MIR143HG作为抑制前列腺癌细胞增殖、侵袭与转移的用途制造技术

本发明专利技术公开了一种长链非编码RNA，所述长链非编码RNA为MIR143HG，所述的MIR143HG作为抑制前列腺癌细胞增殖、侵袭与转移的用途。本发明专利技术还公开了一种启动子区域能与DNMT1/DNMT3(a/b)结合的DLX2，所述的DLX2的si‑DLX2作为抑制前列腺癌细胞增殖、侵袭与转移的用途。本发明专利技术的MIR143HG在前列腺癌中通过招募DNA甲基转移酶DNMT1/DNMT3(a/b)到DLX2启动子区域，下调DLX2表达；另外，本发明专利技术的si‑DLX2通过沉默DLX2基因从而下调其表达。因此，本发明专利技术的MIR143HG和si‑DLX2都能起到抑制前列腺癌细胞增殖、侵袭与转移。且本发明专利技术所公开的内容为前列腺癌患者的治疗提供了一种有前景的临床应用和支持。

【技术实现步骤摘要】
MIR143HG作为抑制前列腺癌细胞增殖、侵袭与转移的用途
本专利技术涉及一种与前列腺癌相关的长链非编码RNA及其在前列腺癌中应用，具体所述的长链非编码RNA为MIR143HG，属于生物医药领域，具体属于分子生物学

技术介绍
现代全基因组分析的进展已经发现了大量在人类基因组中转录的长链非编码rna(lncRNA)，它是一种非蛋白编码RNA，长度为200到10000个核苷酸。长链非编码RNA不仅在正常发育过程中发挥重要作用，肿瘤发生过程中也受到其影响。如许多肿瘤的发生就是长链非编码RNA和环状RNA通过RNA-RNA竞争性相互作用导致。事实上，一系列研究报道了一些长链非编码RNA通过多种机制在前列腺癌的病理发展过程中起到作用。有文献报道，长链非编码RNAmiR143HG通过抑制肝细胞癌中丝裂原激活的蛋白激酶和Wnt信号通路，预测预后，抑制肿瘤增殖和转移。MicroRNAs(miRNAs)是一类重要的普遍存在的基因，涉及多种生物学功能，尤其是在癌症中。其中miRNA-143已被研究作为几种癌症的生物标志物(包括前列腺癌)。前列腺癌中MIR143HG通过调控HOXB7启动子甲基化影响恶性进展此外，它们可以被癌细胞分泌到生物液体中，这表明它们有潜在的诊断应用价值。因此，肿瘤发生的分子机制可为今后新的治疗方法提供基础信息。目前，研究者们发现在多种恶性肿瘤,如食道癌、结直肠癌、膀胱癌、乳腺癌、前列腺癌等中，miR-143为低表达状态。有文献表明，miR-143在前列腺癌等中低表达是因为PC-3、PC-3-m和LNCaP细胞中被反义寡核苷酸沉默。miR-143在前列腺癌转移中的作用通过伤口愈合和体外transwell检测以及体内生物发光成像来测定。生物信息学和荧光素酶报告分析被用来识别miR-143的靶点。Fan等人研究发现miR-143的下调在体外抑制了前列腺癌细胞的迁移和侵袭，在体内系统抑制了癌细胞的转移。而miR-143若在前列腺癌干细胞分化过程中表达上调，则会通过抑制FNDC3B表达促进前列腺癌转移。最新研究显示，miR-143可以通过靶向调节多种恶性肿瘤(如头颈部鳞状癌、肺癌、乳腺癌等)中的HK2(hexokinase2)基因而影响肿瘤细胞的生长、转移等；其还可通过调节PI3K/Akt和MAPK信号传导通路而影响膀胱癌增殖、凋亡等生物学行为。尽管研究者们通过高通量测序鉴定得到哦越来越多的长链非编码RNA(lncRNA)。miR143HG在膀胱癌组织(BCa)中的表达明显下调。miR143HG高表达与BCa患者的高生存率相关。功能增益分析显示，miR143HG过表达可抑制BCa细胞的增殖，抑制细胞周期的进展，减弱BCa细胞的迁移和侵袭。体内实验表明，miR143HG的异位表达抑制了BCa在体内的生长。研究表明，miR143HG表达在肝癌组织和细胞中显着下调；miR143HG通过抑制MAPK和Wnt信号通路在肝癌的发生和发展中起关键作用。此外，已显示在糖尿病患者的单核细胞中，MIR143HG(小鼠E33的人类同源物)的表达增加。使用逆转录定量聚合酶链反应，与相应的远端非肿瘤组织相比，进一步证实miR-143/145及其宿主基因MIR143HG在与HBV相关的HCC组织中被下调。miR-143和miR-145表达水平较低与肿瘤分化有关，因此可能会影响与HBV相关HCC患者的预后不良。研究表明，miR-143/145簇及其宿主基因MIR143HG在HBV相关的HCC组织中表达降低与预后相关，并且这些miRNA均可以作为预测HBV相关的HCC肿瘤发生的有价值的诊断生物标志物。
技术实现思路
为了研究与前列腺癌相关的长链非编码RNA在前列腺癌中的作用，从而筛选合适的可以作为抑制前列腺癌细胞增殖、侵袭与转移的用途的相关的长链非编码RNA。我们收集了前列腺癌组织及正常前列腺组织各47例，通过相关的技术手段，从中找到了可以作为抑制前列腺癌细胞增殖、侵袭与转移中的用途的MIR143HG。因此，本专利技术一方面提供了一种长链非编码RNA，所述长链非编码RNA为MIR143HG，所述的MIR143HG作为抑制前列腺癌细胞增殖、侵袭与转移的用途。优选地，本专利技术所述的MIR143HG的核苷酸序列如SEQIDNO：1所示。优选地，本专利技术所述的MIR143HG的靶基因为DLX2。优选地，本专利技术所述的MIR143HG招募DNA甲基转移酶到DLX2启动子区域。优选地，本专利技术所述的DNA甲基转移酶结合DLX2启动子区域，抑制DLX2的基因表达。优选地，本专利技术所述的DNA甲基转移酶为DNMT1/DNMT3(a/b)。另一方面，本专利技术还提供了一种启动子区域能与DNMT1/DNMT3(a/b)结合的DLX2，所述的DLX2的si-DLX2作为抑制前列腺癌细胞增殖、侵袭与转移的用途。优选地，本专利技术所述的si-DLX2的核苷酸序列如SEQIDNO：2所示。本专利技术的MIR143HG在前列腺癌中通过招募DNA甲基转移酶DNMT1/DNMT3(a/b)到DLX2启动子区域，影响DLX2表达，从而抑制前列腺癌细胞增殖、侵袭与转移。另外，本专利技术的si-DLX2通过沉默DLX2的表达，从而从而抑制前列腺癌细胞增殖、侵袭与转移。本专利技术所公开的内容为前列腺癌患者的治疗提供了一种有前景的临床应用和支持。附图说明其中*表示P<0.05，具有显著性差异。图1长链非编码RNAMIR143HG在前列腺癌中低表达(normal表示正常前列腺组织，tumor表示前列腺癌组织)。图1A：GSE3325芯片中MIR143HG在前列腺癌组织和正常前列腺组织的表达；图1B：GSE55945芯片中MIR143HG在前列腺癌组织和正常前列腺组织的表达；图1C：GEPIA数据库中MIR143HG在前列腺癌组织和正常前列腺组织的表达；图1D：qRT-PCR检测前列腺癌癌组织样本、正常前列腺组织样本中MIR143HG的表达情况；图1E：qRT-PCR检测前列腺癌细胞系和正常前列腺细胞中MIR143HG的表达情况；图1F：kaplan-meier分析生存曲线分析MIR143HG与前列腺癌的预后关系。图2过表达MIR143HG抑制前列腺癌细胞生长、增殖、转移，促进其凋亡(oe-NC组表示转染空载质粒对照组，oe-MIR143HG组表示转染MIR143HG高表达质粒组)。图2A：Edu增殖实验检测细胞增殖能力，其中oe-MIR143HG表示增殖的细胞，DAPI染细胞核，表示全部的活细胞，Merge表示EDU和DAPI重合的细胞；图2B：划痕实验检测细胞迁移能力；图2C：Transwell迁移实验检测细胞侵袭能力；图2D：WB检测增殖因子Ki67、PCNA的表达水平；图2E：WB检测干性相关因子CD133、CD44、Sox2、Nanog的表达水平；图2F：流式细胞术检测细胞凋亡能力。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种长链非编码RNA，所述长链非编码RNA为MIR143HG，其特征在于，所述的MIR143HG作为抑制前列腺癌细胞增殖、侵袭与转移的用途。/n

【技术特征摘要】
1.一种长链非编码RNA，所述长链非编码RNA为MIR143HG，其特征在于，所述的MIR143HG作为抑制前列腺癌细胞增殖、侵袭与转移的用途。


2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的MIR143HG的核苷酸序列如SEQIDNO：1所示。


3.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的MIR143HG的靶基因为DLX2。


4.根据权利要求3所述的用途，其特征在于，所述的MIR143HG招募DNA甲基转移酶到DLX2启动子区域。


5.根据权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：李丽丽，刘佳利，黄娅，
申请(专利权)人：湖南省科域生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：湖南;43