同时检测一种治疗小儿遗尿症中药的五种成分含量的方法技术

本发明专利技术公开了同时检测一种治疗小儿遗尿症中药的五种成分含量的方法，所述治疗小儿遗尿症中药由麻黄、肉桂、益智、白果、菟丝子、鸡内金共六味中药材制成，所述五种成分为盐酸麻黄碱、桂皮醛、肉桂酸、槲皮素、银杏内脂C，所述检测方法包括将中药用提取溶剂提取，然后上高效液相色谱仪进行检测的步骤。本发明专利技术与现有技术相比具有检测灵敏度高，速度快，操作简单等优点，大幅提高了检测效率和检测准确率，能更加全面地控制中药内在质量。

【技术实现步骤摘要】
同时检测一种治疗小儿遗尿症中药的五种成分含量的方法
本专利技术属于药物检测领域，涉及同时检测一种治疗小儿遗尿症中药的五种成分含量的方法。
技术介绍
CN1593496A公开了一种治疗小儿遗尿症的中药，它由麻黄、肉桂、益智、白果、菟丝子、鸡内金共六味中药材制成，具有温肾宣肺、运化脾胃、缩尿止遗的功效，主要用于治疗小儿遗尿肾气不足证。该中药是健民药业集团股份有限公司独家品种，商品名小儿益麻颗粒。小儿益麻颗粒为小儿遗尿常用药品，临床疗效确切，市场需求量大，但其质量标准简单，仅对菟丝子、肉桂、益智、白果4味药材进行了薄层定性鉴别，另外还采用HPLC法对盐酸麻黄碱进行了含量测定。以上质量控制方法存在以下缺陷：(1)需要对产品分别进行提取和检测，导致检测周期长，需要大量人力物力和检测设备；(2)仅对盐酸麻黄碱进行了定量检测，其它成分均只能定性，无法全面控制产品内在质量，不能客观反映和评价中药质量的一致性。因此，迫切需要建立一种针对小儿益麻颗粒的新的质量控制方法，以建立可溯源的全程质量控制体系。
技术实现思路
本专利技术的目的是建立一种同时检测小儿益麻颗粒中五种成分含量的方法，旨在更高效、可靠地控制产品质量。为实现上述目的，本专利技术采用如下技术手段：同时检测一种治疗小儿遗尿症中药的五种成分含量的方法，所述治疗小儿遗尿症中药由麻黄、肉桂、益智、白果、菟丝子、鸡内金共六味中药材制成，所述五种成分为盐酸麻黄碱、桂皮醛、肉桂酸、槲皮素、银杏内脂C，所述检测方法包括将所述中药用提取溶剂提取，然后上高效液相色谱仪进行检测的步骤，所述高效液相色谱仪含有紫外检测器，所述紫外检测器的设定检测波长为205-230nm，所述高效液相色谱仪的固定相为氨基色谱柱，流动相A为含0.05-0.5％四氢呋喃的乙腈，流动相B为0.05-0.5％三乙胺溶液，梯度洗脱，流速为0.5-2ml/min，柱温为25～35℃。优选地，所述提取溶剂为乙醇或甲醇或正丁醇。进一步优选地，所述提取溶剂中还含有0.5-2％三乙胺。优选地，所述检测波长为210nm。优选地，所述流动相A为含0.1％四氢呋喃的乙腈。优选地，所述流动相B为0.1％三乙胺溶液。优选地，所述梯度洗脱的时间为70min，分为5个时间段，各时间段流动相A和B的体积变化见下表，时间min流动相A(体积％)流动相B(体积％)0-2020-3080-7020-3030-4070-6030-4040-5060-5040-6050-6050-4060-7060-7040-30优选地，所述流速为1ml/min。本专利技术的有益效果是：(1)本专利技术能通过一次样品制备和进样同时检测出小儿益麻颗粒中五种物质的含量，检测时间不超过2小时，与现有技术相比具有检测灵敏度高，速度快，操作简单等优点，大幅提高了检测效率，能更加全面地控制中药内在质量。(2)本专利技术实现了小儿益麻颗粒中五种成分的定量检测，与现有的单一成分定量结合其它成分定性检测相比，本专利技术能更加全面地控制中药内在质量，更好地杜绝中药掺假、伪劣现象，更客观地反映中药质量的一致性，更有利于对中药生产的各个阶段包括药材投料等环节进行监控，从而建立可溯源的、与临床疗效高度关联的全程质量控制体系。(3)本专利技术通过对HPLC的样品提取、固定相、流动相、检测波长、洗脱程序等条件进行大量筛选，不仅建立该方法，而且使待测成分的色谱峰分离度高、干扰少、出峰时间短、峰面积大，从而提高了检测结果的准确度和灵敏性。附图说明图1是五种混合对照品的HPLC图谱(1.盐酸麻黄碱；2.桂皮醛；3.肉桂酸；4.槲皮素；5.银杏内酯C)。图2是小儿益麻颗粒的HPLC标准图谱。图3是待测样品用含1％磷酸的甲醇提取后得到的HPLC图谱。图4是待测样品用水饱和正丁醇提取后得到的HPLC图谱。图5是以C18色谱柱为固定相得到的HPLC图谱。图6是以乙腈-0.1％三乙胺为流动相得到的HPLC图谱。图7是以含0.1％四氢呋喃的乙腈-水为流动相得到的HPLC图谱。图8是乙腈-水为流动相得到的待测样品HPLC图谱。具体实施方式下面通过具体实施例对本专利技术进行详细地说明。以下实施例中所用到的小儿益麻颗粒由健民药业集团股份有限公司生产。处方：益智600g、麻黄450g、肉桂150g、菟丝子1000g、白果1200g、鸡内金150g。制法：以上六味，取益智、肉桂水蒸气蒸馏提取挥发油并用β-环糊精包合，蒸馏后的药渣与菟丝子、麻黄、白果、鸡内金混合加水煎煮二次，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.35～1.38(50～60℃)的稠膏。将稠膏与挥发油β-环糊精包合物以及适量蔗糖粉、糊精、枸橼酸粉、阿斯巴甜、橙味香精混匀，制粒，干燥，制成1000g，即得。试药：小儿益麻颗粒(批号：191001-191005，由健民药业集团股份有限公司提供)；对照品盐酸麻黄碱(供含测用，批号：171241-201809)、桂皮醛(供含测用，批号：110710-201821)、肉桂酸(供含测用，批号：110786-201604)、槲皮素(供含测用，批号：100081-201610)、银杏内脂C(供含测用，批号：110864-201809)均购自中国食品药品检定研究院；乙腈为色谱纯，磷酸为分析纯，三乙胺为分析纯，甲醇为分析醇，水为超纯水。实施例1供试品溶液的制备在进行HPLC含量测定前，需要对待测药物进行提取，提取的目的一是减少制剂中的检测杂质，包括中药中与检测成分无关的提取成分，以及制剂中的辅料，从而尽可能地减少杂质对待测对象特征峰峰形的干扰，使特征峰具有更好的分离度；二是为了将待测成分尽可能充分地从药物中提取出来，从而提高特征峰的峰面积，保证检测的准确度。我们根据小儿益麻颗粒的处方和制剂特点，结合药物成分的溶解性、极性、稳定性，分别考察了四种提取溶剂对检测效果的影响。供试品溶液制备方法：1.取装量差异项下的本品，混匀，研细，取1.0g，精密称定，精密加入含1％(体积)三乙胺的甲醇50ml，超声处理(功率250W，频率20kHz)40分钟，滤过，取续滤液，即得。2.取装量差异项下的本品，混匀，研细，取1.0g，精密称定，精密加入含1％(体积)磷酸的甲醇50ml，超声处理(功率250W，频率20kHz)40分钟，滤过，取续滤液，即得。3.取装量差异项下的本品，混匀，研细，取1.0g，精密称定，精密加入水饱和正丁醇50ml，超声处理(功率250W，频率20kHz)40分钟，滤过，取续滤液，即得。仪器：Agilent1100高效液相色谱仪，四元泵，在线真空脱气系统，自动进样本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.同时检测一种治疗小儿遗尿症中药的五种成分含量的方法，所述治疗小儿遗尿症中药由麻黄、肉桂、益智、白果、菟丝子、鸡内金共六味中药材制成，其特征在于：所述五种成分为盐酸麻黄碱、桂皮醛、肉桂酸、槲皮素、银杏内脂C，所述检测方法包括将所述中药用提取溶剂提取，然后上高效液相色谱仪进行检测的步骤，所述高效液相色谱仪含有紫外检测器，所述紫外检测器的设定检测波长为205-230nm，所述高效液相色谱仪的固定相为氨基色谱柱，流动相A为含0.05-0.5％四氢呋喃的乙腈，流动相B为0.05-0.5％三乙胺溶液，梯度洗脱，流速为0.5-2ml/min，柱温为25～35℃。/n

【技术特征摘要】
1.同时检测一种治疗小儿遗尿症中药的五种成分含量的方法，所述治疗小儿遗尿症中药由麻黄、肉桂、益智、白果、菟丝子、鸡内金共六味中药材制成，其特征在于：所述五种成分为盐酸麻黄碱、桂皮醛、肉桂酸、槲皮素、银杏内脂C，所述检测方法包括将所述中药用提取溶剂提取，然后上高效液相色谱仪进行检测的步骤，所述高效液相色谱仪含有紫外检测器，所述紫外检测器的设定检测波长为205-230nm，所述高效液相色谱仪的固定相为氨基色谱柱，流动相A为含0.05-0.5％四氢呋喃的乙腈，流动相B为0.05-0.5％三乙胺溶液，梯度洗脱，流速为0.5-2ml/min，柱温为25～35℃。


2.如权利要求1所述同时检测一种治疗小儿遗尿症中药的五种成分含量的方法，其特征在于：所述提取溶剂为乙醇或甲醇或正丁醇。


3.如权利要求2所述同时检测一种治疗小儿遗尿症中药的五种...

【专利技术属性】
技术研发人员：李霞，黄志军，赵刚，吴木琴，向阳，陈鹏，熊登科，
申请(专利权)人：健民药业集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：湖北;42