青霉素G酰化酶突变体及其在酶法合成头孢孟多中的应用制造技术

技术编号:25173114 阅读:66 留言:0更新日期:2020-08-07 21:04
本发明专利技术涉及青霉素G酰化酶突变体及其在酶法合成头孢孟多中的应用。通过半理性设计的酶工程改造技术对木糖氧化无色杆菌(Achromobacter xylosoxidans)PX02来源的青霉素G酰化酶进行突变,获得了一种反应活性更高,反应速率更快,转化率更好的PGA突变体。该PGA突变体对产物的水解活性大大降低,在产率达到最大值后,几乎不水解产物,具有广阔的工业应用前景。

【技术实现步骤摘要】
青霉素G酰化酶突变体及其在酶法合成头孢孟多中的应用
本专利技术属于生物制药
,具体涉及一种木糖氧化无色杆菌来源青霉素G酰化酶突变体及在酶法合成头孢孟多中的应用。
技术介绍
β-内酰胺类抗生素如头孢孟多属第二代头孢菌素高效医用药,杀菌力强,抗菌谱广其作用机制是通过抑制细菌的乙酰转肽酶而干扰细胞壁肽聚糖的合成,使细菌变成丝状或球状,最后溶解,对多种革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均具有很强的杀灭作用。临床上主要用于治疗敏感细菌所致的呼吸道感染、胆道感染、腹腔感染、盆腔感染、尿路感染、皮肤软组织感染、骨和关节感染以及败血症等。目前,国内企业已用化学法实现了大多数头孢类原料药的国产化,但酶法生产半合成头孢类抗生素尚未大规模产业化。与传统的化学法合成相比,酶法合成β-内酰胺类抗生素具有反应步骤少,废弃物产生少,有利于环境保护,生产成本降低,产品杂质少、易分离且质量优异等诸多优点。因此,β-内酰胺抗生素的酶法合成是21世纪β-内酰胺抗生素发展的趋势之一。青霉素G酰化酶(penicillinGacylase,EC3.5.1.11)又称为青霉素本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种青霉素G酰化酶突变体,其特征在于,将SEQ ID NO:2所示青霉素G酰化酶氨基酸序列的第186位、187位、329位氨基酸残基中的一个或多个突变为另一种氨基酸残基,获取所述突变体。/n

【技术特征摘要】
1.一种青霉素G酰化酶突变体,其特征在于,将SEQIDNO:2所示青霉素G酰化酶氨基酸序列的第186位、187位、329位氨基酸残基中的一个或多个突变为另一种氨基酸残基,获取所述突变体。


2.根据权利要求1所述的青霉素G酰化酶突变体,其特征在于,所述第186位精氨酸突变为丙氨酸、天冬氨酸或赖氨酸,优选丙氨酸。


3.根据权利要求1所述的青霉素G酰化酶突变体,其特征在于,所述第187位苯丙氨酸突变为异亮氨酸或缬氨酸,优选异亮氨酸。


4.根据权利要求1所述的青霉素G酰化酶突变体,其特征在于,所述第329位苯丙氨酸突变为丙氨酸、甘氨酸、异亮氨酸、缬氨酸或丝氨酸;优选甘氨酸。


5.根据权利要求1所述的青霉素G酰化酶突变体,其特征在于,所述突变体为R186A/F187I、R186A/F329G、...

【专利技术属性】
技术研发人员:何冰芳李安妮储建林吴斌汲晓琪彭智熠
申请(专利权)人:南京工业大学
类型:发明
国别省市:江苏;32

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