高效催化L-苏氨酸合成2,5-DMP的质粒及其构建与应用制造技术

本发明专利技术公开了一种高效催化L‑苏氨酸合成2,5‑DMP的质粒及其构建与应用，属于基因工程技术领域。本发明专利技术构建了包含不同微生物来源L‑苏氨酸脱氢酶(TDH)的重组pRSFDuet‑tdh

【技术实现步骤摘要】
高效催化L-苏氨酸合成2,5-DMP的质粒及其构建与应用
本专利技术涉及一种高效催化L-苏氨酸合成2,5-DMP的质粒及其构建与应用，属于基因工程

技术介绍
2,5-二甲基吡嗪(2,5-DMP)是一种重要的香味化合物和药物中间体，呈刺鼻的炒花生香气和巧克力、奶油气味。其存在于咖啡、花生等50多种天然食品中。作为食品香料时，只添加1-2ppm，就可起到明显的增香作用，是国标GB2760-86规定为允许使用的香精。同时，2,5-DMP还是合成第二代磺脲类降血糖药格列吡嗪、新一代长效降血脂药阿昔莫司(Acipimox)u以及治疗结核病的有效药物5-甲基吡嗪-2-羧酸甲酯(PAE)等一系列药物的原料或药物中间体。其本身也具有潜在的抑制子宫收缩效果，小鼠实验研究表明其可能可以用于防止宫缩导致的子宫破裂和胎儿窒息。相比常用β2受体兴奋剂和钙拮抗剂类药物所可能导致的严重副作用如低血压和心脏加速或延缓，2,5-DMP将是很好的潜在替代物。因此，摸索新的2,5-DMP经济高效的生产方法无疑是非常重要的。2,5-DMP的生产方法主要有化学合成法，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种高效催化L-苏氨酸合成2,5-DMP的质粒，其特征在于，所述的质粒是以pRSFDuet-1为表达载体，在pRSFDuet-1的多克隆位点插入来源于大肠埃希氏菌属的苏氨酸脱氢酶(TDH)和来源于乳球菌属的NADH氧化酶(NoxE)组合而成的融合蛋白基因。/n

【技术特征摘要】
1.一种高效催化L-苏氨酸合成2,5-DMP的质粒，其特征在于，所述的质粒是以pRSFDuet-1为表达载体，在pRSFDuet-1的多克隆位点插入来源于大肠埃希氏菌属的苏氨酸脱氢酶(TDH)和来源于乳球菌属的NADH氧化酶(NoxE)组合而成的融合蛋白基因。


2.根据权利要求1所述的质粒，其特征在于，所述的苏氨酸脱氢酶为以下任一：
(1)氨基酸序列如SEQIDNO.1所示；
(2)具有苏氨酸脱氢酶活性的同工酶。


3.根据权利要求1所述的质粒，其特征在于，所述的NADH氧化酶为以下任一：
(1)氨基酸序列如SEQIDNO.2所示；
(2)具有NADH氧化酶活性的同工酶。


4.根据权利要求1所述的质粒，其特征在于，所述的苏氨酸脱氢酶的碳端与NADH氧化酶的氮端之间包括柔性蛋白linker。


5.根据权利要求4所述的质粒，其特征在于，所述的柔性蛋白linker的氨基酸序列如SEQIDNO.3所示。


6....

【专利技术属性】
技术研发人员：徐建中，于海波，张伟国，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32