一种基于谱效关系的金银花质量检测方法技术

本发明专利技术公开了一种基于谱效关系的金银花质量检测方法。(1)金银花HPLC指纹图谱的建立：(2)金银花抗炎作用研究：(3)金银花指纹图谱与抗炎谱效关系的建立：(4)基于金银花的谱效关系建立质量评价标准检测金银花质量。本发明专利技术具有将金银花的指纹图谱与其抗炎作用进行谱效相关性研究，获得可通过其指纹图谱以直接预测其抗炎活性，从而用于判断金银花质量优劣的特点。

【技术实现步骤摘要】
一种基于谱效关系的金银花质量检测方法
本专利技术涉及一种金银花质量检测方法，特别是一种基于谱效关系的金银花质量检测方法。
技术介绍
金银花，中药名。为忍冬科忍冬属植物忍冬LonicerajaponicaThunb、华南忍冬Loniceraconfusa(Sweet)DC、菰腺忍冬LonicerahypoglaucaMiq、黄褐毛忍冬LonicerafulvotomentosaHsuetS.C.Cheng的花蕾。植物忍冬多分布于华东、中南、西南及河北、山西、辽宁、陕西、甘肃等地；华南忍冬多分布于广东、广西、海南；菰腺忍冬分布于浙江、安徽、福建、江西、湖北、湖南、广东、广西、四川、贵州、云南、台湾等；黄褐毛忍冬分布于广西、贵州、云南。具有清热解毒之功效。主治外感风热或温病发热，中暑，热毒血痢，痈肿疔疮，喉痹，多种感染性疾病。同时,现有针对金银花质量检测众多,但这些质量标准大多仅着眼于金银花中金银绿原酸、异绿原酸等活性成分的定量检测。事实上,中药为多组分复杂体系,其疗效的发挥为多成分、多靶点、多途径协同作用的结果,化学成分的简单定量难以全面评价中药质本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于谱效关系的金银花质量检测方法，其特征在于：包括有以下步骤：/n(1)金银花HPLC指纹图谱的建立；/n(2)金银花抗炎作用研究；/n(3)金银花指纹图谱与抗炎谱效关系的建立；/n(4)基于金银花的谱效关系建立质量评价标准检测金银花质量。/n

【技术特征摘要】
1.一种基于谱效关系的金银花质量检测方法，其特征在于：包括有以下步骤：
(1)金银花HPLC指纹图谱的建立；
(2)金银花抗炎作用研究；
(3)金银花指纹图谱与抗炎谱效关系的建立；
(4)基于金银花的谱效关系建立质量评价标准检测金银花质量。


2.根据权利要求1所述的基于谱效关系的金银花质量检测方法，其特征在于：所述步骤(1)中，金银花HPLC指纹图谱的建立包括以下步骤：
供试品溶液的制备为：精密称取金银花粗粉,加入蒸馏水中，回流提取，上清液过滤，即得分析样品溶液，备用；
混合对照品溶液的制备为：分别精密称取马钱苷、新绿原酸、木犀草苷、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C、绿原酸、金丝桃苷对照品适量，加入甲醇中，制成混合对照品溶液，备用；
HPLC色谱条件为：采用AgilentEclipsePlusC18色谱柱250mm×4.6mm，5μm；流动相为0.05-0.15％甲酸水(A)-乙腈(B)，其中乙腈(B)占比为7％-30％，进样量5-15μL，体积流量0.5-1.5mL/min；柱温28-32℃；检测波长：238nm。


3.根据权利要求2所述的基于谱效关系的金银花质量检测方法，其特征在于：所述步骤(1)中，供试品溶液的制备为：精密称取金银花粗粉1.0g，过四十目筛，置具塞锥形瓶中，精密加入蒸馏水25mL，称重，回流提取2h，放冷，称重，用蒸馏水补足减失的重量，摇匀，取上清液过0.45μm微孔滤膜，即得分析样品溶液，备用；
所述混合对照品溶液的制备为：分别精密称取马钱苷、新绿原酸、木犀草苷、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C、绿原酸、金丝桃苷对照品适量，加甲醇分别制成单一对照品储备液；分别精密吸取各单一对照品储备液1mL，置10mL量瓶，加入甲醇，摇匀，定容后，即为混合对照品溶液。


4.根据权利要求2所述的基于谱效关系的金银花质量检测方法，其特征在于：所述步骤(1)中，金银花HPLC指纹图谱的建立中HPLC色谱条件为：采用AgilentEclipsePlusC18色谱柱250mm×4.6mm，5μm；流动相为0.1％甲酸水(A)-乙腈(B)；洗脱梯度0～18min，7％～8％B；18～30min，8％～12％B；30～50min，12％～20％B；50～60min，20％B；60～65min，20％～25％B；65～70min，25％～30％B；70～80min，30％～7％B，进样量10μL，体积流量1.0mL/min；柱温30℃；检测波长：238nm。


5.根据权利要求1所述的基于谱效关系的金银花质量检测方法，其特征在于：所述步骤(2)中，金银花抗炎作用研究，包括小鼠耳肿胀试验、角叉菜胶足肿胀试验、慢性棉球肉芽肿试验。


6.根据权利要求1所述的基于谱效关系的金银花质量检测方法，其特征在于：所述步骤(3)中，金银花指纹图谱与抗炎谱效关系的建立：采用灰色关联分析方法具体包括以下步骤：
确定分析数列：
把金银花各个药效指标作为参考数列，指纹图谱中的特征峰的峰面积作用比较数列，选择药效指标为参考数列，记为Y(k),k＝1,2,3,...,m；选择特征峰的峰面积为比较数列，记为Xi(k)，i＝1,2,3,...,n。
变量的无量纲化：



计算灰色关联系数：



i＝1,2,3,...,n；k＝1,2,3,...,m；ρ为分辨系数，一般取0.5；
△i(k)＝∣y(k)-χi(k)∣，母序列与子序列的绝对差值；
△min＝minmin△i(k)，两极最小差值；
△max＝maxmax△i(k)，两极最大差值；
计算关联度：


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【专利技术属性】
技术研发人员：缪艳燕，曹国琼，刘杰，张永萍，徐剑，
申请(专利权)人：贵州中医药大学，
类型：发明
国别省市：贵州;52