PGR作为治疗子宫内膜异位症的产品中的用途及其检测PGR的试剂盒制造技术

本发明专利技术公开了一种用于治疗子宫内膜异位症的蛋白标志物，具体的所述蛋白为PGR。本发明专利技术公开了PGR基因在制备在制备治疗子宫内膜异位症的产品中的用途。本发明专利技术同时公开了一种治疗子宫内膜异位症的药物组合物和一种评价PGR基因表达水平的试剂盒。本发明专利技术的药物组合物对子宫内膜异位症有较好的抑制作用，在子宫内膜异位症治疗中具有重要的参考和现实意义。本发明专利技术的试剂盒能够作为PGR基因表达水平的评价手段之一，对PGR作为药物组合物应用时具有较好的衡量和指导作用。

【技术实现步骤摘要】
PGR作为治疗子宫内膜异位症的产品中的用途及其检测PGR的试剂盒
本专利技术涉及一种与子宫内膜异位症相关的蛋白及其在子宫内膜异位症中的应用，所述的蛋白为PGR。属于生物医药领域，具体属于分子生物学

技术介绍
子宫内膜异位症(Endometriosissyndrome，EMS)一种常见妇科疾病，发病部位位于卵巢和腹膜。发病原因是由于输卵管将活性的内膜细胞种植在子宫内膜以外(如盆腔)的位置导致。在育龄女性中，EMS患病率约为10％-15％，在青春期前和绝经后基本不出现患者。子宫内膜异位症的主要病理变化为异位内膜周期性出血及其周围组织纤维化，形成异位结节。患者易出现痛经、慢性盆腔痛、月经异常和不孕等症状。子宫内膜异位症的病因较复杂，目前研究者们大多认为子宫内膜种植是患病的原因。此外，有文献报道子宫内膜异位症是恶性肿瘤的前兆，会显著增加卵巢癌的发病率。然而，子宫内膜异位症也可做到主动预防：如在适合年龄婚育、药物避孕、防止经血逆流、防止医源性子宫内膜异位症的发生。目前，子宫内膜异位症的治疗手段主要包括药物治疗和手术治疗，治疗药物可以采用镇痛药和激素类药物。然而，这些治疗通常伴随着较大的副作用，往往只能起到短期缓解的作用而不能根治。因此，需要开发新的治疗方法来改善子宫内膜异位症患者的预后。近年来，表观遗传特征在子宫内膜间质细胞(endometrialstromalcells，ESCs)中的治疗潜力引起了重要的关注，尤其是其与转录因子和信号通路的相互作用成为研究者们关注的重点。有文献报道，孕激素受体(progesteronereceptor，PGR)在子宫内膜异位症中可能有一定的作用，但具体的机制并不清楚。这说明孕激素受体在子宫内膜异位症进展中具有巨大的潜在意义。孕激素受体是一种配体依赖转录因子核受体，主要在女性生殖组织和中枢神经系统中表达，其有两种亚型PRA和PRB，也是女性生殖组织的主要调节因子。它的主要作用是通过与同源类固醇激素黄体酮结合，调节基因网络的表达，从而控制内分泌类癌症靶组织的发育、分化、增殖和病理过程。孕激素受体在内分泌依赖性乳腺癌中也起着重要的作用。在子宫内膜间质细胞中，局部TGF-β1信号可以通过抑制孕激素受体的表达来增强黄体酮的消退，并可能通过抑制DKK(WntantagonistDickkopf-1)来诱导wnt信号来协调与月经相关的组织重构。此外，在亚临床子宫内膜炎和临床子宫内膜炎中均观察到TGIF1(TGF-β-inducedfactor1)的表达发生显著改变，提示TGIF1在子宫内膜异位症发展中可能有重要的意义和作用。在子宫肌层细胞中，TGIF为一个潜在的TGF-β信号通路的抑制因子，其能够抑制TGF-β的表达。此外，TGIF1在亚临床子宫内膜炎和临床子宫内膜炎中的表达模式均有显著改变，说明了TGIF1在子宫内膜异位症的发展中可能有重要意义和作用。更重要的是，FBXW7(F-boxandWDrepeatdomaincontaining7)能够靶向TGIF1以调节TGF-β信号通路。FBXW7又称为Sel10、hCDC4或hAgo，以其抑癌作用和包括Notch在内的蛋白酶体介导的癌蛋白降解能力而闻名。FBXW7蛋白为F-box蛋白家族的成员，是SCFE3泛素连接酶(Skp1-Cullin1-F-box)复合物的重要组成部分之一，该复合物通过泛素-蛋白酶体系统促进多种癌蛋白的降解，进而介导细胞生长。值得注意的是，据报道子宫内膜活检中有FBXW7的突变，这表明FBXW7在作为预测子宫内膜癌发生中有重要的潜在应用价值。因此，我们推测孕激素受体可能通过与TGIF1和FBXW7的相互作用参与了子宫内膜异位症的发生和发展，另外，孕激素受体和/或FBXW7可能作为子宫内膜异位症的一个检测和/或治疗靶标。本专利技术通过体内和体外实验从分子机制和应用方面证实了这一推测。
技术实现思路
为了弥补现有技术的不足，本专利技术的目的之一在于提供一种蛋白标志物在筛选治疗子宫内膜异位症的候选药物中的应用；本专利技术的目的之二在于提供一种评价该蛋白表达水平的试剂盒。为了研究与子宫内膜异位症相关的蛋白在子宫内膜异位症中的作用，从而筛选合适的蛋白。我们通过生物信息学技术及现代分子生物学技术从子宫内膜异位综合症组织中找到了可以作为子宫内膜异位症标志物的PGR。因此，本专利技术一方面本专利技术根据PGR基因的用途，提供了一种PGR基因在制备治疗子宫内膜异位症的产品中的用途。优选地，本专利技术所述的PGR基因如SEQIDNO.1所示。优选地，本专利技术所述的PGR的靶基因为FBXW7。优选地，本专利技术所述的PGR抑制FBXW7基因的表达，从而抑制TGF-β信号通路的激活。再一方面，本专利技术提供了一种治疗子宫内膜异位症的药物组合物，所述药物组合物包括PGR基因。优选地，本专利技术所述的药物组合物为含有PGR基因的质粒。再一方面，本专利技术提供了一种试剂盒，所述试剂盒包括检测PGR基因表达水平的试剂。优选地，所述试剂为特异性扩增PGR基因的引物。优选地，所述特异性扩增PGR基因的引物序列如SEQIDNO.2和SEQIDNO.3所示。本专利技术通过生物信息学和现有分子生物学的技术手段，从子宫内膜异位症组织中筛选到用于子宫内膜异位症治疗的标志物PGR(PGR在子宫内膜异位症组织中低表达)。在此基础上，本专利技术一方面提供了一种PGR基因在制备治疗子宫内膜异位症的产品中的用途；再一方面，本专利技术还提供了一种基于PGR基因的用于治疗子宫内膜异位症的药物组合物；再一方面，本专利技术还提供了一种检测PGR基因表达水平的试剂盒。本专利技术的PGR基因及其药物组合物对子宫内膜异位症有较好的抑制作用，在子宫内膜异位症治疗中具有重要的参考和现实意义。另外，本专利技术提供的检测PGR基因的试剂盒在PGR作为药物组合物应用于子宫内膜异位症治疗时，对评价药物的持续作用时间和更准确的给药时间等提供了很好的帮助，对PGR作为药物组合物应用时具有较好的衡量和指导作用。附图说明其中*表示P<0.05，具有显著性差异。图1PGR在子宫内膜异位症中表达情况。图1A:qRT-PCR检测子宫内膜异位症临床组织PGRmRNA表达情况；图1B:WB检测子宫内膜异位症临床组织PGR蛋白表达情况(*表示与EM组相比，p<0.05。EM＝54，EME＝86)；图1C:HE染色EMS小鼠子宫内膜病理情况(×400)；图1D:WB检测EMS小鼠PGR蛋白表达情况。图2PGR调控TGF-β信号通路。图2A:WB检测子宫内膜异位症临床组织TGF-β信号通路相关蛋白表达情况(*表示与EM组相比，p<0.05。EM＝54，EME＝86)；图2B:WB检测在hESC中影响PGR后TGF-β信号通路相关蛋白表达情况；图2C:Transwell检测各组hESC侵袭能力(×200)；图2D:EDU检测各组hESC增殖能力(×200)；图2E:流式细胞术检测各组细胞凋亡能力。图3TGIF1竞争性结合smad2抑本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种蛋白，所述蛋白为PGR，其特征在于，PGR基因在制备治疗子宫内膜异位症的产品中的用途。/n

【技术特征摘要】
1.一种蛋白，所述蛋白为PGR，其特征在于，PGR基因在制备治疗子宫内膜异位症的产品中的用途。


2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的PGR基因如SEQIDNO.1所示。


3.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的PGR的靶基因为FBXW7。


4.根据权利要求3所述的用途，其特征在于，所述的PGR抑制FBXW7基因的表达，从而抑制TGF-β信号通路的激活。


5.一种治疗子宫内膜异位症的药物组合物，...

【专利技术属性】
技术研发人员：李丽丽，刘佳利，黄娅，
申请(专利权)人：湖南省科域生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：湖南;43