Kallistatin蛋白在制备防治OHSS的药物中的应用制造技术

本发明专利技术为Kallistatin蛋白在制备防治OHSS的药物中的应用，公开了Kallistatin蛋白在制备预防和/或治疗卵巢过度刺激综合征的药物中的应用，以及一种预防和/或治疗卵巢过度刺激综合征的药物。本申请发明专利技术人从分子机制入手，以ICR雌鼠构建OHSS模型，腹腔注射给予Kallistatin蛋白，探究其对OHSS的预防治疗作用。结果显示，Kallistatin蛋白能显著降低OHSS模型小鼠的体重、卵巢体积、卵巢重量和血管通透性，且不会对排卵、妊娠胎鼠的数目和重量产生不良影响，表明Kallistatin可有效预防和治疗OHSS。本发明专利技术为OHSS临床预防和治疗提供了新的干预途径和候选药物。

【技术实现步骤摘要】
Kallistatin蛋白在制备防治OHSS的药物中的应用
本专利技术属于生物医药
，具体涉及Kallistatin蛋白在制备防治OHSS的药物中的应用。
技术介绍
卵巢过度刺激综合征(OHSS)是体外受孕辅助生育技术的主要并发症之一，是一种人体对促排卵药物产生的过度反应，以双侧卵巢多个卵泡发育、卵巢增大、毛细血管通透性异常、异常体液和蛋白外渗进入人体第三间隙为特征进而引起一系列的临床症状。通常发生于HCG扳机后或移植后的妊娠早期。OHSS临床上常常表现为恶心、呕吐、腹胀、少尿、体重增加和呼吸困难等，严重者可发生肝肾功能障碍甚至危及生命。根据病情的严重程度临床上常常将其分为轻度、中度和重度OHSS，根据发病时间又可分为早发型OHSS和晚发型OHSS。在IVF周期中的中-重度OHSS的发病率为3.1-8％，然而在高危患者中可以高达20％，其中约2％的患者需要住院治疗。多发生于注射HCG后3～7天。如未妊娠，其病程约14天；如妊娠，将继续持续一段时间，且病情可能加重。故需要对症治疗，现有以下几种治疗方案：1.轻度：一般不需特殊处理，鼓励病人多进水，大多数病人可在1周内恢复。2.中度：指导患者自我检测，包括卧床休息，摄入足够液体，监测腹围、尿量及体重，部分患者可住院观察。3.重度：应住院治疗，治疗目的在于保持足够血容量，纠正血液浓缩，维持正常尿量，最大程度改善症状，避免严重并发症发生，如休克、血栓栓塞、水电解质平衡紊乱、肝肾功能异常等。(1)严密监护各项生命体征变化；(2)对症治疗：①休息，进高蛋白饮食早期少量多次饮水，及时补充生理盐水、葡萄糖，以增加尿量。②扩容首选人体白蛋白静脉滴注，有助于保持血浆胶体渗透压和有效血容量，降低游离雌激素和一些有害因子。③减少液体向胸腹腔渗漏可口服泼尼松片。④预防血栓形成鼓励患者翻身、活动四肢、按摩双腿、服用肠溶阿司匹林片。严重者需要抗凝治疗。⑤腹腔积液的处理有指征时，可行腹腔引流。⑥胸腔积液的处理发生较少见，如有胸腔积液常为右侧，有时胸腔积液、腹腔积液同时表现；(3)OHSS出现卵巢破裂、内出血严重时，应手术治疗。出现扭转时，可抬高臀部、改变体位，多可自行缓解。必要时手术治疗。SERPINA3K属于丝氨酸蛋白酶抑制剂(serineproteinaseinhibitor，Serpin)超家族的一员，又叫做激肽释放酶结合蛋白(kallikrin-bindingprotein，KBP)，是激肽释放酶-激肽系统(Kallikreinkininsystem，KKS)的重要组成部分，由ChaoJ等人于1984年首次在人和大鼠的血浆中发现。SERPINA3K是第一个被发现的激肽释放酶抑制剂，它能与组织激肽释放酶特异性共价结合形成稳定的复合物，进而抑制其蛋白水解活性。SERPINA3K氨基酸序列在不同物种间有高度的同源性，在人体内它被称为Kallistatin(KAL)，广泛表达于各个器官中，如肝脏、肾脏、视网膜、胰腺、睾丸、子宫、心肺、血管平滑肌细胞和内皮细胞等部位。与其他丝氨酸蛋白酶抑制剂(如PEDF)一样，SERPINA3K也具有抑制血管增生的能力，是一种内源性的血管形成抑制因子。2002年RobertQ.Miao等通过体外细胞实验和体内动物实验首次发现SERPINA3K能够抑制亲血管因子VEGF和bFGF诱导的血管内皮细胞的增殖、迁移和粘附，进而起到抑制血管生成和肿瘤组织生长的作用。在低氧诱导的视网膜血管增生的大鼠模型中，研究者亦发现SERPINA3K能抑制血管增生和减轻血管渗漏，且作用呈剂量依赖性增强，此外，他们还发现SERPINA3K可以下调血管内皮细胞中VEGF的表达并阻止其与受体结合。有研究者以肝癌移植小鼠为动物模型，发现腹腔注射给予SERPINA3K可以抑制肿瘤的生长，降低瘤体组织新生血管的形成，通过抑制细胞核内HIF-1瘤基因的表达和转录进而下调VEGF的水平，同样，在胃癌移植模型小鼠中也观察到类似的结果。目前对OHSS的治疗主要从疾病发生的临床症状入手，主要缓解已发生的临床症状，未从疾病根源出发改善疾病机制，本质上治标未治本。
技术实现思路
基于此，本专利技术的目的在于克服上述现有技术的不足之处而提供Kallistatin蛋白在制备防治OHSS的药物中的应用，本申请专利技术人通过从OHSS的发病机制入手，采用体内外实验证实了Kallistatin对OHSS具有预防和治疗作用，为OHSS的临床预防提供新的干预途径和候选药物。为实现上述目的，本专利技术采用的技术方案为：Kallistatin蛋白在制备预防和/或治疗卵巢过度刺激综合征的药物中的应用。本专利技术还提供了一种预防和/或治疗卵巢过度刺激综合征的药物。为实现上述目的，本专利技术采用的技术方案为：一种预防和/或治疗卵巢过度刺激综合征的药物，所述药物包含Kallistatin蛋白。在其中一些实施例中，所述预防和/或治疗卵巢过度刺激综合征的药物还包含药物学可接受的载体。在其中一些实施例中，所述药物为口服剂型或注射剂型。在其中一些实施例中，所述口服剂型为颗粒剂、胶囊剂、片剂、溶液剂、乳剂、糖浆剂或酏剂。在其中一些实施例中，所述注射剂型为注射液或粉针剂。本专利技术还提供了Kallistatin基因在制备预防和/或治疗卵巢过度刺激综合征的药物中的应用。本专利技术还提供了Kallistatin重组表达载体在制备预防和/或治疗卵巢过度刺激综合征的药物中的应用。本专利技术还提供了一种预防和/或治疗卵巢过度刺激综合征的药物，所述药物包含Kallistatin基因的激动剂。在其中一些实施例中，所述预防和/或治疗卵巢过度刺激综合征的药物还包含药物学可接受的载体。以上所述药物可包含药学上可接受的任何载体或稳定制剂，如后续开发携带Kallistatin基因的腺病毒载体；药物的剂型是任何能用于检测的剂型，这些剂型可以是注射液或粉针；水相、固相和喷雾相，其水相形式可以是水性或油性悬浮液、溶液、乳剂、糖浆剂或酏剂，或者是一种在使用前用水或其它适宜载体复配的干燥产品、该液体制剂可含有常规的添加剂。相对于现有技术，本专利技术的有益效果为：本申请专利技术人具体从分子机制入手，从根源上解决OHSS患者的疾病情况。以ICR雌鼠构建OHSS模型，腹腔注射给予Kallistatin蛋白，探究其对OHSS的预防治疗作用。结果显示，Kallistatin蛋白能显著降低OHSS模型小鼠的体重、卵巢体积、卵巢重量和血管通透性，且不会对排卵、妊娠胎鼠的数目和重量产生不良影响。表明Kallistatin可有效预防和治疗OHSS，是OHSS临床预防和治疗的新的干预途径和候选药物。附图说明图1为Kallistatin蛋白的SDS-PAGE和WesternBlot鉴定结果图，其中，A为SDS-PAGE鉴定结果图；B为WesternBlot鉴定结果图；M代表蛋白marker；1代表IPTG诱导前提取的细菌总蛋白；2代表IPTG诱导后提取的细菌总蛋白；3代表亲和层析及纯化后的Kal本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.Kallistatin蛋白在制备预防和/或治疗卵巢过度刺激综合征的药物中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.Kallistatin蛋白在制备预防和/或治疗卵巢过度刺激综合征的药物中的应用。


2.一种预防和/或治疗卵巢过度刺激综合征的药物，其特征在于，所述药物包含Kallistatin蛋白。


3.根据权利要求2所述的预防和/或治疗卵巢过度刺激综合征的药物，其特征在于，所述药物还包含药物学可接受的载体。


4.根据权利要求3所述的预防和/或治疗卵巢过度刺激综合征的药物，其特征在于，所述药物为口服剂型或注射剂型。


5.根据权利要求6所述的预防和/或治疗卵巢过度刺激综合征的药物，其特征在于，所述口服剂型为颗粒剂、胶囊剂、片剂、溶液剂、乳剂、糖浆剂...

【专利技术属性】
技术研发人员：李磊，姚亚超，黄建芳，刘静，易婧雅，
申请(专利权)人：广州医科大学附属第三医院广州重症孕产妇救治中心，广州柔济医院，
类型：发明
国别省市：广东;44