一种抑制实体肿瘤细胞生长转移的方法以及专用的药物组合物技术

本发明专利技术公开了一种抑制实体肿瘤细胞生长转移的方法以及专用的药物组合物，属于动物细胞增殖转化领域。本发明专利技术在诱导卵巢癌HEY细胞或乳腺癌MDA‑MB‑231细胞时，培养基在高浓度CoCl

【技术实现步骤摘要】
一种抑制实体肿瘤细胞生长转移的方法以及专用的药物组合物
本专利技术涉及动物细胞的增殖转化，具体是一种抑制实体肿瘤细胞生长转移的方法以及专用的药物组合物。
技术介绍
肿瘤是一种全身系统性疾病，是人类发病率和死亡率最高的疾病。目前，对于肿瘤的预防和治疗的主要方法包括：外科手术，放、化疗。与手术治疗及放射治疗相比，药物治疗属于全身效应的疗法，传统化疗药物不仅杀伤肿瘤细胞，对正常的机体细胞也有杀伤作用，其毒性和耐药性是不容忽视的问题。此外，化疗药物还能诱导肿瘤细胞侵袭和转移的能力增强，肿瘤细胞对化疗药物的耐受能力增强，最终导致肿瘤的复发和转移。肿瘤细胞最显著的生物学特性是无限制增殖和不良分化，一般认为肿瘤的发生与分化异常有关，所以诱导肿瘤细胞良性分化成为肿瘤治疗的一个新领域。在分化诱导剂的作用下，去分化的肿瘤细胞也可被诱导向良性细胞分化，其生物学特性与正常细胞接近，甚至转变成正常细胞，这种现象称为重分化或再分化。采用这一策略进行恶性肿瘤的治疗称为诱导分化治疗。肿瘤诱导分化的基本特点是不杀伤肿瘤细胞，而是诱导肿瘤细胞分化为正常或接近正常细胞，即在一些化学制剂的作用下，有的肿瘤细胞出现类似正常细胞的表型，恢复了正常细胞的某些功能。体外诱导间充质干细胞脂肪分化的经典方法为鸡尾酒诱导法(Classiccocktails)已被广泛报道，鸡尾酒组合包括基本培养基：DMEM基础培养基，10％胎牛血清，1％双抗，1μM/L地塞米松，0.5mM/LIBMX，200μM/L吲哚美欣，10μM/mL胰岛素。成人脂肪间充质干细胞成脂诱导分化培养基(HUXMD-90031)中的基本成分包括：基础培养基，胎牛血清，谷氨酰胺，双抗，胰岛素，IBMX，罗格列酮，地塞米松，可用于脂肪间充质干细胞的成脂诱导分化。正常的肿瘤组织中存在具有多向分化潜能的肿瘤干细胞，在体外培养环境下，用高浓度氯化钴(450nM)处理普通肿瘤细胞获得高侵袭转移能力的细胞，该细胞是具有多向分化潜能的肿瘤干细胞，具有被诱导分化为良性细胞的潜能。目前，实体瘤诱导分化的研究工作尚处应用阶段，应用某些化学物质可使不成熟的恶性细胞逆转，向正常细胞方向分化。地塞米松(DexamethasoneSynonyms:BRL49653)是糖皮质类激素，临床主要用于抗炎、抗毒、抗过敏、抗风湿，能抑制外周组织对葡萄糖的摄取和利用。高浓度的糖皮质激素抑制胰岛素与其受体结合，并损伤外周组织胰岛素受体的葡萄糖转运系统，导致胰岛素抵抗，地塞米松的浓度不一样，与诱导分化的分化率与分化时间快慢有关系。已有文献报道，地塞米松通过抑制CREB磷酸化逆转cAMP诱导的胶质细胞分化。此外，使用降糖药罗格列酮联合MEK抑制剂曲米替尼，可以使乳腺癌细胞分化成脂肪细胞，降低了肿瘤的侵袭性，抑制了肿瘤转移。罗格列酮，属于属噻唑烷二酮类胰岛素增敏剂，是特异性过氧化物酶体增殖因子激活剂的γ型受体(PPARγ)的配体。PPARγ的激活是脂肪分化过程的关键步骤。3-异丁基-1-甲基黄嘌呤(3-isobutyl-1-methylxanthine，IBMX)，是一种广谱的磷酸二酯酶抑制剂，抑制磷酸二酯酶对环磷酸腺苷的降解，环磷酸腺苷在细胞内的堆积启动脂肪分化，IBMX还可以增强胰岛素的释放，在肝细胞和脂肪细胞中，它们增加糖原分解和脂肪分解。二甲基亚砜(dimethylsulfoxide；DMSO)用于医药及中间体合成反应溶剂，医药溶剂及药物的载体等，使用该溶剂能提高化学应速度，提高反应物收率。
技术实现思路
本专利技术就是为力解决将恶性肿瘤细胞诱导分化为正常细胞的问题，而提供一种抑制实体肿瘤细胞生长转移的方法以及专用的药物组合物(DRI)。本专利技术是按照以下技术方案实现的。一种用于抑制实体肿瘤细胞生长转移的药物组合物，该药物组合物是在二甲基亚砜内按以下浓度的原料药组合而成：地塞米松，0.0001-0.001μg/ml罗格列酮，0.001-0.005μg/ml3-异丁基-1-甲基黄嘌呤0.08-0.15μg/ml。所述用于抑制实体肿瘤细胞生长转移的药物组合物，该药物组合物是在二甲基亚砜内按以下浓度的原料药组合而成：地塞米松0.0003-0.0008μg/ml罗格列酮0.002-0.004μg/ml3-异丁基-1-甲基黄嘌呤0.1-0.13μg/ml。所述用于抑制实体肿瘤细胞生长转移的药物组合物，该药物组合物是在二甲基亚砜内按以下浓度的原料药组合而成：地塞米松0.00039μg/ml罗格列酮0.00357μg/ml3-异丁基-1-甲基黄嘌呤0.11μg/ml。一种抑制实体肿瘤细胞生长转移的方法，其步骤为：①诱导卵巢癌细胞系HEY时，使用RPMI-1640培养基5mL+535.5μLCoCl2作用48h后更换RPMI-1640培养基，细胞恢复10-14天后，其融合度80％-90％时，反复处理2次,获得足够数量的高侵袭转移能力细胞；②所得高侵袭转移能力的卵巢癌HEY细胞再经不含CoCl2的RPMI-1640培养基培养，至融合度达60％时，在移除的培养基中加入二甲基亚砜内含有地塞米松0.0001-0.001μg/ml、罗格列酮0.001-0.005μg/ml、3-异丁基-1-甲基黄嘌呤0.08-0.15μg/ml的药物组合物，进行体外诱导，待肿瘤细胞浆中有明显脂滴形成，获得脂肪分化的肿瘤细胞。所述抑制实体肿瘤细胞生长转移的方法，其步骤为：①诱导乳腺癌细胞系MDA-MB-231细胞时，使用DMEM培养基5mL+535.5μLCoCl2；作用33h后更换DMEM培养基；②所得高侵袭转移能力的腺癌MDA-MB-2311细胞，再经不含CoCl2的DMEM培养基培养。这样设计的本专利技术，通过对卵巢癌细胞系HEY细胞或乳腺癌细胞系MDA-MB-231细胞在体外培养环境下，用氯化钴处理并在小分子化合物的药物组合物环境里，进行肿瘤细胞诱导体外分化为脂肪细胞，并经动物体内实验证实。可用于恶性肿瘤细胞的体内外诱导分化治疗，并抑制高度恶性实体肿瘤的生长和转移。具有用于人实体肿瘤临床治疗的前景，且该小分子化合物的药物组合物对人体的毒副作用较小，治疗后不会引起机体的耐受。附图说明图1是HEY细胞脂肪分化培养基诱导分化前后(×200)的细胞形态图；图2是MDA-MB-231细胞脂肪分化培养基诱导分化前后的细胞形态图；图3是蛋白质免疫印迹检测HEY细胞和MDA-MB-231细胞中的表达；图4是HEY细胞系中4组裸鼠移植瘤组织大体形态和生长曲线图；图5是HEY细胞系中4组细胞裸鼠移植瘤模型图；图6是H&E染色小鼠移植瘤组织中肿瘤细胞形态(×400)图；图7是免疫组化染色检测小鼠移植瘤组织中FABP4、vimentin的表达情况(×400)；图8是蛋白免疫印迹实验检测HEY细胞系中动物移植瘤组织中相关蛋白表达；图9是HEY小本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于抑制实体肿瘤细胞生长转移的药物组合物，其特征在于：该药物组合物是在二甲基亚砜内按以下浓度的原料药组合而成：/n地塞米松， 0.0001-0.001μg/ml/n罗格列酮， 0.001-0.005μg/ml/n3-异丁基-1-甲基黄嘌呤 0.08-0.15μg/ml。/n

【技术特征摘要】
1.一种用于抑制实体肿瘤细胞生长转移的药物组合物，其特征在于：该药物组合物是在二甲基亚砜内按以下浓度的原料药组合而成：
地塞米松，0.0001-0.001μg/ml
罗格列酮，0.001-0.005μg/ml
3-异丁基-1-甲基黄嘌呤0.08-0.15μg/ml。


2.根据权利要求1所述用于抑制实体肿瘤细胞生长转移的药物组合物，其特征在于：该药物组合物是在二甲基亚砜内按以下浓度的原料药组合而成：
地塞米松0.0003-0.0008μg/ml
罗格列酮0.002-0.004μg/ml
3-异丁基-1-甲基黄嘌呤0.1-0.13μg/ml。


3.根据权利要求1所述用于抑制实体肿瘤细胞生长转移的药物组合物，其特征在于：该药物组合物是在二甲基亚砜内按以下浓度的原料药组合而成：
地塞米松0.00039μg/ml
罗格列酮0.00357μg/ml
3-异丁基-1-甲基黄嘌呤0.11μg/ml。


4.一种抑制实体肿瘤细胞生长转移的方法，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：张诗武，张可昕，李玉玮，
申请(专利权)人：天津市人民医院，
类型：发明
国别省市：天津;12