一种工程化外泌体在糖尿病足溃疡的皮肤再生修复中的应用及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种工程化外泌体在糖尿病足溃疡的皮肤再生修复中的应用及其制备方法，所述的工程化外泌体是应用外泌体作为基因载体、装载促进血管再生的基因，同时，应用干细胞来源的外泌体自身含有多种活性因子，促进创面抗感染和血管网络、神经的修复。本发明专利技术利用成体干细胞来源的外泌体替代因免疫原性、致瘤性原因导致临床使用严格的干细胞，且协同装载的活性分子的基因货物，具有多功能，治疗效果好的特性，可广泛应用于临床上皮肤创面缺损的修复，尤其是糖尿病足溃烂皮肤的再生修复。

【技术实现步骤摘要】
一种工程化外泌体在糖尿病足溃疡的皮肤再生修复中的应用及其制备方法
本专利技术属于生物医药和组织工程领域，具体涉及一种新型工程化外泌体在糖尿病足溃疡的皮肤再生修复中的应用及其制备方法。
技术介绍
外泌体是由多种类型细胞分泌的直径约为40-200nm的胞外囊泡，含有不同种类的microRNAs、蛋白质和脂质等具有生物学活性的物质，在不同细胞间进行信息传递,调节细胞间的信号传导，在创伤修复、炎症反应和肿瘤发生发展等许多生理和病理过程中发挥着重要的功能。干细胞是具有高度自我更新能力与多向分化潜能的干细胞,目前已应用于临床治疗多种疾病。但是直接采用干细胞进行临床治疗具有较大的免疫排斥的风险。因此，利用干细胞分泌的外泌体治疗疾病可以避免干细胞的免疫原性与致瘤性的风险。随着对外泌体的进一步深入研究，人们将目光从外泌体本身的功能转移至其优越的结构特性，具有磷脂双分子层结构的外泌体是一种天然的生物活性载体，与传统的药物基因载体相比，外泌体来源于细胞具有完美的生物相容性，并且能够逃避机体的免疫识别，从而将装载的货物高效地转运至功能细胞中。因此，将具本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种工程化外泌体在糖尿病足溃疡的皮肤再生修复中的应用，其特征在于：所述工程化外泌体是由用于促进血管再生的基因导入到外泌体中所获得。/n

【技术特征摘要】
1.一种工程化外泌体在糖尿病足溃疡的皮肤再生修复中的应用，其特征在于：所述工程化外泌体是由用于促进血管再生的基因导入到外泌体中所获得。


2.如权利要求1所述的工程化外泌体在糖尿病足溃疡的皮肤再生修复中的应用，其特征在于：
所述外泌体来源于成体干细胞，所述成体干细胞包括骨髓间充质干细胞、造血干细胞、脂肪干细胞。


3.如权利要求1或2所述的工程化外泌体在糖尿病足溃疡的皮肤再生修复中的应用，其特征在于：
所述促进血管再生的基因包括VEGF、FGF、angs、TGF-β、TNF。


4.一种如权利要求1-3任一项所述的应用中的工程化外泌体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、干细胞外泌体的提取：采用超高速离心法提取外泌体；
S2、干细胞外泌体的鉴定：将步骤S1中得到的干细胞外泌体采用透射电镜观察外泌体形貌、蛋白质免疫印迹对外泌体标志蛋白进行鉴定、纳米颗粒跟踪分析评估外泌体的粒径分布；
S3、促进血管再生的基因的导入：将促进血管再生的基因导入到步骤S2通过鉴定后的干细胞外泌体中。


5.如权利要求4所述的工程化外泌体的制备方法，其特征在于：
步骤S1包括：
S1.1：将3-5代干细胞生长至汇合度80％时，弃干细胞完全培养基，换为不含血清的培养基饥饿48h，收集饥饿后的培养基；
S1.2：将步骤S1.1所得的培养基于4℃，2000×g离心10min，弃沉淀，收集上清；
S1.3：将步骤S1.2所得的上清于4℃，10000×g离心1h，弃沉淀，收集上清；
S1.4：将步骤S1.3所得的上清用0.22μm真空过滤器过滤，收集滤液；
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【专利技术属性】
技术研发人员：王江林，查瑶，
申请(专利权)人：中怡深圳医疗科技集团有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44