用于前列腺肿瘤细胞的培养基和三维培养方法技术

技术编号:24930334 阅读:66 留言:0更新日期:2020-07-17 19:38
本发明专利技术提供了一种用于前列腺肿瘤细胞的培养基,其特别适合于体外三维培养前列腺肿瘤细胞,特别是来自前列腺癌患者血液的循环肿瘤细胞。本发明专利技术还提供了一种体外三维培养循环肿瘤细胞以形成类器官的方法。

【技术实现步骤摘要】
用于前列腺肿瘤细胞的培养基和三维培养方法
本专利技术属于细胞培养领域,涉及体外培养循环肿瘤细胞并使其分化形成肿瘤类器官组织的方法,以及用于这种方法的培养基。具体来说,本专利技术涉及体外培养来自前列腺肿瘤的循环肿瘤细胞。
技术介绍
循环肿瘤细胞(circulatingtumorcell,CTC)是由肿瘤原发灶中某些高侵袭、高转移能力的少数细胞突破基底膜,进入循环系统形成的,与肿瘤的转移和复发有密切联系。近年来,在各种恶性肿瘤中都广泛报道了CTC与患者的生存期和治疗反应有显著相关性,特别是CTC中的循环肿瘤干细胞(CirculatingTumorStemCell,CTSC),是癌症治疗的重要靶标,因此CTC和CTSC作为诊断和预后的生物标记物有广阔的应用前景。但是目前大多数研究还停留在CTC计数和分子分型上,如果需要进行CTC功能分型、蛋白质组和转录组特征分析、CTC致瘤能力评价以及肿瘤复发转移机制研究,就必须建立一种理想的CTC体外培养和扩增手段。然而,体外成功培养CTC特别是CTSC具有极大的挑战,鲜有报道,原因之一在于CTC特别是CT本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于体外培养前列腺肿瘤细胞的培养基,所述培养基包含细胞因子和激酶抑制剂,所述细胞因子包含FGF7、FGF10、头蛋白(Noggin)和R-Spondin或由FGF7、FGF10、头蛋白(Noggin)和R-Spondin组成,所述激酶抑制剂包含ROCK抑制剂、ALK抑制剂和p38抑制剂或由ROCK抑制剂、ALK抑制剂和p38抑制剂组成。/n

【技术特征摘要】
20191210 CN 20191125938671.一种用于体外培养前列腺肿瘤细胞的培养基,所述培养基包含细胞因子和激酶抑制剂,所述细胞因子包含FGF7、FGF10、头蛋白(Noggin)和R-Spondin或由FGF7、FGF10、头蛋白(Noggin)和R-Spondin组成,所述激酶抑制剂包含ROCK抑制剂、ALK抑制剂和p38抑制剂或由ROCK抑制剂、ALK抑制剂和p38抑制剂组成。


2.权利要求1的培养基,所述培养基包含15-35ng/ml的FGF7,50-150ng/ml的FGF10,50-150ng/ml的头蛋白,350-650ng/ml的R-Spondin1;以及6-14μM的ROCK抑制剂,350-650nM的ALK抑制剂,6-14μM的p38抑制剂。


3.权利要求2的培养基,所述培养基包含15-35ng/ml的FGF7,50-150ng/ml的FGF10,50-150ng/ml的头蛋白,350-650ng/ml的R-Spondin1;以及6-14μM的Y-27632,350-650nM的A83-01,6-14μM的SB202190。


4.权利要求1至3中任一项的培养基,进一步包含约5mM的烟酰胺。


5.权利要求1至4中任一项的培养基,进一步包含约1.25mM的L-谷氨酰胺和/或1-1.5mM的N-乙酰半胱氨酸。


6.权利要求1至5中任一项的培养基,进一步包含0.5-1.5μM的前列腺素E2。


7.权利要求1至6中任一项的培养基,所述前列腺肿瘤细胞是来自受试...

【专利技术属性】
技术研发人员:张文赵长云周敏郑敏周文涵杜菲菲
申请(专利权)人:重庆康克唯生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:重庆;50

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