一种经基因工程改造的抗肿瘤微颗粒的制备方法及应用技术

本发明专利技术提供一种经基因工程改造的抗肿瘤微颗粒的制备方法，包括以下步骤：S1、构建过表达GM‑CSF和跨膜过表达GM‑CSF的重组质粒；S2、获得离体肿瘤细胞进行原代肿瘤细胞培养，并获得原代肿瘤细胞；S3、包装过表达GM‑CSF和跨膜过表达GM‑CSF的慢病毒颗粒；S4、用慢病毒颗粒对所述步骤S2得到的原代肿瘤细胞进行感染，得到过表达GM‑CSF和跨膜过表达GM‑CSF的原代肿瘤细胞；S5、将所述步骤S4得到的原代肿瘤细胞及培养液进行X线照射，收集放疗后的上清液，获得所需微颗粒和凋亡的肿瘤细胞碎片混合物；S6、将所述步骤S5得到的混合物进行离心，本发明专利技术可解决常规局部化疗效果差、副作用大、易产生耐药性、对机体免疫产生抑制的技术问题。

【技术实现步骤摘要】
一种经基因工程改造的抗肿瘤微颗粒的制备方法及应用
本专利技术涉及抗肿瘤
，具体为一种经基因工程改造的抗肿瘤微颗粒的制备方法及应用。
技术介绍
放射治疗是临床常规治疗肿瘤的有效治疗手段，肿瘤放射治疗是利用放射线产生的电离辐射来治疗肿瘤的一种局部治疗方法。大约70％以上的肿瘤患者在治疗的过程中需要用放射治疗，约有40％的癌症可以用放疗根治。放射治疗在肿瘤治疗中的作用和地位日益突出，已成为治疗恶性肿瘤的主要手段之一，尤其在头颈肿瘤、乳腺癌、肺癌和宫颈癌等一些肿瘤治疗中发挥着重要作用。但临床上有些肿瘤并不常规接受放射治疗，如胃癌、结肠癌、膀胱癌、肾癌，以及恶性胸腔积液(Malignantpleuraleffusion,MPE)等。虽然采用粒子植入等肿瘤内照射方式可以扩大放疗的适应症，但对外科手术技能要求较高，且存在手术风险。另外，此种方式也无法针对MPE进行治疗。基因工程(geneticengineering)，又称基因拼接技术和DNA重组技术，是以分子遗传学为理论基础，以分子生物学和微生物学的现代方法为手段，将不同来源的基因按预先设计的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种经基因工程改造的抗肿瘤微颗粒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：/nS1、构建过表达GM-CSF和跨膜过表达GM-CSF的质粒；/nS2、获得离体肿瘤细胞进行原代肿瘤细胞培养，并获得原代肿瘤细胞；/nS3、包装过表达GM-CSF和跨膜过表达GM-CSF的慢病毒颗粒；/nS4、用慢病毒颗粒对所述步骤S2得到的原代肿瘤细胞进行感染，得到过表达GM-CSF和跨膜过表达GM-CSF的原代肿瘤细胞；/nS5、将所述S4得到的原代肿瘤细胞及培养液进行X线照射，收集放疗后的上清液，获得所需微颗粒和凋亡的肿瘤细胞碎片混合物；/nS6、将所述S5得到的混合物进行离心，即得到所述基因工程改造的抗肿瘤微颗...

【技术特征摘要】
1.一种经基因工程改造的抗肿瘤微颗粒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、构建过表达GM-CSF和跨膜过表达GM-CSF的质粒；
S2、获得离体肿瘤细胞进行原代肿瘤细胞培养，并获得原代肿瘤细胞；
S3、包装过表达GM-CSF和跨膜过表达GM-CSF的慢病毒颗粒；
S4、用慢病毒颗粒对所述步骤S2得到的原代肿瘤细胞进行感染，得到过表达GM-CSF和跨膜过表达GM-CSF的原代肿瘤细胞；
S5、将所述S4得到的原代肿瘤细胞及培养液进行X线照射，收集放疗后的上清液，获得所需微颗粒和凋亡的肿瘤细胞碎片混合物；
S6、将所述S5得到的混合物进行离心，即得到所述基因工程改造的抗肿瘤微颗粒。


2.根据权利要求1所述的一种经基因工程改造的抗肿瘤微颗粒的制备方法，其特征在于，S6中所述离心包括依次进行第一离心、第二离心、第三次离心，所述第一离心的转速为1000g，时间为10分钟，得上清；第二离心的转速为14000g，时间为2分钟，得上清；第三次离心的转速为14000g，时间为60分钟，得沉淀即为微颗粒。


3.根据权利要求1所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑俊武，金红林，万超，黄浩，郑成武，卫路，洪磊，金秀妍，刘群，
申请(专利权)人：武汉圣润生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：湖北;42