一种用于检测金葡菌肠毒素sea、seb、sec基因的三重荧光定量PCR试剂盒制造技术

本发明专利技术提供了一种用于检测肠毒素基因sea、seb、sec的荧光定量PCR试剂盒，包括含有Premix ExTaq、引物和探针、阳性质粒及灭菌水，其中，引物、探针序列如SEQ ID No.1‑9所示；所述的探针的5’端标记有报告荧光基团，所述的探针的3’端标记有淬灭荧光基团。本发明专利技术还提供了采用上述的试剂盒检测肠毒素基因sea、seb、sec的方法。通过本发明专利技术的试剂盒，可以迅速的检测金葡菌肠毒素基因sea、seb及sec，对肠毒素进行分型，为食物中毒的确诊提供依据。

【技术实现步骤摘要】
一种用于检测金葡菌肠毒素sea、seb、sec基因的三重荧光定量PCR试剂盒
本专利技术属于生物工程领域，涉及一种试剂盒，具体来说是一种用于检测金葡菌肠毒素sea、seb、sec基因的三重荧光定量PCR试剂盒。
技术介绍
金黄色葡萄球菌肠毒素是一类结构、毒力相似、抗原性不同的胞外蛋白质，是引起食物中毒的主要因子。据报道，1μg/kg的金葡菌肠毒素便可引起呕吐、腹泻等症状。在《葡萄球菌食物中毒的诊断标准、判定原则和处理原则(WS/T80-1996)》中规定“从中毒食物、患者吐泻物中经培养检出金黄色葡萄球菌，菌株经肠毒素检测证实在不同样品中检出同一型别的肠毒素”，才能判定为肠毒素引起的食物中毒，因此金葡菌肠毒素的分型工作非常重要。对于金黄色葡萄球菌肠毒素的检测，酶联免疫法是应用较多的检测方法，但是免疫学的方法存在很多缺点。随着分子生物学的发展，渐渐开始使用PCR方法对肠毒素基因进行检测。PCR技术具有灵敏度高、特异性强的优点。目前国内外对于肠毒素基因的检测大多采用普通PCR或荧光定量PCR法逐一检测，缺乏快速高效的多重qPCR方法。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于检测肠毒素基因sea、seb、sec的荧光定量PCR试剂盒，包括引物和探针，其特征在于：所述的引物、探针序列如下所示：/n第一上游引物的序列如SEQ ID No.1所示，/n第一下游引物的序列如SEQ ID No.2所示，/n第一探针的序列如SEQ ID No.3所示，/n第二上游引物的序列如SEQ ID No.4所示，/n第二下游引物的序列如SEQ ID No.5所示，/n第二探针的序列如SEQ ID No.6所示，/n第三上游引物的序列如SEQ ID No.7所示，/n第三下游引物的序列如SEQ ID No.8所示，/n第三探针的序列如SEQ ID No.9所示，/n任意一个所...

【技术特征摘要】
1.一种用于检测肠毒素基因sea、seb、sec的荧光定量PCR试剂盒，包括引物和探针，其特征在于：所述的引物、探针序列如下所示：
第一上游引物的序列如SEQIDNo.1所示，
第一下游引物的序列如SEQIDNo.2所示，
第一探针的序列如SEQIDNo.3所示，
第二上游引物的序列如SEQIDNo.4所示，
第二下游引物的序列如SEQIDNo.5所示，
第二探针的序列如SEQIDNo.6所示，
第三上游引物的序列如SEQIDNo.7所示，
第三下游引物的序列如SEQIDNo.8所示，
第三探针的序列如SEQIDNo.9所示，
任意一个所述的探针的5’端标记有报告荧光基团，所述的探针的3’端标记有淬灭荧光基团。


2.根据就权利要求1所述的一种用于检测肠毒素基因sea、seb、sec的荧光定量PCR试剂盒，其特征在于：还包括PremixExTaq、阳性质粒及灭菌水。


3.采用权利要求1或2所述的试剂盒检测肠毒素基因sea、seb、sec的方法，其特征在于包括如下步骤：
1)先配制qPCR反应液，在每一个qPCR反应体系中，所述的qPCR反应液的体积为22μL，所述的qPCR反应液包括12.5μL2×浓度的PremixExTaq、1μL的第一上游引物、1μ...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙冰清，姜芹，张文刚，顾欣，黄士新，商军，吴剑平，张浩然，黄家莺，张妤，
申请(专利权)人：上海市动物疫病预防控制中心上海市兽药饲料检测所，上海市畜牧技术推广中心，
类型：发明
国别省市：上海;31