阿西替尼及其类似物在制备血脑屏障渗透性调控剂中的应用制造技术

本发明专利技术涉及阿西替尼及其类似物在制备血脑屏障渗透性调控剂中的应用。所述血脑屏障渗透性调控剂能够降低血脑屏障渗透性，促进血脑屏障功能由病理性破坏状态恢复至接近生理性屏障状态。阿西替尼及其类似物通过抑制血管内皮细胞生长因子‑磷脂酰肌醇激酶‑蛋白激酶B信号通路，减少病理性血脑屏障紧密连接蛋白Claudin‑5/Occludin下调的程度，降低血脑屏障渗透性。所述血脑屏障渗透性调控剂能够用于引起血脑屏障渗透性改变的相关疾病的治疗。

【技术实现步骤摘要】
阿西替尼及其类似物在制备血脑屏障渗透性调控剂中的应用
本专利技术属于制药领域，涉及阿西替尼及其类似物的新的治疗用途，尤其涉及阿西替尼及其类似物在制备血脑屏障渗透性调控剂中的应用。该血脑屏障渗透性调控剂能够用于治疗引起血脑屏障渗透性改变的相关疾病。
技术介绍
血脑屏障是保护、维持中枢神经系统功能的特殊系统，主要由脑微血管内皮细胞、内皮细胞之间的紧密连接、基膜以及毛细血管周围的胶质细胞足突构成，其中内皮细胞及其紧密连接是血脑屏障的重要形态学基础。大部分的大分子物质和超过98％小分子药物都不能渗漏通过血脑屏障，只有少部分分子量小于500Da的营养物质可以被动扩散或者选择性跨过血脑屏障以维持中枢神经系统的生理平衡。血脑屏障完整性缺失是脑部疾病发生、发展过程中的一个显著的病理学特性。脑毛细血管内皮细胞及细胞间表达的紧密连接构成血脑屏障的低渗和高电阻特性。其中，Claudin-5、Occludin等是构成紧密连接的关键蛋白，在维持血脑屏障完整性特性中扮演重要的角色。血脑屏障结构病理性破坏主要是指其紧密连接结构完整性缺失及屏障功能异常，伴随着紧密连接蛋白下调表达、血脑屏障渗透性增加、中枢神经系统内环境平衡被破坏，是许多中枢神经系统疾病突出的病理性特征，包括脑胶质瘤、帕金森氏病、脑缺血、阿尔兹海默症、多发性硬化等。阿西替尼(Axitinib)是由美国Pfizer公司研发的一种多靶点酪氨酸激酶抑制剂，可阻断血管内皮细胞生长因子受体(VEGFR)的自磷酸化作用、血管内皮生长因子(VEGF)调节内皮细胞的活力、微管形成及下游信号。该药于2012年1月27日获美国FDA批准上市，商品名为Inlyta。该药为片剂，主要用于治疗对药物没有应答的晚期肾癌。阿西替尼的中文化学名称为：N-甲基-2-((2-((1E)-2-(吡啶-2-基)乙烯)-1H-吲哚-6-基)硫)苯甲酰胺；英文化学名称：N-methyl-2-((3-((1E)-2-(pyridine-2-yl)ethenyl)-1H-indazol-6-yl)sulfanyl)benzamide；分子式：C22H18N4OS；分子量：386.47；CAS登记号：319460-85-0。阿西替尼类似物主要是指作用机制与阿西替尼类似，能作用于血管内皮生长因子-磷脂酰肌醇激酶-蛋白激酶B(VEGF-PI3K-AKT)信号通路的抑制剂，包括但不限于VEGF、PI3K、AKT等3个位点的抑制剂，如磷脂酰肌醇激酶(PI3K)位点抑制剂LY294002。近年来研究发现阿西替尼具有治疗非小细胞肺癌、白血病的作用，此外，还发现了阿西替尼可通过促进白色脂肪细胞褐色化抵抗高脂饲料诱导的肥胖和胰岛素不敏感症状，同时具有治疗脂肪肝的作用。但是，阿西替尼及其类似物具有调控血脑屏障渗透性的作用尚未报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供阿西替尼及其类似物在制备血脑屏障渗透性调控剂中的应用。本专利技术的专利技术人经过深入的研究发现，阿西替尼及其类似物对血脑屏障渗透性具有调控作用，其能够降低血脑屏障渗透性，促进血脑屏障功能由病理性破坏状态恢复至接近生理性屏障状态，从而实现针对引起血脑屏障渗透性改变的相关疾病的治疗，本专利技术正是基于上述发现而完成的专利技术。具体而言，本专利技术涉及以下
技术实现思路
。1.阿西替尼及其类似物在制备血脑屏障渗透性调控剂中的应用。2.如上述1所述的应用，其特征在于，上述血脑屏障渗透性调控剂能够降低血脑屏障渗透性，促进血脑屏障功能由病理性破坏状态恢复至接近生理性屏障状态。3.如上述1或2所述的应用，其特征在于，阿西替尼及其类似物通过减少病理性血脑屏障紧密连接蛋白Claudin-5/Occludin下调的程度，降低血脑屏障渗透性。4.如上述1或2所述的应用，其特征在于，阿西替尼及其类似物通过抑制血管内皮细胞生长因子-磷脂酰肌醇激酶-蛋白激酶B信号通路，减少病理性血脑屏障紧密连接蛋白Claudin-5/Occludin下调的程度，降低血脑屏障渗透性。5.如上述1或2所述的应用，其特征在于，所述阿西替尼类似物是能够在血管内皮生长因子-磷脂酰肌醇激酶-蛋白激酶B信号通路中对血管内皮生长因子、磷脂酰肌醇激酶或蛋白激酶B的任意位点发挥抑制作用的抑制剂。6.如上述5所述的应用，其特征在于，所述阿西替尼类似物是磷脂酰肌醇激酶抑制剂。7.如上述1或2所述的应用，其特征在于，上述血脑屏障渗透性调控剂是用于治疗引起血脑屏障渗透性改变的相关疾病的药物。专利技术的效果本专利技术涉及的血脑屏障渗透性调控剂，通过阿西替尼及其类似物对血脑屏障渗透性的调控作用，能够降低血脑屏障渗透性，促进血脑屏障功能由病理性破坏状态恢复至接近生理性屏障状态，从而达到对引起血脑屏障渗透性改变的相关疾病的治疗作用，具有显著优越的技术效果。附图说明图1：体外生理性血脑屏障和病理性血脑屏障跨膜电阻值测定。脑微血管内皮细胞bEnd.3的Transwell模型模拟生理性血脑屏障，脑微血管内皮细胞bEnd.3和脑胶质瘤细胞U87MG共孵育的Transwell模型模拟病理性血脑屏障，图中所示结果为细胞电阻仪检测的生理性血脑屏障和病理性血脑屏障细胞跨膜电阻值(n＝5)。图2：体外FITC-右旋糖酐跨生理性血脑屏障和病理性血脑屏障转运效率。选用分子量为10kDa的FITC-右旋糖酐评价血脑屏障的渗透性，将FITC-右旋糖酐的HBSS溶液加于Transwell小室，作用4小时，图中所示结果为荧光分光光度计检测的Transwell外室FITC-右旋糖酐浓度(n＝3)。图3：体外生理性血脑屏障和病理性血脑屏障紧密连接蛋白Claudin-5/Occludin表达。脑微血管内皮细胞bEnd.3的Transwell模型模拟生理性血脑屏障，脑微血管内皮细胞bEnd.3和脑胶质瘤细胞U87MG共孵育的Transwell模型模拟病理性血脑屏障。对Transwell小室膜上的bEnd.3细胞进行免疫荧光染色，图A所示为共聚焦观察紧密连接蛋白Claudin-5/Occludin表达结果，图B是ImageJ对Claudin-5/Occludin表达的荧光半定量分析结果(n＝3)。图4：体内FITC-右旋糖酐于生理性血脑屏障和病理性血脑屏障渗透性评价。模型动物尾静脉注射FITC-右旋糖酐溶液，4小时后，心脏灌流获取正常脑组织和荷瘤脑组织，冠状面冰冻切片厚度为5微米，CD31(红色)特异性标记脑组织血管，图中所示为激光共聚焦显微镜观察FITC-右旋糖酐(绿色)在血管的渗漏结果。图5：组织水平透射电镜观察生理性血脑屏障和病理性血脑屏障紧密连接结构。心脏灌流取模型动物正常脑组织和荷瘤脑组织，图中所示为透射电镜观察正常脑组织切片血脑屏障紧密连接结构(左图)及荷瘤脑组织切片血脑屏障紧密连接结构(右图)。图6：体内生理性血脑屏障和病理性血脑屏障紧密连接蛋白Claudin-5/Occludin表达。心脏灌流取模型动物正常脑组织和荷瘤脑组织，冠状面冰冻切片厚度为5微米，对脑组织紧密连接蛋白Cl本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.阿西替尼及其类似物在制备血脑屏障渗透性调控剂中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.阿西替尼及其类似物在制备血脑屏障渗透性调控剂中的应用。


2.如权利要求1所述的应用，其特征在于：
所述血脑屏障渗透性调控剂能够降低血脑屏障渗透性，促进血脑屏障功能由病理性破坏状态恢复至接近生理性屏障状态。


3.如权利要求1或2所述的应用，其特征在于：
阿西替尼及其类似物通过减少病理性血脑屏障紧密连接蛋白Claudin-5/Occludin下调的程度，降低血脑屏障渗透性。


4.如权利要求1或2所述的应用，其特征在于：
阿西替尼及其类似物通过抑制血管内皮细胞生长因子-磷脂酰肌醇激酶-蛋白激酶B信号通路...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡富强，温丽娟，袁弘，王凯，孟廷廷，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：浙江;33