针对大环内酯类免疫抑制剂的血液检测方法技术

本发明专利技术提供简便并且/或者高精度地进行针对大环内酯类免疫抑制剂的血液检测的方法。具体而言，本发明专利技术提供针对大环内酯类免疫抑制剂的血液检测方法，其包含：(a)用酸或碱对包含大环内酯类免疫抑制剂或其代谢产物的血液样品进行处理，所述代谢产物具有大环内酯结构；和(b)使用抗体，对血液样品中的所述大环内酯类免疫抑制剂或所述代谢产物的浓度进行测定。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】针对大环内酯类免疫抑制剂的血液检测方法
本专利技术涉及针对大环内酯类免疫抑制剂的血液检测方法等。
技术介绍
例如他克莫司(FK506)、环孢菌素A等大环内酯类免疫抑制剂，对避免器官移植后的排异反应、自身免疫疾病的治疗等是有效的，但是为了将用于适当治疗的血液中药物浓度确保在适当的治疗浓度域内，在治疗期间中需要监测血液中药物浓度。给药的他克莫司和环孢菌素A的大部分，存在于患者血中红细胞成分。因此，作为治疗药物监测(TDM，TherapeuticDrugMonitoring)中的血液样品，使用包含红细胞成分的全血。然而，在全血等的血液样品包含针对药物的结合蛋白的情况下，为了对血液样品中的药物浓度进行测定，必须通过适当的预处理使血液样品中的药物从其结合蛋白解离。在这样的预处理中，通常而言，使用有机溶剂、变性剂、表面活性剂等化学物质。例如，作为记载这样的预处理的现有技术，可以举出以下技术。专利文献1中记载了两性离子表面活性剂和皂苷的使用。专利文献2中记载了包含非离子类表面活性剂(例如，皂苷)或辛基苯氧基聚乙氧基乙醇的溶血剂、和包含胆盐表面活性剂的提取剂的使用。专利文献3中记载了包含二甲基亚砜(DMSO)、二醇(例如，乙二醇)和锌盐类(例如，硫酸锌)的试剂的使用。专利文献4中记载了蛋白酶、二醇(例如，乙二醇)和醇(例如，甲醇)的使用。专利文献5中记载了包含二醇(例如，乙二醇)、醇(例如，甲醇)和盐(例如，氯化钠)的提取试剂样品的使用。专利文献6中记载了皂苷、甲醇、乙二醇和硫酸锌的使用。专利文献7中记载了溶血剂和表面活性剂[例如，离子性表面活性剂(例如，SDS)、非离子性表面活性剂(例如，TritonX-405)]的使用。专利文献8中记载了游离剂(例如，疏水性药物的类似体)、和选择性可溶剂(例如，乙二醇、甘油、1-甲氧基-2-丙醇、二甲基亚砜(DMSO)、二甲基砜或二甲基甲酰胺)的使用。专利文献9中记载了，作为包含二甲基亚砜(DMSO)、至少1种二价金属盐和水的提取试剂组合物，并且DMSO浓度为提取试剂组合物的50容量％以上的物质的使用。此外，许多这样的预处理中，为了使药物从其结合蛋白解离后，使药物与其结合性蛋白质分离，而需要进行蛋白质成分的沉淀操作(离心分离)。现有技术文献专利文献专利文献1：日本特表2008-538001号公报专利文献2：日本专利第5124467号专利文献3：日本专利第5134692号专利文献4：日本专利第5450092号专利文献5：日本专利第4968611号专利文献6：日本专利第5174898号专利文献7：日本专利第5690888号专利文献8：日本专利第4940438号专利文献9：日本专利第5134692号
技术实现思路
专利技术所解决的技术问题在如上所述的现有技术中，需要用特殊的物质对样品进行的预处理和沉淀操作，作为试验(Assay)而易于变得复杂，由此出发，存在试验难以简便化这样的问题。此外，在使用挥发性较高的有机溶剂的方法中，由于提取的各阶段、试验中的培养(incubation)期间发生有机溶剂的蒸发，因此，还存在药物的浓度的测定值表观上显示出较高的值、缺乏精确度这样的问题。因此，本专利技术的目的在于，提供可以简便和/或高精度地进行针对大环内酯类免疫抑制剂的血液检测的代替性方法。解决问题的技术手段本专利技术人等进行了深入研究，结果发现，在用抗体进行针对大环内酯类免疫抑制剂的血液检测的情况下，采用酸或碱进行的血液样品的预处理是有效的，并且通过这样的预处理可以解决所述问题，完成了本专利技术。即，本专利技术如下所述。[1]一种血液检测方法，其针对大环内酯类免疫抑制剂，并且包含：(a)用酸或碱对包含大环内酯类免疫抑制剂或其代谢产物的血液样品进行处理，所述代谢产物具有大环内酯结构；和(b)使用抗体，对血液样品中的所述大环内酯类免疫抑制剂或所述代谢产物的浓度进行测定。[2]根据[1]的方法，其中，大环内酯类免疫抑制剂为他克莫司、环孢菌素A或依维莫司。[3]根据[1]或[2]的方法，其中，血液样品为人血液样品。[4]根据[1]～[3]中的任一项的方法，其中，所述血液样品的处理为采用酸进行的处理。[5]根据[4]的方法，其中，所述采用酸进行的处理通过将所述血液样品与酸性缓冲液混合来进行。[6]根据[5]的方法，其中，酸性缓冲液的pH为1.0～5.0。[7]根据[1]～[6]中的任一项的方法，其中，针对免疫抑制剂的抗体为IgG、IgM或它们的抗体片段。[8]根据[1]～[7]中的任一项的方法，其包含：(a’)用酸或碱对包含所述大环内酯类免疫抑制剂或所述代谢产物的血液样品进行处理，制备酸性血液样品或碱性血液样品；和(b’)使用抗体，对所述酸性血液样品或所述碱性血液样品中的所述大环内酯类免疫抑制剂或所述代谢产物的浓度进行测定。[9]根据[1]～[7]中的任一项的方法，其包含：(a”)用酸或碱对包含所述大环内酯类免疫抑制剂或所述代谢产物的血液样品进行处理而制备酸性血液样品或碱性血液样品后，进行中和，制备中性血液样品；和(b”)使用抗体，对所述中性血液样品中的所述大环内酯类免疫抑制剂或所述代谢产物的浓度进行测定。[10]根据[9]的方法，其中，所述中和通过使包含离液变性剂的中和液与所述酸性血液样品或碱性血液样品混合而进行。[11]一种血液检测试剂，其针对大环内酯类免疫抑制剂，并且包含：(1)酸或碱；和(2)1种以上的针对大环内酯类免疫抑制剂或其代谢产物的抗体，所述代谢产物具有大环内酯结构。[12]根据[11]的试剂，其中，酸为酸性缓冲液。[13]根据[11]或[12]的试剂，其进一步包含(3)中和液。专利技术效果本专利技术可以良好地进行针对大环内酯类免疫抑制剂的血液检测。例如，本专利技术能够实现简便且高精度、并且处理能力高的检测。更具体而言，如果根据本专利技术，则能够通过包含大环内酯类免疫抑制剂及其代谢产物的血液样品的酸性化(例如，血液样品和酸性缓冲液的混合)或碱性化(例如，血液样品和碱性缓冲液的混合)这样的简便的操作(预处理)，用抗体顺利地测定酸性血液样品中或碱性血液样品中的大环内酯类免疫抑制剂及其代谢产物的浓度。由此，能够避免与个人的技术熟练度对应的测定值的变动，并且能够改善检测的处理能力(高通量)。此外，如果根据本专利技术，则由于有机溶剂的使用不是必须的，因此能够避免有机溶剂的蒸发引起的浓缩，能够高精度地测定大环内酯类免疫抑制剂及其代谢产物的浓度。附图说明[图1-1]图1-1是表示各种pH条件下的从他克莫司结合蛋白解离的他克莫司的免疫测定的图。固相抗体本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种血液检测方法，其针对大环内酯类免疫抑制剂，并且包含：/n(a)用酸或碱对包含大环内酯类免疫抑制剂或其代谢产物的血液样品进行处理，所述代谢产物具有大环内酯结构；和/n(b)使用抗体，对血液样品中的所述大环内酯类免疫抑制剂或所述代谢产物的浓度进行测定。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20171225 JP 2017-2482971.一种血液检测方法，其针对大环内酯类免疫抑制剂，并且包含：
(a)用酸或碱对包含大环内酯类免疫抑制剂或其代谢产物的血液样品进行处理，所述代谢产物具有大环内酯结构；和
(b)使用抗体，对血液样品中的所述大环内酯类免疫抑制剂或所述代谢产物的浓度进行测定。


2.根据权利要求1所述的方法，其中，
大环内酯类免疫抑制剂为他克莫司、环孢菌素A或依维莫司。


3.根据权利要求1或2所述的方法，其中，
血液样品为人血液样品。


4.根据权利要求1～3中的任一项所述的方法，其中，
所述血液样品的处理为采用酸进行的处理。


5.根据权利要求4所述的方法，其中，
所述采用酸进行的处理，通过将所述血液样品与酸性缓冲液混合来进行。


6.根据权利要求5所述的方法，其中，
酸性缓冲液的pH为1.0～5.0。


7.根据权利要求1～6中的任一项所述的方法，其中，
针对免疫抑制剂的抗体为IgG、IgM或它们的抗体片段。


8.根据权利要求1～7中的任一项所述的...

【专利技术属性】
技术研发人员：豊永将也，堀田佳之，
申请(专利权)人：富士瑞必欧株式会社，
类型：发明
国别省市：日本;JP