一种采用连续过滤的外泌体质谱分析方法技术

本发明专利技术涉及一种采用连续过滤的外泌体质谱分析方法，包括(1)将待测液体整备后提取待测液体样本；(2)将所述待测液体样本经过一级过滤膜、二级过滤膜和三级过滤膜三层过滤，在三级过滤膜上获取外泌体样本；(3)直接取出所述三级过滤膜，使用由乙腈、三氟乙酸、去离子水和芥子酸制成的混合溶剂处理后，在所述三级过滤膜上进行质谱检测获得检测结果，本发明专利技术方法分析方便且稳定，检测时间小于1小时，与目前标准超速离心方法获得的外泌体囊胞分离纯化后质谱检测的图谱主要信号一致，本发明专利技术成本低、样本所需量少、快速方便、精准稳定，避免了超速离心技术等的耗时耗费资源等缺点，具有广泛的生物和医学运用前景。

【技术实现步骤摘要】
一种采用连续过滤的外泌体质谱分析方法
本专利技术涉及一种采用连续过滤的外泌体质谱分析方法，属于医学实验分析方法。
技术介绍
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术(Matrix-assistedlaserdesorption/ionizationtime-of-flightmassspectrometry,MALDI-TOFMS)自1980年代发展起来，具有超高灵敏度和特异性，MALDI-TOFMS技术通过对生物分子的分子量进行准确测定，实现生物大分子的鉴定分析；通过分析不同细菌的指纹图谱，MALDI-TOFMS能实现医学实验快速鉴定；此外，MALDI-TOFMS技术也广泛应用于蛋白质组学研究。外泌体是胞外囊泡(ExtracellularVesicles，EV，胞外囊泡尺寸约30-1000nm)的一种，其直径约为30-150nm，外泌体囊壁由磷脂双分子层组成，囊壁富含膜蛋白。外泌体囊泡内含有蛋白质、核酸(miRNA、mRNA等)、膜蛋白或脂质等物质。超速离心是目前外泌体分离方法的“金标准”，但是超速离心技术分离纯化外泌体存在耗时、本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种采用连续过滤的外泌体质谱分析方法，其特征在于，包括以下步骤：/n(1)将待测液体整备后提取待测液体样本；/n(2)将所述待测液体样本经过一级过滤膜、二级过滤膜和三级过滤膜三层过滤，在三级过滤膜上获取外泌体样本；/n(3)直接取出所述三级过滤膜，使用由乙腈、三氟乙酸、去离子水和芥子酸制成的混合溶剂处理后，在所述三级过滤膜上进行质谱检测获得检测结果。/n

【技术特征摘要】
1.一种采用连续过滤的外泌体质谱分析方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将待测液体整备后提取待测液体样本；
(2)将所述待测液体样本经过一级过滤膜、二级过滤膜和三级过滤膜三层过滤，在三级过滤膜上获取外泌体样本；
(3)直接取出所述三级过滤膜，使用由乙腈、三氟乙酸、去离子水和芥子酸制成的混合溶剂处理后，在所述三级过滤膜上进行质谱检测获得检测结果。


2.如权利要求1所述的采用连续过滤的外泌体质谱分析方法，其特征在于，所述一级过滤膜的孔径为1000nm，所述二级过滤膜的孔径为300-450nm，所述三级过滤膜的孔径为30-50nm。


3.如权利要求1或2所述的采用连续过滤的外泌体质谱分析方法，其特征在于，所述一级过滤膜、二级过滤膜和三级过滤膜之间都设置有中空套管，所述中空套管的直径4-6mm，待测液体样本通过中空套管和三层过滤膜的过滤速度为50μl/min。


4.如权利要求1-3任一项所述的采用连续过滤的外泌体质谱分析方法，其特征在于，所述一级过滤膜、二级过滤膜和三级过滤膜为混合纤维素酯膜或聚醚砜膜。


5.如权利要求1-4任一项所述的采用连续过滤的外泌体质谱分...

【专利技术属性】
技术研发人员：沈宇辉，
申请(专利权)人：苏州先觉生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32