一种中药制剂含有黄芪药材的检测方法技术

本发明专利技术涉及一种含有黄芪药材的中药制剂检测方法，其中色谱条件为：以乙腈为流动相A相,以0.2％磷酸水为流动相B相；其体积配比为流动相A相：流动相B相为：20‑75：80‑25，进行线性梯度洗脱；流速：1.0mL·min

【技术实现步骤摘要】
一种中药制剂含有黄芪药材的检测方法
本专利技术涉及属于中医药领域，尤其涉及一种脑心通胶囊中黄芪药材的检测方法。
技术介绍
脑心通制剂是是由黄芪、丹参、当归、川芎、赤芍、红花、乳香、没药、桑枝、桂枝、牛膝、桃仁、全蝎、地龙、水蛭16味中药加工制备而成的中药制剂。该中成药具有益气活血，化瘀通络的功效。临床用于气虚血滞、脉络瘀阻所致中风中经络，半身不遂、肢体麻木、口眼歪斜、舌强语謇及胸痹心痛、胸闷、心悸、气短；脑梗塞、冠心病心绞痛属上述证候。脑心通制剂处方源出清代王清任经典名方补阳还五汤。基于“脑心同治”理念，方中重用黄芪为君药，大补元气，使元气充盛发挥，益气活血之效，通过补气使元气充盛达到气行则血行之功。臣药是虫类药水蛭、地龙、全蝎，取其药性善走，破血逐瘀，能搜剔络中之邪，发挥通经透络之功效。佐药当归、川芎、丹参、赤芍、红花等十味活血化瘀药，共助君臣药疏通瘀阻之力。桑枝、桂枝针对上肢半身不遂，可引药直达病所温经通脉；牛膝逐瘀血通经络，引血下行共为使药，诸药配伍，主次得当，标本兼治，益气活血，化瘀通络，既通脑络，又通心络，发挥脑心同治作用。中药复方制剂由于其物质基础的复杂性，对其必须制定相应的质量标准，做好质量控制，才能保障其疗效和安全性。在2020年《中药注册管理专门规定》中强调了“质量控制的指标要关注与临床安全、有效性的关联”。脑心通胶囊现行国家标准为2017年国家药典委员会在2015版药典基础上的修订件(【批件号】ZGB2017-34)，该标准仅对脑心通胶囊中芍药苷、丹酚酸B含量进行控制，对于君药黄芪仅以显微鉴定和薄层色谱别定性，缺乏定量控制。如上所述，黄芪是脑心通制剂处方中的君药，且用量约为臣药(水蛭、地龙和全蝎)用量的总和，是处方的重中之重，应当将其含量测定纳入质量标准。然而现有技术中并无针对脑心通制剂中黄芪活性成分建立含量测定方法的报道，该领域亟待科研攻关和技术突破。本专利技术申请主体，是步长制药全资设立高等院校，具有独立的中医药教学和科研中心，承担“脑心通胶囊、稳心颗粒”等步长大品种二次开发创新工作。针对如上所述的步长制药拳头产品脑心通胶囊中君药黄芪质量控制标准技术问题，本专利技术研究团队，通过黄芪药材多样本产区来源的质量筛选研究，建立有关黄芪药材质量优劣的检测方法，并在此基础上，对于中药大品种脑心通胶囊中君药黄芪，确定其在该中药制剂中的4种黄酮类成分的特征图谱，以此提升该制剂的质量可控性。
技术实现思路
本专利技术的目的是解决现有技术的不足，提供一种脑心通胶囊中君药黄芪黄酮类成分的检测方法，该方法具有快速、准确、可控的特点。本专利技术所述脑心通胶囊，均是指由陕西步长制药有限公司生产，其具体的处方配比组成及制备方法为：黄芪66份，赤芍27份，丹参27份，当归27份，川芎27份，桃仁27份，红花13份，醋乳香13份，醋没药13份，鸡血藤20份，牛膝27份，桂枝20份，桑枝27份，地龙27份，全蝎13份，水蛭27份；制备方法是：十六味药材，取地龙，全蝎，粉碎成细粉；其余黄芪等十四味粉碎成细粉，与地龙、全蝎粉末配研，过筛，混匀，装入胶囊，即得。为了实现以上目的，本专利技术所采取的技术方案为：一种中药制剂含有黄芪药材的检测方法，该方法包括如下的步骤：(a)供试品溶液的制备：取脑心通胶囊内容物，加入料液比为1:50～100的乙腈溶剂，进行超声提取30～60min，放置至室温，用乙腈补足损失重量，摇匀，过滤，续滤液即为供试品溶液；(b)对照品标准液的制备：精密称重，毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素对照品，加乙腈溶解，配制为混合对照品溶液；(c)色谱条件：以十八烷基键合硅胶柱为填充剂，以乙腈为流动相A相,以0.2％磷酸水为流动相B相；其体积配比为流动相A相：流动相B相为：20-75：80-25，进行线性梯度洗脱；流速：1.0mL·min-1；柱温25℃，进样10μL，检测波长254nm；(d)色谱峰测定：将上述步骤(a)所制得的供试品溶液注入高效液相色谱仪，按照上述步骤(c)的色谱条件，测定供试液溶液，得到脑心通胶囊中黄芪药材的特征峰，即得。进一步来说，如上检测方法中，所述黄芪药材源自于甘肃陇西。再进一步地，如上检测方法中，所述步骤(a)供试品溶液制备方法中，加入料液比1：80的乙腈溶剂，超声提取时间为45min。进一步地，如上检测方法中，作为本专利技术的优选，所述步骤(b)对照品标准液的制备中，所述毛蕊异黄酮苷0.35mg/mL、芒柄花苷0.2mg/mL、毛蕊异黄酮0.1mg/mL、芒柄花素0.01mg/mL混合对照品溶液，即得。再进一步地，如上检测方法中，作为本专利技术的优选，所述步骤(c)的色谱条件中，采用的线性梯度洗脱条件为：0-10min，流动相A相所占的体积比为：20→40％，流动相B相所占的体积比为：80→60％；10-20min，流动相A相所占的体积比为：40→60％，流动相B相所占的体积比为：60→40％；20-30min，流动相A相所占的体积比为：60→75％，流动相B相所占的体积比为：40→25％；30-45min，流动相A相所占的体积比为：75％，流动相B相所占的体积比为：25％。本专利技术液相条件优化：为了得到较高的离子响应和较好的色谱分离度，选择色谱流动相有机相时，分别考察了甲醇和乙腈，结果显示当乙腈作为有机相时，低波长区域基线漂移较小，说明乙腈相比甲醇在低波长区域干扰更小；选择流动相水相时，考察了纯水、甲酸、磷酸、磷酸缓冲溶液，结果显示磷酸作为流动相的改性剂可以显著提高分离效果，但加入过多的酸会使低波长区域基线明显增高，结果显示乙腈-0.2％磷酸水作为流动相时，分析效果和离子响应更好。本专利技术样品处理方法的优化：脑心通胶囊化学成分非常复杂，各成分极性差异较大，因此本实验分别考察了不同浓度的甲醇和乙醇对脑心通胶囊中提取效果，结果以100％乙腈为最佳，4个黄酮类成分基本都能有效提取；继而又对提取方式超声提取或回流提取予以对比考察，两种方式提取效果结果差异不明显，最终考虑效率，择定超声提取。同时又考察了不同的提取物料比(1：20、1：50、1：80、1：100)，不同的提取时间(30、45和60min)对提取效率的影响。最后确定，1g脑心通胶囊药粉，溶入到80mL的乙腈中，超声处理45min作为脑心通胶囊的样品前处理方法。本专利技术有益效果：1、本专利技术所建立的脑心通胶囊中君药黄芪的液相色谱检测方法，针对君药黄芪中黄酮类4种成分，如毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素，上述4种成分的特征峰分离度较好，能够准确的表征和控制该中成药种君药黄芪的有效含量，进而有效提升该中成药的质量控制标准。2、本专利技术最终确定检测方法，通过多批次验证和方法评价验证，该检测方法具有精密度高、重复性好、稳定性稿等显著效果，能够有效的对于脑心通胶囊质量控制予以提升。3、本专利技术所确立的复方制剂中黄芪质量测控方法，已经在该产品内部质量控制上予以产业化试应用，从各批次产品在本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种中药制剂含有黄芪药材的检测方法，其特征在于，所述的中药制剂为脑心通胶囊，是由黄芪、丹参、当归、川芎、赤芍、红花、乳香、没药、桑枝、桂枝、牛膝、桃仁、全蝎、地龙、水蛭16味中药加工制备而成；所述的检测方法，包括如下的操作步骤：/n(a)供试品溶液的制备：取脑心通胶囊内容物，加入料液比为1:50～100的乙腈溶剂，进行超声提取30～60min，放置至室温，用乙腈补足损失重量，摇匀，过滤，续滤液即为供试品溶液；/n(b)对照品标准液的制备：精密称重，毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素对照品，加乙腈溶解，配制为混合对照品溶液；/n(c)色谱条件：以十八烷基键合硅胶柱为填充剂，以乙腈为流动相A相,以0.2％磷酸水为流动相B相；其体积配比为流动相A相：流动相B相为：20-75：80-25，进行线性梯度洗脱；流速：1.0mL·min

【技术特征摘要】
1.一种中药制剂含有黄芪药材的检测方法，其特征在于，所述的中药制剂为脑心通胶囊，是由黄芪、丹参、当归、川芎、赤芍、红花、乳香、没药、桑枝、桂枝、牛膝、桃仁、全蝎、地龙、水蛭16味中药加工制备而成；所述的检测方法，包括如下的操作步骤：
(a)供试品溶液的制备：取脑心通胶囊内容物，加入料液比为1:50～100的乙腈溶剂，进行超声提取30～60min，放置至室温，用乙腈补足损失重量，摇匀，过滤，续滤液即为供试品溶液；
(b)对照品标准液的制备：精密称重，毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素对照品，加乙腈溶解，配制为混合对照品溶液；
(c)色谱条件：以十八烷基键合硅胶柱为填充剂，以乙腈为流动相A相,以0.2％磷酸水为流动相B相；其体积配比为流动相A相：流动相B相为：20-75：80-25，进行线性梯度洗脱；流速：1.0mL·min-1；柱温25℃，进样10μL，检测波长254nm；
(d)色谱峰测定：将上述步骤(a)所制得的供试品溶液注入高效液相色谱仪，按照上述步骤(c)的色谱条件，测定供试液溶液，得到脑心通胶囊中黄芪药材的特征峰，即得。


2.根据权利要求1所述中药制...

【专利技术属性】
技术研发人员：王月茹，谢伟，王剑龙，
申请(专利权)人：陕西国际商贸学院，
类型：发明
国别省市：陕西;61