为载体的载药超声造影剂的制备方法
本专利技术涉及超声造影与生物材料
，特别涉及一种以巨噬细胞为载体的载药超声造影剂的制备方法。
技术介绍
近年来，很多研究利用细胞的生物学功能，将活细胞作为生物载体用于疾病机制的研究及其诊断治疗。常用修饰后的干细胞及T细胞，联合光声、超声、MRI、CT等多种成像模态诊断疾病。在超声成像方面，有研究报道用介孔硅作为超声造影剂标记骨髓干细胞用于成像，但其存在生物降解性差的缺陷。也有用传统超声造影剂微泡(Microbubbles)标记细胞的，比如，申请号CN201610017740.5的专利公开了一种双靶向超声造影剂及其制备方法，造影剂是Integrinαvβ3/MCP-1双靶向微泡，双靶向微泡包括脂质外壳和气体内芯，脂质外壳的外表面连接有Integrinαvβ3单克隆抗体和MCP-1单克隆抗体。但由于微泡稳定性差，标记率较低，故成像效果不明显。目前，巨噬细胞超声成像的报道较少。巨噬细胞在免疫调节、器官发育及器官功能上有着重要作用，在各种疾病中发挥着调节作用。已有研究表明，巨噬细胞相关疾病发本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种以巨噬细胞为载体的载药超声造影剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：/n步骤a、阳离子微泡的制备：将二硬脂酰磷脂酰胆碱DSPC、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇DSPE-PEG2000、阳离子材料分别按照摩尔质量比0.75～0.85∶0.05～0.15∶0.05～0.2混合于有机溶剂，氮吹成膜，真空除去有机溶剂，超声水化，置换氟碳化合物，摇泡仪摇泡30s，离心洗涤，即得阳离子微泡；/n步骤b、载药阳离子微泡制备：在所述a步骤制备的阳离子微泡中，投入疏水性药物至有机溶剂中与磷脂混合均匀，其余操作一致，即得载药阳离子微泡；/n步骤c、载药阳离子氟碳液滴的制备：将上述b步骤中载药阳离子微泡...

【技术特征摘要】
1.一种以巨噬细胞为载体的载药超声造影剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤a、阳离子微泡的制备：将二硬脂酰磷脂酰胆碱DSPC、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇DSPE-PEG2000、阳离子材料分别按照摩尔质量比0.75～0.85∶0.05～0.15∶0.05～0.2混合于有机溶剂，氮吹成膜，真空除去有机溶剂，超声水化，置换氟碳化合物，摇泡仪摇泡30s，离心洗涤，即得阳离子微泡；
步骤b、载药阳离子微泡制备：在所述a步骤制备的阳离子微泡中，投入疏水性药物至有机溶剂中与磷脂混合均匀，其余操作一致，即得载药阳离子微泡；
步骤c、载药阳离子氟碳液滴的制备：将上述b步骤中载药阳离子微泡置于冰盐浴中混匀，使用20mL注射器25G针头进行加压操作，观察载药阳离子微泡变化，当出现一致性变化时表明载药阳离子氟碳液滴形成，拔出针头，在溶液上方保持一定压力，存放备用；
步骤d、β-glucan修饰载药阳离子氟碳液滴的制备：将上述c步骤中载药阳离子氟碳液滴与β-glucan混合，摇床孵育30～120min，离心洗涤，收集样品，即超声诊疗剂；
步骤e、巨噬细胞超声诊疗剂的制备：将上述d步骤中所得超声诊疗剂与巨噬细胞按照一定比例共孵育，PBS洗涤3遍，使用细胞刮刀刮取细胞，洗涤收集得到新型细胞超声诊疗剂。


2.根据权利要求1所述的一种以巨噬细胞为载体的载药超声造影剂的制备方法，其特征在于：所述步骤a中所述阳离子材料为阳离子脂质材料DOTAP、DODMA、DC胆固醇、DOPE任意一种，或者硬脂酸修饰的...

【专利技术属性】
技术研发人员：谢明星，吴雅，靳巧锋，张丽，陈逸寒，李慧玲，邓诚，高瑭，
申请(专利权)人：华中科技大学同济医学院附属协和医院，
类型：发明
国别省市：湖北;42