真皮乳头和毛囊等同物的体外制备方法技术

本发明专利技术涉及用于从源自真皮乳头和/或源自结缔组织鞘的成纤维细胞体外制备真皮乳头等同物的方法；用于通过在如此获得的所述真皮乳头上培养增殖性上皮细胞来体外制备毛囊等同物的方法；通过上述方法生产的体外真皮乳头和毛囊等同物以及这些等同物用于治疗脱发的用途和用于评价化妆品、药品或皮肤护理产品的效果的用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】真皮乳头和毛囊等同物的体外制备方法本专利技术涉及一种用于从源自真皮乳头(dermalpapilla)和/或源自结缔组织鞘的成纤维细胞体外制备真皮乳头等同物的方法。本专利技术还涉及一种用于通过在如此获得的所述真皮乳头上培养增殖性上皮细胞来体外制备毛囊等同物的方法。本专利技术类似地涉及通过上述方法生产的体外真皮乳头和毛囊等同物，并且涉及其用于治疗脱发的用途和用于评价化妆品、药品或皮肤护理产品的效果的用途。单根毛发在其生命期内经历三个具有极不相等的持续时间的发育期：-毛发生长期是单根毛发的活跃期，在此期间毛发生存和规则生长。它持续从4年至7年。围绕着单根毛发根球的乳头的芽细胞(germcell)不断地产生使单根毛发能够生存和生长的物质。接下来，芽细胞的增殖在毛囊的底部停止。然后结束单根毛发的活跃期；另一个短得多的时期开始。-退化期：在仅仅15天的时间内，单根毛发的毛球消失了(因为它由于芽细胞的中断而不再获得营养)，并且以加快的速度转化。乳头消失，也就是说空心球变成实心；它角质化，变硬，并且变成角质组织。然后单根毛发死亡；毛囊紧绷以排出死亡的单根本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于体外制备真皮乳头等同物的方法，该方法包括以下中的至少一个步骤：在包含无血清营养培养基B的支持物上培养成纤维细胞，持续足以使所述成纤维细胞从所述支持物脱离并聚在一起形成至少一个球状体的时间段，这些成纤维细胞源自真皮乳头和/或源自结缔组织鞘；使用的所述支持物的表面不允许细胞粘附；所述培养支持物选自2D或3D圆底微孔板培养支持物。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20171030 FR 17602421.一种用于体外制备真皮乳头等同物的方法，该方法包括以下中的至少一个步骤：在包含无血清营养培养基B的支持物上培养成纤维细胞，持续足以使所述成纤维细胞从所述支持物脱离并聚在一起形成至少一个球状体的时间段，这些成纤维细胞源自真皮乳头和/或源自结缔组织鞘；使用的所述支持物的表面不允许细胞粘附；所述培养支持物选自2D或3D圆底微孔板培养支持物。


2.如权利要求1所述的方法，其中以至少14000个细胞/cm2的密度，优选地以在14000个细胞/cm2与47600个细胞/cm2之间的密度，甚至更好以在23500个细胞/cm2与24500个细胞/cm2之间的密度，将所述成纤维细胞接种在所述2D培养支持物上。


3.如权利要求1所述的方法，其中以至少3000个细胞/cm2的密度，优选地至少9000个细胞/cm2的密度，甚至更好以在9000个细胞/cm2与20000个细胞/cm2之间的密度，将所述成纤维细胞接种在所述3D培养支持物上。


4.如权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述营养培养基B包含500至1500mg/l的氨基酸、2至18mg/l的维生素、1500至4500mg/l的葡萄糖、8750至10000mg/l的无机盐、2至20μg/ml的胰岛素、2至60ng/ml的氢化可的松、以及任选地50至200μg/ml的抗生素和/或抗真菌剂。


5.如权利要求1至4中任一项所述的方法，其中将所述成纤维细胞培养至少3天，优选地至少4天，甚至更好4天与21天之间。


6.如权利要求1至5中任一项所述的方法，其中所述支持物的表面是中性的和疏水性的。


7.如权利要求1至6中任一项所述的方法，该方法在培养所述成纤维细胞的步骤之前还包括以下预备步骤：
a.从头皮样品中分离出生长期毛囊；
b.通过该真皮乳头和/或该结缔组织鞘的显微解剖来回收该真皮乳头和/或该结缔组织鞘的成纤维细胞；
c.在由DMEMGlutamax构成的，补充了20％体积的胎牛血清(FCS)、50至90mg/l的非必需氨基酸和任选地50至200μg/ml的抗生素和/或抗真菌剂的营养培养基A中，进行所述真皮乳头成纤维细胞和/或所述结缔组织鞘成纤维细胞的扩增。


8.一种体外真皮乳头等同物，其可通过如权利要求1...

【专利技术属性】
技术研发人员：K巴卡，T塞拉图赖，
申请(专利权)人：莱雅公司，
类型：发明
国别省市：法国;FR