一种二穗短柄草遗传转化方法技术

本发明专利技术提供一种二穗短柄草遗传转化方法，至少包括如下步骤：1)利用诱导培养基，对二穗短柄草的未成熟胚进行愈伤诱导，获得愈伤组织，并进行继代培养；2)将继代培养后的愈伤组织与农杆菌进行共培养，利用侵染液使农杆菌侵染愈伤组织；3)利用筛选培养基，对共培养后的愈伤组织进行筛选，获得长势良好且并未褐化的愈伤组织；4)利用再生培养基，将步骤3）获得的愈伤组织进行培养，直到分化出芽，获得二穗短柄草幼苗。与现有的二穗短柄草转化体系相比，本发明专利技术可使愈伤诱导率提高到85.4%以上，提高了转基因植株再生率。本发明专利技术建立的高效农杆菌遗传转化体系为探究二穗短柄草基因功能提供一定的技术指导，为禾本科作物基因改良提供依据。

【技术实现步骤摘要】
一种二穗短柄草遗传转化方法
本专利技术属于生物
，涉及一种二穗短柄草遗传转化方法。
技术介绍
二穗短柄草(BrachypodiumdistachyonL.)是一种新型的禾本科模式植物，是早熟禾亚科中唯一完成全基因组测序的植物。其生物学特性具备一系列优点，如基因组较小、生长条件简单、自花授粉、生长周期短、植株株型小、生态型多样、易转化、高结实率，具有自育性和二倍体自交系等。以上优点促使其成为温带禾本科植物功能基因组学研究的理想模式材料。二穗短柄草要充分发挥其作为模式植物的潜力，就必须对其遗传转化效率进行优化及改造。然而对二穗短柄草进行遗传转化的前提是建立植物的高效再生体系。现有的二穗短柄草(Bd21)再生体系存在诱导率低、易污染、分化过程难等问题，严重阻碍了人们对二穗短柄草基因功能的研究。
技术实现思路
为了克服现有技术中所存在的问题，本专利技术的目的在于提供一种二穗短柄草遗传转化方法。为了实现上述目的以及其他相关目的，本专利技术采用如下技术方案：本专利技术提供一种二穗短柄草遗传转化方法，至少包括本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种二穗短柄草遗传转化方法，至少包括如下步骤：/n1)利用诱导培养基，对二穗短柄草的未成熟胚进行愈伤诱导，获得愈伤组织，并进行继代培养；/n2)将继代培养后的愈伤组织与农杆菌进行共培养，利用侵染液使农杆菌侵染愈伤组织；/n3)利用筛选培养基，对共培养后的愈伤组织进行筛选，获得长势良好且并未褐化的愈伤组织；/n4)利用再生培养基，将步骤3)获得的愈伤组织进行培养，直到分化出芽，获得二穗短柄草幼苗。/n

【技术特征摘要】
1.一种二穗短柄草遗传转化方法，至少包括如下步骤：
1)利用诱导培养基，对二穗短柄草的未成熟胚进行愈伤诱导，获得愈伤组织，并进行继代培养；
2)将继代培养后的愈伤组织与农杆菌进行共培养，利用侵染液使农杆菌侵染愈伤组织；
3)利用筛选培养基，对共培养后的愈伤组织进行筛选，获得长势良好且并未褐化的愈伤组织；
4)利用再生培养基，将步骤3)获得的愈伤组织进行培养，直到分化出芽，获得二穗短柄草幼苗。


2.如权利要求1所述的二穗短柄草遗传转化方法，其特征在于，步骤1)中，所述诱导培养基中含有2,4-二氯苯氧乙酸。


3.如权利要求2所述的二穗短柄草遗传转化方法，其特征在于，以所述诱导培养基的总量为基准计，2,4-二氯苯氧乙酸的初始浓度为2.0mg/L-3.0mg/L。


4.如权利要求1所述的二穗短柄草遗传转化方法，其特征在于，还包括以下特征中的一项或多项：
a.步骤2)中，农杆菌侵染浓度OD600为0.6；
b.步骤2)中，农杆菌侵染时间为5min；
c.步骤2)中，侵染...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈慧泽，牛娇，杜美婷，韩榕，刘维仲，
申请(专利权)人：山西师范大学，
类型：发明
国别省市：山西;14