用于无创胚胎植入前遗传性检测的方法技术

本发明专利技术公开了一种用于无创胚胎植入前遗传性检测的方法，属于生物检测技术领域，该方法使用上述试剂盒对囊胚培养液样本进行全基因组扩增，扩增产物及父母双方DNA样本进行短串联重复序列分析检测母源污染，扩增产物进行文库制备、二代测序检测，确定染色体数目是否异常；提供的试剂盒对预扩增混合液和扩增混合液进行了优化。本发明专利技术提供的方法可对囊胚培养液进行母源污染的检测，从而判断培养液染色体非整倍体检测结果是否准确可靠，提供了一种颗粒细胞是否去除完全的检测方法，通过试剂盒的优化有效避免了培养液中的成分对扩增产生抑制作用，使得扩增均一性好，单细胞扩增产量高；检测方法简单，结果准确，提升了数据质量。

【技术实现步骤摘要】
用于无创胚胎植入前遗传性检测的方法
本专利技术属于生物检测
，具体涉及一种用于无创胚胎植入前遗传性检测的方法。
技术介绍
随着人类辅助生殖技术的快速发展，人工授精(ArtificialInsemination，AI)、体外受精-胚胎移植(InVitroFertilizationandEmbryoTransfer，IVF-ET)以及胞浆内单精子注射技术(Intra-CytoplasmicSpermInjection，ICSI)已经进入了规模性的临床应用。在体外受精形成的胚胎中，约50％存在染色体异常，可导致移植后早期胚胎丢失、自然流产和死产，是限制辅助生殖技术成功率和有效推广的重要原因之一。传统的胚胎筛选方法是通过静态的胚胎形态学观察对胚胎的质量进行评级，该方法操作简便，但评估指标较单一，依赖医护人员的个人经验，主观经验影响较大，不能完全代表胚胎基因组的状态，无法准确判断胚胎的发育状态和潜能。有研究发现在形态学良好的胚胎中仅42％的染色体是正常的，其中内细胞团评级为A的囊胚中仅30％的染色体正常。自1990年开始，植入前遗传学检测(本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.用于无创胚胎植入前遗传性检测的方法，其特征在于，包括以下步骤：/n步骤1、获取囊胚培养液样本，进行全基因组扩增；/n步骤2、取步骤1所得全基因组扩增产物进行文库制备；/n步骤3、取步骤2所得文库样本进行二代测序检测，将得到的数据进行过滤之后，与参考基因组进行比对，基于对比对结果的统计分析，得到待测样本目标染色体数目是否异常的检测结果；/n步骤4、取步骤1所得全基因组扩增产物及父母双方DNA样本进行短串联重复序列分析检测母源污染，根据STR基因分型结果，同一STR基因座下，检测全基因组扩增产物是否具有2个母亲特有STR型别，如有则认为囊胚培养液有母源污染。/n

【技术特征摘要】
1.用于无创胚胎植入前遗传性检测的方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤1、获取囊胚培养液样本，进行全基因组扩增；
步骤2、取步骤1所得全基因组扩增产物进行文库制备；
步骤3、取步骤2所得文库样本进行二代测序检测，将得到的数据进行过滤之后，与参考基因组进行比对，基于对比对结果的统计分析，得到待测样本目标染色体数目是否异常的检测结果；
步骤4、取步骤1所得全基因组扩增产物及父母双方DNA样本进行短串联重复序列分析检测母源污染，根据STR基因分型结果，同一STR基因座下，检测全基因组扩增产物是否具有2个母亲特有STR型别，如有则认为囊胚培养液有母源污染。


2.根据权利要求1所述的用于无创胚胎植入前遗传性检测的方法，其特征在于，步骤1中使用用于无创胚胎植入前遗传性检测的试剂盒进行全基因组扩增；
所述试剂盒包括预扩增混合液和扩增混合液；
所述预扩增混合液...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭文浒，段佳丽，陈浩，
申请(专利权)人：阿吉安福州基因医学检验实验室有限公司，
类型：发明
国别省市：福建;35