一种多血型系统自动检测卡及检测方法技术方案

本发明专利技术涉及一种多血型系统自动检测卡及检测方法，由上而下包括加样层、反应层、显色层、识别层四部分，在加样层上开设加样孔，反应层上设有全血垫或从全血中过滤红细胞的过滤垫，加样孔的底部与全血垫或过滤垫相连，全血垫的末端与若干个预包被血型抗体的抗体垫相连，过滤垫的末端通过延时垫与预包被血型抗原的抗原垫相连；反应层单独设置质控条带；显色层上设有若干个与抗体垫或抗原垫末端相连的显色区；识别层反向与显色层相连。本发明专利技术将血型检测与编码技术结合，可快速检测多种血型，实现多种血型自动识别，减少人工判断误差，提高检测效率，无需专用设备，实现血型快速、准确自动化便携式检测。

【技术实现步骤摘要】
一种多血型系统自动检测卡及检测方法
本专利技术属于临床检验体外诊断
，涉及一种多血型系统自动检测卡及检测方法。
技术介绍
血型是指血液成分表面抗原的类型，通常是指红细胞(RBC)膜上特异性抗原的分型。已经发现并为国际输血协会承认的血型系统超过35种，与其中人类输血关系最密切的是ABO血型系统和Rh血型系统，另有MNS、Kell等系统也与某些疾病息息相关。血型鉴定是指对血液成分中细胞表面抗原进行鉴定的技术，其主要用于临床输血、器官移植、新生儿溶血症等时。准确的血型鉴定至关重要，因血型错配或急救时采用异型输血极易导致输血性溶血反应的发生，造成溶血性贫血、肾衰竭、休克以至死亡。目前临床用血时常用血型鉴定方法为血清法，包括传统的玻片法、纸片法、试管法，后续发展起来的卡式微柱凝胶法。其通过判断红细胞凝集进行血型鉴定，其原理为检测受检者血液中RBC表面抗原以及血浆中的特异性抗体，若RBC表面存在相应抗原，即可与相应的抗体试剂发生凝集反应；同理，若受检者血浆中存在特异性抗体，则可与试剂红细胞发生凝集反应。目前临床使用最为广泛的为试管法和卡式微柱凝胶法，其优点是其结果准确，检测灵敏度、特异性好，但其耗时较长，大量的样本也加重临床工作负担，增加差错风险发生率，为紧急条件下临床用血带来严重挑战。同时，现有血型大多需借助于实验室专用仪器进行检测，且常用血型定型试剂需保存于4℃条件下，室温条件下难以长期保存，给室外血型检测带来极大不便。再者，受试剂及检测条件限制，仪器、试剂成本较高，为经济较落后地区血型检测带来困难，阻碍基层整体医疗水平提高，同时增加患者经济负担。随着生物技术发展，便携式血型检测卡得到迅速发展。中国专利CN101603967B公开了一种快速检测人ABO/Rh/MN血型的方法及试剂盒。通过预先包被固定了抗A或抗B或抗D或抗M或抗N血型抗体的测试条上，在用冲洗液洗脱后，观察是否加样垫上是否有凝集的红细胞残留来判断被测血样的血型。该检测卡易携带，检测速度快，但仅检测ABO正定型，若出现ABO正反定型不符，容易导致检测错误。中国专利CN103389384B公开了一种Miltenberger血型抗体检测免疫荧光层析试纸条及其检测方法，以荧光定量检测Miltenberger血型，但荧光检测往往需配备大型专业的仪器，在实际推广应用中受限，不适用于资源稀少及经济欠发达地区。中国专利CN107167616B提供了一种血型检测方法和装置，利用多个反应腔包被不同抗体后，待测血液与抗体进行免疫反应后采集图像，将彩色图像转为灰度图像，通过灰度值判断血型结果；虽然为自动化检测提供一定支持，但是不同的两个彩色可能出现接近的灰度值，导致检测结果误差，提高检测假阴性率和假阳性率；同时，不能鉴别是否是血液样本；所有上述方法大多检测血型系统中的单一血型或某几种抗原，无法对常见血型(如Rh血型、MNS血型等)进行自动同步检测；常规技术检测时间较长，需额外配置专用设备，无通用型检测方式，自动化检测未能完全实现，难以满足紧急情况下及经济落后地区的使用，极大限制了其应用价值。因此，快速、准确、便携式通用型的自动血型检测技术及方法可为抢救危急病人，应对突发事件提供保障，为提升资源稀缺地区医疗卫生保健助力。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种多血型系统自动检测卡及检测方法，将血型检测与条形码、二维码技术结合，无需大型专用仪器，可快速检测多种血型，实现多种血型自动识别，减少人工判断误差，提高检测效率，实现血型快速、准确自动化便携式检测。为达到上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种多血型系统自动检测卡，由上而下包括加样层、反应层、显色层、识别层四部分，在加样层上开设加样孔，反应层上设有全血垫或从全血中过滤红细胞的过滤垫，加样孔的底部与全血垫或过滤垫相连，所述全血垫的末端与若干个预包被血型抗体的抗体垫相连，所述过滤垫的末端通过延时垫与预包被血型抗原的抗原垫相连；反应层单独设置质控条带；显色层上设有若干个与抗体垫或抗原垫末端相连的显色区；所述识别层反向与显色层相连，包括二维码定位区、校准区、检测区、受检者信息区，所述的检测区与显色区的位置一一对应。优选的，所述检测卡的结构为三维或二维，采用试纸串联、折纸技术、蜡打印、光敏印章、光刻蚀或三维(3D)打印中任一种方法加工得到。优选的，所述加样层与反应层分开设置或者合为一体。优选的，所述加样层的材质优选为玻璃纤维、棉浆纸、餐巾纸、滤纸、纱布或水凝胶等，加样孔可为圆形或方形的任意形状，其加样孔采用蜡打印、光刻蚀技术等使加样层形成亲水与疏水区域。优选的，所述全血垫、抗体垫、延时垫和抗原垫的材质为孔径8μm～20μm的无纺布、无纺纸、滤纸、棉浆纸或玻璃纤维。优选的，所述过滤垫的材质选自普鲁士蓝膜、玻璃纤维、石墨烯布、碳布、碳纸、全血分离膜或硝酸纤维膜。优选的，所述抗体垫预包被商品化的ABO、Rh、MNS、Kell、P、Kidd、Duffy血型抗体，可采用IgM、IgG、IgM-IgG混合抗体，其包被固定方式可为﹣80℃冷冻干燥后固定、等离子处理、共价键偶联、20～50℃真空干燥、免疫磁珠结合或静电吸附。优选的，所述质控条带包括与抗体垫位置对应的质控区域，质控区域包被PBS或生理盐水试剂，30～50℃干燥；其余顺序与包被试剂与其他条带一致。优选的，所述延时垫用于调控抗体检测反应时间，采用化学方式或物理方式实现延时，化学方式为预包被糖类(蔗糖、葡聚糖、果胶等)、石蜡或烷基烯酮二聚体，物理方式为改变延时垫的形状或增加长度、宽度。其预包被固定方式为﹣80℃冷冻干燥后固定、30～50℃真空干燥。优选的，所述抗原垫预包被ABO血型抗原，包括A1、A2、B、O型红细胞，其包被固定方式为﹣80℃冷冻干燥后固定、4-30℃真空干燥、免疫磁珠结合或静电吸附；或者直接加入新鲜红细胞作为抗原。A1、A2、B、O型红细胞可为商品化试剂。优选的，所述显色层的材质选自硝酸纤维素膜、醋酸纤维素膜、聚酯纤维素膜等。所述显色方式为颜色变化或灰度值变化，显色区域为正方形、长方形或圆形的任意形状，预包被试剂可为纳米粒子或染料；所述纳米粒子包括乳胶微粒、金纳米粒子、银纳米粒子等，染料包括双缩脲试剂、甲基绿、吡罗红、溴代麝香草酚蓝溶液、茚三酮等。优选的，所述观察区的形状为正方形、长方形、三角形、菱形或圆形的任意形状。优选的，所述识别层的材质选自打印纸、棉纸或吸墨纸，通过蜡打印、激光打印或光敏印章法呈现定位区、校准区、受检者信息区；所述定位区用于自动检测中自动定位、纠偏，其图案可为内圆外方、外圆内方、同心圆、内外皆方；所述校准区用于颜色校准，预防外部环境及拍摄仪器的干扰，其可为5～18个色块组成，其颜色以RGB表示，可为(0,0,0)至(255，255,255)间的任意组合；所述受检者信息区用于受检者信息登记与存储，为可为二维码、三维码或条形码，二维码、三维码的种类选自DataMatrix、MaxiCode、Aztec或QRCode，条形码的种类选自E本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种多血型系统检测卡，其特征在于，由上而下包括加样层、反应层、显色层、识别层四部分，在加样层上开设加样孔，反应层上设有全血垫或从全血中过滤红细胞的过滤垫，加样孔的底部与全血垫或过滤垫相连，所述全血垫的末端与若干个预包被血型抗体的抗体垫相连，所述过滤垫的末端通过延时垫与预包被血型抗原的抗原垫相连；反应层单独设置质控条带；显色层上设有若干个与抗体垫或抗原垫末端相连的显色区；所述识别层反向与显色层相连，包括二维码定位区、校准区、检测区、受检者信息区，所述的检测区与显色区的位置一一对应。/n

【技术特征摘要】
1.一种多血型系统检测卡，其特征在于，由上而下包括加样层、反应层、显色层、识别层四部分，在加样层上开设加样孔，反应层上设有全血垫或从全血中过滤红细胞的过滤垫，加样孔的底部与全血垫或过滤垫相连，所述全血垫的末端与若干个预包被血型抗体的抗体垫相连，所述过滤垫的末端通过延时垫与预包被血型抗原的抗原垫相连；反应层单独设置质控条带；显色层上设有若干个与抗体垫或抗原垫末端相连的显色区；所述识别层反向与显色层相连，包括二维码定位区、校准区、检测区、受检者信息区，所述的检测区与显色区的位置一一对应。


2.根据权利要求1所述的检测卡，其特征在于，所述检测卡的结构为三维或二维，采用试纸串联、折纸技术、蜡打印、光敏印章、光刻蚀或三维打印中任一种方法加工得到。


3.根据权利要求1所述的检测卡，其特征在于，所述加样层的材质为玻璃纤维、棉浆纸、餐巾纸、滤纸、纱布或水凝胶等，加样孔可为圆形或方形的任意形状，其加样孔采用蜡打印、光刻蚀技术使加样层形成亲水与疏水区域；所述全血垫、抗体垫、延时垫和抗原垫的材质为孔径8μm～20μm的无纺布、无纺纸、滤纸、棉浆纸、玻璃纤维材料；所述过滤垫的材质选自普鲁士蓝膜、玻璃纤维、石墨烯布、碳布、碳纸、全血分离膜或硝酸纤维膜。


4.根据权利要求1所述的检测卡，其特征在于，所述抗体垫预包被商品化的ABO、Rh、MNS、Kell、P、Kidd、Duffy血型抗体，其包被固定方式可为﹣80℃冷冻干燥后固定、等离子处理、共价键偶联、20～50℃真空干燥、免疫磁珠结合或静电吸附；所述抗原垫预包被ABO血型抗原，包括A1、A2、B、O型红细胞，其包被固定方式为﹣80℃冷冻干燥后固定、4-30℃真空干燥、免疫磁珠结合或静电吸附；或者直接加入新鲜红细胞作为抗原。


5.根据权利要求1所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗阳，张洪，
申请(专利权)人：重庆大学，
类型：发明
国别省市：重庆;50