本发明专利技术公开了一种lncRNA IGFL2‑AS1作为结肠癌诊断标志物的应用，属于肿瘤分子生物学领域。本发明专利技术提供的lncRNA IGFL2‑AS1在结肠癌中呈现高水平表达，在结肠癌细胞恶性转化及肿瘤形成过程中发挥重要作用。人为敲低结肠癌细胞中的lncRNA IGFL2‑AS1，能够明显抑制SW620细胞的增殖、迁移、侵袭能力和恶性程度，表明lncRNA IGFL2‑AS1在结肠癌发病过程中发挥重要作用，可以作为诊疗结肠癌的新的分子标记和药物靶点。
【技术实现步骤摘要】
lncRNAIGFL2-AS1作为结肠癌诊断标志物的应用
本专利技术属于肿瘤分子生物学领域，具体地说，涉及一种lncRNAIGFL2-AS1作为结肠癌诊断标志物的应用。
技术介绍
目前全球范围内，在恶性肿瘤中结直肠癌的发病率排第三位，而死亡率排第二位，被认为是对公共健康的主要威胁。由于不良的饮食方式和生活习惯，结肠癌的发病率和死亡率呈现明显上升的趋势，是最常见的胃肠道恶性肿瘤之一。在我国，结肠癌每年新增病例约17万左右，且患者发病年龄较年轻，对我国人民健康造成了极大的危害。结直肠癌变是一个多步骤的生物学过程，涉及到多个癌基因和抑癌基因的失调。尽管对结直肠癌这一疾病有了比较深入的了解，诊断技术也在不断地进展，治疗措施也越来越高效，但结直肠癌患者的总体生存率仍然相对较低。目前，伴随着结直肠癌日益增长的发病率和不良的预后，迫切需要更深入地了解结直肠癌致病过程中具体的分子机制，因为这可以促进发展更有效的治疗策略，最终改善病人的预后。迄今为止，随着对全基因组和转录组测序技术的改进，人们发现大多数哺乳动物的全基因组可以进行转录，但是其中大部分的转录本都是受到一定限制的或者根本不具备蛋白质编码的能力，这些基因被称为ncRNA。lncRNA是由RNA聚合酶II(RNAPII)进行转录，长度超过200个核苷酸的非编码RNA，它们很少有或者几乎没有开放阅读框(ORFs)。目前大量的研究结果表明，lncRNA在胚胎发育、表观遗传沉默、转录和翻译控制、细胞的各种生物学行为和肿瘤发生等多种基本生物过程中发挥不可替代的作用。此外，广泛的研究也提供了强有力的证据，证明lncRNA在一系列人类疾病中发挥功能作用，包括各种类型的癌症，如乳腺癌、胰腺癌、肺癌、胃癌等等。并且还发现许多lncRNA在肿瘤的发生发展过程中参与了致癌和抑癌的过程，比如，lncRNAMVIH可作为致癌基因促进非小细胞肺癌细胞的增殖和侵袭，相反的，lncRNAKCNK15-AS1被证明在非小细胞肺癌中作为抑癌基因起到保护作用。近期研究表明，lncRNA在结直肠癌的发生和发展过程中也扮演着调制器的角色，从而表明它们有作为新的治疗靶点的潜力。关于lncRNA在结直肠癌的形成和进展过程中的分子机制和生物学功能的研究还处于起步阶段，虽然迄今为止研究人员在阐明具体的分子机制方面的仅取得了有限的成果，但这些有限的研究也足以表明lncRNA是结直肠癌诊断和治疗的潜在生物靶点。目前，关于lncRNA在结肠癌发生过程中的作用尚鲜有报道。因此，本专利技术通过检测结肠癌中lncRNAIGFL2-AS1的表达及功能，以期为结肠癌的治疗提供突破点。
技术实现思路
本专利技术的目的在于，提供一种lncRNAIGFL2-AS1作为结肠癌诊断标志物的应用。本专利技术所采用的技术方案如下：lncRNAIGFL2-AS1作为结肠癌诊断标志物的应用。进一步地，lncRNAIGFL2-AS1的核苷酸序列如SEQIDNO：1所示。检测lncRNAIGFL2-AS1的试剂在制备结肠癌诊断检测试剂或试剂盒中的应用。进一步地，检测试剂或试剂盒用于检测生物样品中lncRNAIGFL2-AS1的表达量。进一步地，检测试剂或试剂盒包括：对lncRNAIGFL2-AS1具有检测特异性的PCR引物。进一步地，对lncRNAIGFL2-AS1具有检测特异性的PCR引物如下：上游引物：5’-TGCTGAGCACAGACATGTGA-3’；下游引物：5’-GTGCTGCAGAATCAACGACC-3’。一组针对lncRNAIGFL2-AS1基因靶点的干扰RNA，lncRNAIGFL2-AS1基因靶点的序列如SEQIDNO：1所示，干扰RNA包括siRNA-1、siRNA-2和siRNA-3中的至少一种。进一步地，siRNA-1的序列为：5’-AAAAUUGGUGAGAAGUUCCUU-3’。进一步地，siRNA-2的序列为：5’-UAAAAUUGGUGAGAAGUUCCU-3’。进一步地，siRNA-3的序列为：5’-ACUUCUUCAUUCUUGUUGGCU-3’。与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：本专利技术提供的lncRNAIGFL2-AS1在结肠癌中呈现高水平表达，在结肠癌细胞恶性转化及肿瘤形成过程中发挥重要作用。人为敲低结肠癌细胞中的lncRNAIGFL2-AS1，能够明显抑制SW620细胞的增殖、迁移、侵袭能力和恶性程度，表明lncRNAIGFL2-AS1在结肠癌发病过程中发挥重要作用，可以作为诊疗结肠癌的新的分子标记和药物靶点。附图说明此处所说明的附图用来提供对本专利技术的进一步理解，构成本专利技术的一部分，本专利技术的示意性实施例及其说明用于解释本专利技术，并不构成对本专利技术的不当限定。在附图中：图1为Real-timePCR检测lncRNAIGFL2-AS1在结肠癌及癌旁组织中的表达情况；图2为敲低lncRNAIGFL2-AS1的SW620细胞系中lncRNAIGFL2-AS1的表达情况；图3为敲低lncRNAIGFL2-AS1的SW620细胞系的CCK-8增殖情况；图4为敲低lncRNAIGFL2-AS1的SW620细胞系的细胞迁移结果；图5为敲低lncRNAIGFL2-AS1的SW620细胞系的细胞侵袭实验结果。具体实施方式本专利技术利用荧光定量PCR实验研究lncRNAIGFL2-AS1在结肠癌中的表达量明显高于癌旁组织。提取结肠癌及癌旁组织的总RNA，反转录合成cDNA，设计lncRNAIGFL2-AS1PCR引物进行PCR扩增，首次克隆获得lncRNAIGFL2-AS1基因。通过设计siRNA，以获得敲低lncRNAIGFL2-AS1的SW620结肠癌细胞系，研究lncRNAIGFL2-AS1对SW620细胞增殖、迁移、侵袭以及恶性程度的影响，从而探讨lncRNAIGFL2-AS1在结肠癌发病过程中的作用，及其作为新的肿瘤标记物在结肠癌临床诊断、治疗和药物开发中的应用。以下通过特定的具体实例说明本专利技术的实施方式，本领域技术人员可由本说明书所揭露的内容轻易地了解本专利技术的其他优点与功效。本专利技术还可以通过另外不同的具体实施方式加以实施或应用，本说明书中的各项细节也可以基于不同观点与应用，在没有背离本专利技术的精神下进行各种修饰或改变。下列实施案例中若无特殊说明，所用技术手段为本领域技术人员熟知的常规手段。实施例1：lncRNAIGFL2-AS1的Real-timePCR检测提取总RNA：从结肠癌组织样本及癌旁组织样本，加入1mLReagent后置于室温(15～30℃)使核蛋白复合物完全分离。5min后加入0.2mL氯仿，盖好管盖，手持剧烈振荡15s，室温放置2～3min。于2～8℃条件下以12000g离心15min，将上层无色水相转移至另一个1.5mLEppendorf管。加入0.5mL异丙醇，室温放置本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.lncRNA IGFL2-AS1作为结肠癌诊断标志物的应用。/n
【技术特征摘要】
1.lncRNAIGFL2-AS1作为结肠癌诊断标志物的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述lncRNAIGFL2-AS1的核苷酸序列如SEQIDNO：1所示。
3.检测lncRNAIGFL2-AS1的试剂在制备结肠癌诊断检测试剂或试剂盒中的应用。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述检测试剂或试剂盒用于检测生物样品中lncRNAIGFL2-AS1的表达量。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述检测试剂或试剂盒包括：对lncRNAIGFL2-AS1具有检测特异性的PCR引物。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述的对lncRNAIGFL2-AS1具有检测特异性的PCR引物如下：
上游引物：5’-TGCTGAGCACAGACATGTG...
【专利技术属性】
技术研发人员：李小俊，毕焕京，闫飞，李倩，
申请(专利权)人：陕西帆昌生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：陕西;61
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。